【摘要】：內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells, EPCs)是內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,具有高增殖潛能,不僅參與胚胎期的血管發(fā)生,在成人的血管新生中也發(fā)揮重要作用。在成人心血管疾病中的研究已較多,但在新生兒方面的研究較少。Sugawara等發(fā)現(xiàn)孕婦外周血中的EPCs數(shù)量隨孕期的增加而增多,表明EPCs可能在維持妊娠期胎盤(pán)發(fā)生和血管新生方面發(fā)揮重要作用。Acosta等發(fā)現(xiàn)妊娠期糖尿病的孕婦血中EPC減少,產(chǎn)后臍帶血中EPC也減少；提示孕期外周血EPCs數(shù)量和功能的變化可能反映某種病理妊娠狀態(tài)。Baker等[研究發(fā)現(xiàn)早產(chǎn)兒臍帶血中的EPC數(shù)量比足月兒中的高,發(fā)現(xiàn)患支氣管肺發(fā)育不良的新生兒臍帶血中內(nèi)皮祖細(xì)胞是減少的。Machalinska等發(fā)現(xiàn)患ROP的早產(chǎn)兒臍帶血中EPC數(shù)量明顯增加。以上說(shuō)明孕婦或新生兒患病會(huì)有相應(yīng)的內(nèi)皮祖細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)變化。為此我們通過(guò)研究早產(chǎn)兒和足月兒臍帶血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量的差異,明確是否能為胎兒疾病的預(yù)測(cè)、病情嚴(yán)重程度的評(píng)估等方面提供理論數(shù)據(jù)。 目的： 探討早產(chǎn)兒及剖宮產(chǎn)兒臍帶血中的內(nèi)皮祖細(xì)胞的數(shù)量變化,為早產(chǎn)兒、剖宮產(chǎn)兒易患疾病提供理論依據(jù)。 方法： 自2012年10月至2013年9月收集早產(chǎn)兒臍帶血13例(均為單胎,胎齡30～36周,剖宮產(chǎn)6例,順產(chǎn)7例,男6例,女7例)。收集足月兒臍帶血24例(均為單胎,胎齡37-43周,剖宮產(chǎn)13例,順產(chǎn)11例,男14例,女10例)。(1)產(chǎn)婦分娩后出生10分鐘內(nèi)采集臍帶血標(biāo)本1ml置于肝素抗凝管內(nèi)低溫保存。(2)于3小時(shí)內(nèi)處理好上機(jī)檢測(cè)。采用流式細(xì)胞分析儀檢測(cè)EPC。 具體步驟：(1)取100μl抗凝臍帶血,加入CD133-PE抗體及10μ1VEGFR-2-APC抗體,震蕩后室溫避光孵育20分鐘。(2)加入1ml溶血素,震蕩后室溫避光5min。(3)1500rpm離心5min,棄上清液。(4)加入lml PBS,震蕩后1500rpm離心5min,棄上清液。(5)加入0.5mlPBS中,放到流式細(xì)胞儀中檢測(cè)。用流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)早產(chǎn)兒和足月兒臍帶血的內(nèi)皮祖細(xì)胞。 結(jié)果： 早產(chǎn)兒組臍帶血EPC占單個(gè)核細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)為0.013%±0.0124%；足月兒組臍帶血EPC占單個(gè)核細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)為0.0036%±0.0025%；兩組間差異比較有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.614,P=0.001)。足月剖宮產(chǎn)組臍帶血EPC占單個(gè)核細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)為0.0027%±0.0020%,足月順產(chǎn)組臍帶血EPC占單個(gè)核細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)為0.0048%±0.0026%,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.226,P=0.039)。足月兒男嬰組和女?huà)虢M臍帶血內(nèi)皮祖細(xì)胞占單個(gè)核細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)分別為0.0042%±0.0024%,0.0036%±0.0030%,兩組差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.590,P=0.477)。早產(chǎn)兒剖宮產(chǎn)和順產(chǎn)組臍帶血內(nèi)皮祖細(xì)胞占單個(gè)核細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)分別.為0.0126%±0.0159%,0.0134%±0.0097%,兩組差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.104,P=0.920)。早產(chǎn)兒男嬰組和女?huà)虢M臍帶血內(nèi)皮祖細(xì)胞占單個(gè)核細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)分別為0.0134%土0.0157%,0.0126%±0.010%,兩組差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.108,P=0.917)。 結(jié)論： 證實(shí)了早產(chǎn)兒臍帶血EPC數(shù)量高于足月兒,這是早產(chǎn)兒、剖宮產(chǎn)兒易患疾病的基礎(chǔ),為利用EPC治療相關(guān)疾病提供理論依據(jù)。但目前不能明確為早產(chǎn)兒或剖宮產(chǎn)兒易患疾病做出預(yù)測(cè),尚不能對(duì)病情嚴(yán)重程度的評(píng)估等方面提供理論數(shù)據(jù)。有待進(jìn)一步的研究。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R722.6

【參考文獻(xiàn)】

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1 段華新;盧光t;程臘梅;;臍血來(lái)源的兩種內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2008年02期

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本文編號(hào)：2525125