【摘要】：第一部分：南京地區(qū)五歲以下兒童常見(jiàn)腹瀉病毒的分子流行病學(xué)研究 目的：通過(guò)病例對(duì)照研究以了解2010-2011年度南京地區(qū)四種常見(jiàn)腹瀉病毒在五歲以下兒童中的分子流行病學(xué)特征,為小兒病毒性腹瀉的防治提供依據(jù)。 方法：采集2010年7月至2011年6月南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京兒童醫(yī)院5歲以下腹瀉患兒和健康兒童的糞便標(biāo)本各428份。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)輪狀病毒,采用巢式反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(Nest RT-PCR)對(duì)輪狀病毒陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行分型；采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)杯狀病毒和星狀病毒,聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)腺病毒。 結(jié)果1.病例組428份標(biāo)本中244份(57.0%)至少檢出四種病毒中的一種。常見(jiàn)腹瀉病毒中,HRV陽(yáng)性率最高,檢出率為43.9%,其次為HuCV(14.7%), HAstV(3.97%),HAdV(3.03%)。輪狀病毒G血清型中以G1型(39.9%),其次是G3型(22.3%),P基因型中以P[8]型(68.1%)為主,其次是P[4](5.4%),G血清型與P基因型組合中最常見(jiàn)的為G1P[8](31.4%),其次是G3P[8](15.4%)。杯狀病毒中92.1%屬于諾如病毒GII型,未檢出諾如病毒GI型,札如病毒5例,以諾如病毒GⅡ-42006b型為主要流行株。15例星狀病毒感染中14例HAstV1型,1例HAstV5型,均為genogroup A。人腺病毒以F組的AdV41型(8/13)為主,同時(shí)還發(fā)現(xiàn)A組AdV31型1例,C組AdVl型3例。 2.對(duì)照組428份標(biāo)本中僅有39份(9.11%)至少檢出四種病毒中的一種。其中輪狀病毒檢出3例,分別為G1P[8]、G3P[8]、G2P[4]。對(duì)照組標(biāo)本杯狀病毒檢出19例,諾如病6例,札如病毒11例,2例為諾如病GⅡ型和札如病毒混合感染。HAstV陽(yáng)性率為3.03%(13/428),2例HAstV1型,1例HAstV6型,10例HAstV5型。HAdV陽(yáng)性率為0.07%(3/428),AdV1型、AdV3型和AdV12型各1例。 3.病例組428份標(biāo)本中混合感染共35份(8.18%),均為2種病毒混合感染,HRV和HuCV混合感染最多占75%(21/35)、其次是HRV和HAstV為22.9%(8/35),發(fā)病高峰在10-12月份(20/35)。對(duì)照組不存在混合感染。 結(jié)論：病毒是本地嬰幼兒急性腹瀉的常見(jiàn)病原體。輪狀病毒為最主要的病毒病原,主要流行株為G1P[8]。札如病毒和星狀病毒的無(wú)癥狀感染值得關(guān)注,長(zhǎng)期的系統(tǒng)監(jiān)測(cè)具有重要意義。 第二部分：人博卡病毒感染與嬰幼兒急性胃腸道炎的相關(guān)性研究 目的：通過(guò)臨床病例對(duì)照研究了解不同基因型人博卡病毒(Human Bocavirus,HBoV)在南京地區(qū)嬰幼兒中的流行情況,探討可能的危險(xiǎn)因素及臨床特征,以及不同基因型之間的差異,評(píng)價(jià)HBoV感染與嬰幼兒腹瀉之間的相關(guān)性。 方法：采集2010年7月至2011年6月南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京兒童醫(yī)院5歲以下急性胃腸炎患兒糞便標(biāo)本及兒童保健中心健康嬰幼兒正常糞便標(biāo)本各428份。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR)方法檢鋇HBoV并確定其病毒載量,同時(shí)通過(guò)巢式PCR(NestPCR)對(duì)博卡病毒陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)并測(cè)序確定其基因型別。使用MEGA5.0軟件進(jìn)行基因序列分析,SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,探討其疾病相關(guān)性。 結(jié)果：1、HBoV在428份急性胃腸炎患兒糞便標(biāo)本中陽(yáng)性檢出率22.9%(98／428),平均病毒載為4.11×104copies/ml,而對(duì)照組HBoV陽(yáng)性率僅8.88%(38／428),平均病毒載量為4.04×105copies/ml,2組HBoV檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=29.12,P=0.000),病例組HBoV混合感染較對(duì)照組多見(jiàn)(χ2=31.47,P=0.000)。 2、病例組HBoV2檢出率為15.65%(66/428),被檢出的五種病毒中位居第二；HBoV1檢出36(8.41%)例,HBoV3檢出3(0.7%)例,HBoV4沒(méi)有檢出,HBoV2檢出率及病毒載量高于HBoV1(P0.02)。對(duì)照組HBoV2檢出率6.07%(26/428),檢出率最高；HBoV1檢出24(5.61%)例,HBoV3和HBoV4沒(méi)有檢出。病例組HBoV2檢出率及病毒載量高于對(duì)照組(P0.05),HBoV1和HBoV2混合感染分布較多。 3、病例組HBoV病毒陽(yáng)性患兒中與常見(jiàn)腹瀉病毒混合感染率高達(dá)59.2%,其中與HRV混合感染有41例,HBoV2與HRV混合感染后更易出現(xiàn)發(fā)熱、嘔吐(P0.02)癥狀。對(duì)照組75份(17.52%)標(biāo)本至少檢出1種病毒,僅有3例是HBoV與HuCV的混合感染。 4、多因素條件Logistic回歸分析結(jié)果顯示HBoVl與嬰幼兒腹瀉沒(méi)有疾相關(guān)性,HBoV2與嬰幼兒急性胃腸炎有疾病相關(guān)性(OR=1.984,CI=1.052-3.742)但弱于HRV、HuCV和HAdV。HBoV2感染在RV組和非RV組的檢出率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=13.92,P＜0.05),單因素條件Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)HBoV2和HRV感染具有相關(guān)性(OR=2.263,CI=I.446-3.541,P=0.000)。 結(jié)論：1、博卡病毒感染在南京地區(qū)嬰幼兒中普遍存在,檢出率僅次于輪狀病毒,通過(guò)Logistic回歸分析表明HBoV2是嬰幼兒急性胃腸炎的病原,但其病原學(xué)作用弱于HRV、HuCV和HAdV。博卡病毒感染并不影響疾病的嚴(yán)重程度。 2.人博卡病毒與其它病毒混合感染率較高,尤其是和輪狀病毒混合感染；與HRV混合感染后較易出現(xiàn)發(fā)熱、嘔吐癥狀,可能是HRV的協(xié)同作用；HRV感染可能是HBoV2感染的易感因素。
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【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R725.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2382950