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上海地區(qū)手足口病住院患兒流行病學分析及EV71早期實驗診斷研究

發(fā)布時間:2018-11-23 06:28
【摘要】:目的:對上海地區(qū)手足口病住院患兒臨床及分子流行病學進行分析,以了解手足口病患兒臨床流行病學特點和腸道病毒的分子流行病學特點;同時探討重癥手足口病危險因素。建立導致手足口病的主要病原體—新型腸道病毒71(EV71)的環(huán)介導的逆轉錄等溫擴增(RT-LAMP)快速檢測方法。 對象和方法:對2009年1月1日~2010年12月31日入住復旦大學附屬兒科醫(yī)院傳染科的手足口病患兒臨床病例資料進行分析和總結,分析臨床流行病學情況;采集該組患兒中437例糞標本,應用RT-PCR方法檢測腸道病毒進行病原分析;同時將7株EV71分離株進行全基因組測序及基因樹分析,以明確上海地區(qū)流行株的基因型別。 通過軟件分析和人工篩選,獲得擴增EV71的引物群,建立RT-LAMP檢測體系,并將此技術與常規(guī)的RT-PCR方法比較。 結果:3208例住院患兒1.一般資料:1期患兒2458例,2期726例,3期危重癥24例,包括7例死亡病例。男性2095人(65.3%),女性1113人(34.7%)。男:女為1.8:1。年齡最小2個月10d,最大12歲7個月,中位數年齡2歲1個月,以1-4歲發(fā)病率最高,為62.4%。824例(25.7%)患兒為上海市常住戶籍人口。2.臨床表現:多以皮疹(99.2%)、發(fā)熱(88.3%)、嘔吐(25.4%)、咳嗽(22.5%)、四肢抖動(10.2%)表現為主。四肢抖動及嘔吐能提示病情的中樞神經系統受累(2期與1期卡方檢驗,P0.05)。3期患兒熱峰(39.61±0.46)度,平均熱程(5±1.73)d,與2期及1期患兒比較有統計學意義(P0.05)。37.2%患兒合并呼吸道感染,肝功能損害少見(1.4%)。3.實驗室指標:3期患兒血白細胞計數(15.33±8.18)×109/L,血糖(8.63±3.51)mmol/L,與1期及2期比較有統計學意義(P0.05),而C反應蛋白及腦脊液白細胞計數各期比較無顯著差異。14例患兒胸片表現肺水腫。20.3%患兒頭顱MRI表現高信號異常,以腦干為主。 上海地區(qū)爆發(fā)的手足口病主要由EV71感染引起,占86.5%;6.9%由CA16感染引起。且發(fā)現EV71與CA16共感染現象,共感染率占所有CA16感染的17.6%。根據VP1基因結構區(qū)域構建的基因樹分析提示在上海地區(qū)流行的病毒株為C4基因亞型。而根據全基因組序列構建的基因樹提示上海流行株可分為兩組,一種可能起源于中國的其他城市,而另一種可能與韓國或馬來西亞來源類似。 RT-LAMP技術檢測手足口病患者臨床糞便樣品,EV71陽性率為92.6%,比RT-PCR更敏感(73.5%);兩種方法均未檢測到假陽性;而RT-LAMP陰性準確率為80%,明顯比RT-PCR(22.2%)更可靠。 結論:手足口病的流行有一定的區(qū)域性及季節(jié)性,與家庭經濟、衛(wèi)生條件、性別都有一定的關系。1~4年齡兒童為手足口病高發(fā)年齡。四肢抖動、頻繁嘔吐及高熱、發(fā)熱持續(xù)不退都可作為重癥危險因素。而外周血白細胞、血糖、影像學檢查可作為實驗室預警指標。 C4亞型是引起上海地區(qū)手足口病EV71流行的最主要的亞型,而根據全基因組序列的基因樹分析可分為兩類。同時發(fā)現EV71與CA16的共感染現象。 用RT-LAMP技術檢測EV71,比常規(guī)RT-PCR更敏感,陰性結果比RT-PCR更可靠,而且比常規(guī)RT-PCR更易操作、省時,結果判別也更簡便。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:復旦大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2012
【分類號】:R725.1

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本文編號:2350609

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