本文選題：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 + 人肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(A)��； 參考：《中山大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)科學(xué)版)》2017年06期

【摘要】：【目的】探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(h UCMSC)對感染銅綠假單胞菌(PA)狀態(tài)下人肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(A549)的影響�！痉椒ā咳朔闻茛蛐蜕掀ぜ�(xì)胞A549(1×105/m L)2 m L與PA(3×104CFU/m L)2 m L共培育6 h后,加入h UCMSC(1×106/m L)2 m L為實(shí)驗(yàn)組,加入等量磷酸緩沖液(PBS)為感染組,A549與PBS及培養(yǎng)基共培育為對照組。比較組間A549細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變(透射電鏡),A549細(xì)胞存活率(CCK-8新型細(xì)胞增殖檢測試劑盒),A549細(xì)胞凋亡率(Annexin V-FITC/PI雙染色流式細(xì)胞儀)以及A549肺表面活性物質(zhì)A(SP-A)表達(dá)量(Western Blot)�！窘Y(jié)果】電鏡細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察顯示,感染組A549細(xì)胞受損明顯,胞質(zhì)出現(xiàn)空泡變性,染色質(zhì)高度凝集,可見凋亡小體;實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞包膜結(jié)構(gòu)完整,核膜完整,核仁明顯,核染色質(zhì)電子密度低,染色質(zhì)均一,未見凋亡小體;對照組A549細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,細(xì)胞膜表面微絨毛豐富,核膜完整,核周間隙結(jié)構(gòu)正常,染色質(zhì)均一;感染組與對照組相比,感染組A549細(xì)胞細(xì)胞存活率顯著降低[(70.35±2.89)%與(97.37±2.07)%,n=3,P0.01],凋亡率顯著增加[(8.63%±0.16)%與(2.55±0.11)%,n=3,P0.01],SP-A表達(dá)顯著降低[(0.105±0.01)與(0.232±0.015),n=3,P0.01];實(shí)驗(yàn)組與感染組相比,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞存活率顯著增加[(85.69±3.07)%與(70.35±2.89)%,n=3,P0.01],凋亡率顯著下降[(6.34±0.12)%與(8.63±0.16)%,n=3,P0.01],感染組中,PA可能損傷A549細(xì)胞,使其SP-A表達(dá)量著減少(n=5,P0.05),實(shí)驗(yàn)組中,h UCMSC可能對感染后A549細(xì)胞的保護(hù)作用,其SP-A表達(dá)量增加(n=5,P0.05)。【結(jié)論】h UCMSC能抑制感染狀態(tài)下的A549細(xì)胞凋亡,保護(hù)A549細(xì)胞分泌SP-A。
[Abstract]:[Objective] to investigate the effect of human umbilical cord mesenchymal stem cells (H UCMSC) on human alveolar type II epithelial cells (A549) in human infected Pseudomonas aeruginosa (PA). [Methods] the A549 (1 * 105/m L) 2 m L and PA (3 x 104CFU/m L) of human alveolar type II epithelial cells were incubated in 2, and 2 were added to the experimental group, adding equal amount of phosphoric acid. The buffer solution (PBS) was the infection group, and the A549 and PBS and the culture medium were co cultured as the control group. The morphological changes of A549 cells (transmission electron microscopy), the survival rate of A549 cells (CCK-8 new cell proliferation detection kit), the apoptosis rate of A549 cells (Annexin V-FITC/PI double dyed flow cytometry) and A (SP-A) expression of A549 lung surfactant were compared. N Blot). [results] the morphological observation of electron microscope showed that the A549 cells in the infected group were damaged obviously, the cytoplasm appeared vacuolated degeneration, the chromatin was highly agglutinated, and the apoptotic body was visible. The cell membrane structure of the experimental group was complete, the nuclear membrane was complete, the nucleolus was obvious, the nucleus chromatin electron density was low, the chromatin homogeneous, no apoptotic body was found, and the control group A549 cell junction was not found. The cell membrane surface microvilli was rich, the nuclear membrane was intact, the structure of the nuclear perinuclear space was normal, and the chromatin was uniform. Compared with the control group, the survival rate of A549 cells in the infection group was significantly lower [(70.35 + 2.89)% and (97.37 + 2.07)%, n=3, P0.01], and the apoptosis rate was significantly increased [(8.63% + 0.16)% and (2.55 + 0.11)%, n=3, P0.01], SP-A expression was significantly reduced. [(0.105 + 0.01) and (0.232 + 0.015), n=3, P0.01]; compared with the infection group, the cell survival rate of the experimental group was significantly increased [(85.69 + 3.07)% and (70.35 + 2.89)%, n=3, P0.01], and the apoptosis rate decreased significantly [(6.34 + 0.12)% and 8.63 + 0.16), n=3, P0.01], PA may damage A549 cells, making the SP-A expression reduction (n=5, P0.05), experiments In the group, H UCMSC may protect the infected A549 cells and increase the expression of SP-A (n=5, P0.05). [Conclusion] h UCMSC can inhibit the apoptosis of A549 cells in the infected state and protect the SP-A. secretion of A549 cells.
【作者單位】： 廣東省婦幼保健院新生兒科;廣東省婦幼保健院檢驗(yàn)科;
【基金】：廣州市科技計劃項(xiàng)目(2013J4100008)
【分類號】：R722.1

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本文編號：2065085