嬰兒痙攣臨床及遺傳病因?qū)W研究
發(fā)布時(shí)間:2018-06-01 01:26
本文選題:癲癇性腦病 + 嬰兒痙攣。 參考:《復(fù)旦大學(xué)》2014年博士論文
【摘要】:第一部分:195例嬰兒痙攣臨床特征分析研究背景及目的:嬰兒痙攣是嬰幼兒期最常見(jiàn)的癲癇性腦病,病因及病理生理學(xué)機(jī)制尚不完全明確,缺少針對(duì)性治療方法,預(yù)后不良。目前在臨床上對(duì)于嬰兒痙攣的診斷主要依靠臨床表現(xiàn),缺少標(biāo)準(zhǔn)化的病因分析和分子診斷。本研究對(duì)195例嬰兒痙攣的臨床特征進(jìn)行分析及預(yù)后隨訪。研究方法:采用回顧性資料分析和隊(duì)列研究對(duì)195例嬰兒痙攣病例進(jìn)行臨床特征分析,針對(duì)病史、體格及神經(jīng)系統(tǒng)檢查、影像學(xué)檢查、代謝篩查及常規(guī)臨床遺傳檢查對(duì)其進(jìn)行病因?qū)W分析,同時(shí)對(duì)所有病例的治療方法、癲癇發(fā)作、智能發(fā)育、并發(fā)癥進(jìn)行隨訪,病程≥2年者進(jìn)入統(tǒng)計(jì)隊(duì)列。在病因診斷的基礎(chǔ)之上,考慮有具有遺傳背景的嬰兒痙攣病例進(jìn)入遺傳學(xué)研究。研究結(jié)果:共有195例嬰兒痙攣患兒進(jìn)入本研究,均為漢族。其中男性120例,女性75例,男女比率約為1.6:1。平均起病年齡為5.9±4.4月,其中177例患兒在至少一次腦電監(jiān)測(cè)中發(fā)現(xiàn)高峰失律。其中癥狀性130例(67%),而隱源性65例(33%)。癥狀性包括出生缺陷82例(宮內(nèi)/生后發(fā)育遲緩44例,21三體綜合征2例,結(jié)節(jié)性硬化15例,腦發(fā)育畸形9例,多系統(tǒng)發(fā)育異常12例),圍產(chǎn)期腦損傷及感染性因素48例。其中出生缺陷或隱源性嬰兒痙攣病例共147例,考慮遺傳相關(guān)病因可能起到重要作用。所有病例均接受抗癲癇藥物治療,多為聯(lián)合用藥,在治療前6個(gè)月內(nèi),丙戊酸鈉是為最多的選擇(170例次),其中50例癲癇無(wú)發(fā)作≥1年病例中,17例使用丙戊酸鈉合并托吡酯;135例患者病程時(shí)間≥2年,其中94.8%預(yù)后不良。包括,38例癲癇發(fā)作難以控制;128例患兒存在中到重度智能發(fā)育障礙;具有孤獨(dú)癥樣表型有11例,其中2例通過(guò)ADOS診斷評(píng)估確診;2例患兒死亡。結(jié)論:嬰兒痙攣為嚴(yán)重的癲癇性腦病,臨床治療仍面臨巨大的挑戰(zhàn),預(yù)后不良。而通過(guò)195例嬰兒痙攣病因分析后,其中具有出生缺陷或隱源性嬰兒痙攣,共147例,考慮遺傳相關(guān)病因可能起到重要作用。第二部分:嬰兒痙攣遺傳病因?qū)W研究研究背景及目的:嬰兒痙攣是嬰幼兒期最常見(jiàn)的癲癇性腦病,病因尚不完全明確,缺少針對(duì)性治療方法,預(yù)后不良。遺傳學(xué)機(jī)制是嬰兒痙攣重要的病因之一,但是,其具體的遺傳病因機(jī)制目前尚不完全明確。在歐美人群中,基因拷貝數(shù)變異和單基因點(diǎn)突變與嬰兒痙攣相關(guān)已有相關(guān)報(bào)道,而在中國(guó)人群中,這方面的研究尚少,本部分通過(guò)全基因組拷貝數(shù)分析和二代測(cè)序技術(shù)對(duì)嬰兒痙攣的遺傳病因?qū)W機(jī)制進(jìn)行研究。研究方法:我們采用Agilent180k微陣列核型分析技術(shù)對(duì)嬰兒痙攣病例進(jìn)行全基因組拷貝數(shù)變異研究,所發(fā)現(xiàn)的異?截悢(shù)使用實(shí)時(shí)定量熒光PCR來(lái)判斷遺傳來(lái)源和驗(yàn)證。并通過(guò)相關(guān)表型檢索及區(qū)域基因分析對(duì)拷貝數(shù)異常進(jìn)行相關(guān)的分類(lèi)分析。分析標(biāo)準(zhǔn)為:①已報(bào)道的與嬰兒痙攣相關(guān)的致病性拷貝數(shù)變異②已知的致病性拷貝數(shù)變異,嬰兒痙攣表型報(bào)道為首次③拷貝數(shù)異常與嬰兒痙攣表型尚不明確,區(qū)域所包含基因與腦發(fā)育有一定關(guān)系④多態(tài)性拷貝數(shù)變異。其中①和②類(lèi)被認(rèn)為與嬰兒痙攣相關(guān)的致病性拷貝數(shù)變異。無(wú)拷貝數(shù)異常的病例會(huì)進(jìn)一步進(jìn)行二代測(cè)序分析,通過(guò)定制的含有407個(gè)癲癇相關(guān)基因的基因panel,通過(guò)Nimblegen平臺(tái),采用200-300bp插入片段構(gòu)建小片段外顯子文庫(kù),在Hiseq2000測(cè)序平臺(tái)進(jìn)行目標(biāo)區(qū)域基因測(cè)序。所得到的結(jié)果通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化的數(shù)據(jù)分析流程,單樣品SNP保守性預(yù)測(cè)、致病性分析,篩選罕見(jiàn)突變(cut-off值為0.05)。此外,按照家系遺傳規(guī)律進(jìn)行家系分析篩選候選基因。研究結(jié)果:在排除了臨床較為明確的病因后,懷疑具有遺傳背景的嬰兒痙攣病例進(jìn)入第二部分遺傳病因?qū)W研究。其中47例病例進(jìn)行了全基因組拷貝數(shù)變異研究,其中4例檢測(cè)到致病性拷貝數(shù)變異(1q21.1重復(fù);1q44、2q31.1及17p13缺失),7p13缺失包括已知的嬰兒痙攣及無(wú)腦回畸形的候選基因PAFAH1B1(LIS1)。而在1q21.1,1q44,2q23.1區(qū)域的拷貝數(shù)變異都曾在報(bào)道與孤獨(dú)癥、智能障礙及癲癇發(fā)作相關(guān),但我們首次在嬰兒痙攣中報(bào)道,其中,1q44缺失包括HNRNPU基因,2013年Epi4k通過(guò)外顯子測(cè)序研究發(fā)現(xiàn)HNRNPU與嬰兒痙攣相關(guān),我們的結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了HNRNPU與嬰兒痙攣的相關(guān)性;此外,2q23.1缺失包括MBD5基因,為DNA甲基化結(jié)合蛋白,為孤獨(dú)癥及癲癇性腦病的候選基因,我們?cè)诖藞?bào)道了一例具有嬰兒痙攣、智能障礙及雙足拇趾缺如病例。此外,共有63例病例進(jìn)行了目標(biāo)基因二代測(cè)序,平均病例發(fā)現(xiàn)357±24罕見(jiàn)變異,通過(guò)對(duì)30例家系分析后,發(fā)現(xiàn)除了CDKL5、STXBP1、TSC2、SLC2A1等已知的嬰兒痙攣相關(guān)基因,檢出率為6.3%。除此之外,ARHGEF9、MEF2C、ALDH7A1、RYR3、CACNA2D1、CACNA1I也是我們關(guān)注的候選基因,其致病性需要進(jìn)一步確定。結(jié)論:基因拷貝數(shù)變異是嬰兒痙攣重要的病因,并且我們首次發(fā)現(xiàn)HNRNPU和MBD5基因?yàn)楹蜻x致病基因,同時(shí)也擴(kuò)展了2q23.1缺失綜合征的臨床表型譜。我們通過(guò)包含407個(gè)癲癇相關(guān)基因的基因panel,發(fā)現(xiàn)CDKL5、STXBP1、TSC2、 SLc2A1等已知的嬰兒痙攣相關(guān)基因,并關(guān)注ARHGEF9、MEF2C、ALDH7A1、 RYR3、CACNA2D1、CACNA1I等候選基因可能參與了疾病的發(fā)生過(guò)程。
[Abstract]:In the first part , 195 cases of infantile spasticity were analyzed by retrospective data analysis and cohort study .
In 135 patients , the course time was 鈮,
本文編號(hào):1962304
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