E64D對(duì)缺氧缺血性腦損傷后海馬中凋亡、自噬、壞死三種蛋白分子表達(dá)的影響
發(fā)布時(shí)間:2018-04-26 22:33
本文選題:E64D + 海馬; 參考:《蘇州大學(xué)》2012年碩士論文
【摘要】:目的:通過凋亡-自噬-壞死途徑探討缺氧缺血對(duì)新生大鼠海馬神經(jīng)元的損傷,以及外源性E64D對(duì)腦損傷可能的保護(hù)作用。 方法:7日齡新生大鼠分三組:假手術(shù)組(A組):僅分離出左側(cè)頸總動(dòng)脈,不予結(jié)扎,不予低氧處理,與C組同時(shí)腹腔注射同等體積的1%DMSO溶液。HIBD模型組(B組):予以結(jié)扎左側(cè)頸總動(dòng)脈和低氧處理,與C組同時(shí)腹腔注射同等體積的1%DMSO。E64D治療組(C組):HIBD建模后1小時(shí)每只SD大鼠給予腹腔注射E64D,劑量10ug/0.1ml。 1.應(yīng)用免疫印跡法(Western Blot, WB)檢測(cè)新生大鼠海馬中Actived caspase-3、Beclin-1、Spectrin αⅡ (C-3)降解產(chǎn)物三種蛋白分子在0h、2h、6h、12h、24h、48h的表達(dá)變化。2.在48h取大腦組織,利用干濕比重法檢測(cè)大腦的含水量。3.光鏡下觀察各組大鼠左側(cè)腦組織HE染色的病理變化。 結(jié)果:1. HIBD模型組中Actived caspase-3蛋白在建模后12h開始明顯表達(dá),至24h達(dá)到高峰,隨后逐漸降低。12h、24h、48h蛋白水平較假手術(shù)組表達(dá)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。E64D治療組中蛋白水平下降僅在24h的時(shí)候與模型組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.HIBD模型組中Beclin-1蛋白在建模后6h開始明顯表達(dá),至12h達(dá)到高峰,隨后逐漸降低。各時(shí)間點(diǎn)蛋白表達(dá)水平較假手術(shù)組升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。E64D治療組6h、12h、24h、48h的蛋白表達(dá)水平較模型組下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、HIBD模型組中Spectrin aⅡ降解產(chǎn)物在模型建立后2h即開始增高,持續(xù)升高至48小時(shí)。各時(shí)間點(diǎn)蛋白表達(dá)水平較假手術(shù)組升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。E64D治療組2h、6h、12h的蛋白表達(dá)水平較模型組下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4. HIBD模型組左側(cè)大腦含水量較假手術(shù)組增加,有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01); E64D治療組與HIBD模型組左側(cè)大腦含水量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論:1.缺氧缺血刺激海馬神經(jīng)元細(xì)胞自噬、凋亡、壞死發(fā)生增強(qiáng);2.E64D抑制細(xì)胞凋亡、白噬和壞死,相關(guān)蛋白表達(dá)下降,減輕缺氧缺血造成的神經(jīng)細(xì)胞死亡。3.缺氧缺血后左側(cè)大腦含水量明顯增加,出現(xiàn)腦水腫;4.應(yīng)用蛋白酶抑制劑E64D沒有減輕腦水腫的作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the damage of hippocampal neurons induced by hypoxic-ischemic injury and the possible protective effect of exogenous E64D on brain injury through apoptosis-autophagy necrosis pathway in neonatal rats. Methods newborn rats of 7 days old were divided into three groups: sham operation group (group A): left common carotid artery was isolated, no ligation, no hypoxia treatment. Group C was intraperitoneally injected with the same volume of 1%DMSO solution. Group B was treated with ligation of left common carotid artery and hypoxia. The rats in group C were given intraperitoneal injection of E64D at a dose of 10ug- 0.1 ml at the same time as group C (n = 1) in 1%DMSO.E64D group C (n = 1). 1. Western blot (WB) was used to detect the expression of three protein molecules of Actived caspase-3, Beclin-1 spectrin 偽 鈪,
本文編號(hào):1807999
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