體外沉默二牛龍牛兒基轉(zhuǎn)移酶Ⅰ對(duì)舌癌細(xì)胞遷移和侵襲的影響
發(fā)布時(shí)間:2018-03-24 00:38
本文選題:二牛龍牛兒基轉(zhuǎn)移酶Ⅰ 切入點(diǎn):RhoA 出處:《華西口腔醫(yī)學(xué)雜志》2017年06期
【摘要】:目的應(yīng)用RNA干擾技術(shù),體外沉默二牛龍牛兒基轉(zhuǎn)移酶Ⅰ(GGTase-Ⅰ),研究其在舌癌遷移、侵襲中的作用。方法登錄Genebank確定人GGTase-Ⅰ基因序列,針對(duì)GGTase-Ⅰ的基因序列設(shè)計(jì)并構(gòu)建3條si RNA,分別將RNA干擾組(GGTase-Ⅰsi RNA1、GGTase-Ⅰsi RNA2、GGTase-Ⅰsi RNA3)、陰性對(duì)照組(NC-si RNA)和空白對(duì)照組轉(zhuǎn)染至舌癌細(xì)胞Cal-27,實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(q RT-PCR)和蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測(cè)各組細(xì)胞轉(zhuǎn)染后GGTase-Ⅰ、Rho A基因的m RNA、蛋白表達(dá);選取沉默效率最高的一組si RNA作為實(shí)驗(yàn)組,蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)各組細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表達(dá),GST-pull down實(shí)驗(yàn)檢測(cè)GTP-Rho A蛋白的表達(dá),劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力變化,Transwell小室檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力變化。結(jié)果干擾后細(xì)胞的GGTase-Ⅰm RNA、蛋白表達(dá)明顯下降(P0.05),Rho A m RNA和蛋白表達(dá)無明顯改變,MMP-2、MMP-9、GTP-Rho A的表達(dá)下降,遷移、侵襲能力明顯下降(P0.05)。結(jié)論抑制GGTase-Ⅰ表達(dá),可降低舌癌細(xì)胞的遷移、侵襲能力,對(duì)GGTase-Ⅰ的深入研究可能為舌癌的治療提供新的有效分子靶點(diǎn)。
[Abstract]:Objective to study the role of GGTase- 鈪,
本文編號(hào):1655957
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