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肺內(nèi)上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化機(jī)制在支氣管肺發(fā)育不良中的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2018-02-23 06:04

  本文關(guān)鍵詞: 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化 肺泡Ⅱ型細(xì)胞 高氧 TGF-β1 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT) 支氣管肺發(fā)育不良 高氧癥 出處:《重慶醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


【摘要】:目的:探討高氧及TGF-β1干預(yù)小鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞(AECⅡ)后,是否發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)及其影響。 方法:小鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞系MLE-12,隨機(jī)分為空氣暴露組、高氧暴露組、TGF-β1干預(yù)空氣暴露組、TGF-β1干預(yù)高氧暴露組。觀察各組6、12、24、48h細(xì)胞形態(tài)變化。應(yīng)用細(xì)胞免疫熒光雙標(biāo)法及熒光定量PCR法檢測(cè)各組各時(shí)間點(diǎn)肺表面活性物質(zhì)B (SP-B)及成纖維細(xì)胞特異性蛋白1(FSP1)蛋白和mRNA的表達(dá)情況。 結(jié)果:隨著高氧及TGF-β1干預(yù)時(shí)間的延長(zhǎng),AECⅡ逐漸由鵝卵石樣變成紡錘體形狀,獲得成纖維細(xì)胞樣外觀。同時(shí),AECⅡ特異性標(biāo)記SP-B表達(dá)逐漸減弱,,成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)記FSP1表達(dá)逐漸增強(qiáng),24h時(shí)兩者時(shí)可見(jiàn)明顯的共表達(dá)。高氧暴露組、TGF-β1干預(yù)空氣暴露組及TGF-β1干預(yù)高氧暴露組24、48h SP-B mRNA表達(dá)較同時(shí)間空氣暴露組下調(diào),而FSP1mRNA表達(dá)較同時(shí)間空氣暴露組上調(diào)。 結(jié)論:高氧及TGF-β1均能誘導(dǎo)AECⅡ發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化,且兩者對(duì)EMT的作用具有時(shí)間依賴性。 目的:觀察高氧暴露新生小鼠上皮細(xì)胞標(biāo)記(肺表面活性物質(zhì)蛋白B,[SP-B])及成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)記(成纖維細(xì)胞特異性蛋白,[FSP1])在新生小鼠中的表達(dá)情況,探討肺內(nèi)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)換(Epithelial Mesenchymal Transition, EMT)在支氣管肺發(fā)育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)中的作用及機(jī)制的研究。 方法:新生的1d的C57BL/6小鼠隨機(jī)分為:BPD組及對(duì)照組,應(yīng)用高濃度氧暴露制作BPD小鼠模型,HE染色、放射性肺泡計(jì)數(shù)(RAC)、Masson染色、免疫熒光雙標(biāo)及熒光定量PCR技術(shù),觀察高氧暴露后3、7、14、21d肺組織病理改變及SP-B和FSP1蛋白、mRNA在BPD小鼠中隨時(shí)間變化的表達(dá)情況;BPD小鼠行肺功能檢測(cè),評(píng)價(jià)其生理病理功能的改變。 結(jié)果:與對(duì)照組比較,BPD組高氧暴露后小鼠肺組織逐漸出現(xiàn)發(fā)育障礙、膠原沉積明顯;SP-B表達(dá)于21d時(shí)低于對(duì)照組(P<0.05),而FSP1表達(dá)相應(yīng)的增強(qiáng)(P<0.05),同時(shí)第14、21d SP-B及FSP1在肺組織內(nèi)出現(xiàn)共表達(dá),而對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間未見(jiàn)SP-B及FSP1共表達(dá)存在;肺功能檢測(cè)顯示BPD組與對(duì)照組相比呼吸頻率(F)及潮氣量(TV)均顯著降低(P<0.05)。 結(jié)論:通過(guò)EMT機(jī)制而來(lái)的成纖維細(xì)胞是BPD中肺纖維化的重要來(lái)源。
[Abstract]:Aim: to investigate whether the epithelial interstitial transformation (EMTT) and its effects were induced by hyperoxia and TGF- 尾 1 intervention in mouse alveolar type 鈪

本文編號(hào):1526302

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