發(fā)布時間：2018-01-28 21:47

  本文關鍵詞： 氣相色譜質譜聯(lián)用技術 紫癜性腎炎 熱傷腎絡證 腎陰不足證 尿液代謝物　出處：《南京中醫(yī)藥大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的:通過代謝組學氣相色譜-質譜聯(lián)用技術(GC-MS)研究兒童紫癜性腎炎熱傷腎絡證與腎陰不足證尿液樣本代謝物,比較兩種證型物質基礎,尋找紫癜性腎炎實證與虛證差異性代謝產(chǎn)物,對差異性代謝產(chǎn)物進行通路分析,探求兒童紫癜性腎炎中醫(yī)虛實證候可能存在的客觀性指標。方法:采用氣相色譜-三重四級桿質譜儀檢測兒童紫癜性腎炎熱傷腎絡證組(21例)、腎陰不足證組(19例)及正常健康兒童組(30例)尿液代謝產(chǎn)物,運用XCMS在線數(shù)據(jù)處理,獲得化合物的相對峰面積,使用主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判別分析(OPLS-DA)對樣本數(shù)據(jù)進行多維統(tǒng)計學分析,篩選出各組潛在生物標記物,運用MetaboAnalyst分析可能涉及的相關代謝通路綜合評價,闡釋兒童紫癜性腎炎證候分型的物質基礎及可能的機制。結果:1.兒童紫癜性腎炎兩證型組與正常組在OPLS-DA中三組可以區(qū)分,其中OPLS-DA模型參數(shù)為 R2Y=0.802,Q2=0.205。2.紫癜性腎炎熱傷腎絡證組與正常組在OPLS-DA中可以明顯區(qū)分,模型參數(shù)為R2Y=0.922,Q2=0.342,根據(jù)VIP值大于1,篩選出14種內(nèi)源性化合物,分別為α-羥基異丁酸、羥基乙酸、丙酸、胱硫醚、L-蘇糖醇、赤蘚糖醇、L-丙氨酸、戊烯二酸、檸檬酸、3-(3-羥基苯基)-3-羥基丙酸、D-甘露醇、D-葡糖酸、N-α-乙酰-L-賴氨酸、鯊肌醇。3.紫癜性腎炎腎陰不足證組與正常組在OPLS-DA中可明顯區(qū)分,模型參數(shù)為R2Y=0.985,Q2=0.553,最終篩選出肌酐、1-氨基環(huán)丙烷羧酸、�；撬�、棕櫚酸、葡糖酸、馬尿酸、硬脂酸、纖維二糖、鯊肌醇9種內(nèi)源性代謝產(chǎn)物。4.紫癜性腎炎熱傷腎絡證與腎陰不足證兩組在OPLS-DA中可明顯區(qū)分,模型參數(shù)為R2Y=0.972,Q2=0.566,最終鑒定出4種內(nèi)源性化合物,分別為:檸檬酸、6-氮胸腺嘧啶、纖維二糖、N-α-乙酰-L-賴氨酸。討論:1.與正常組比較,�；撬嵩谀I陰不足證組中呈下調趨勢;胱硫醚在熱傷腎絡證組呈上調趨勢;賴氨酸在熱傷腎絡證組呈下調趨勢;鯊肌醇在熱傷腎絡證組及腎陰不足證組均呈上調趨勢;檸檬酸在熱傷腎絡證組中呈下調趨勢。2.與熱傷腎絡證組比較,賴氨酸、檸檬酸、6-氮胸腺嘧啶、纖維二糖在腎陰不足證中呈上調趨勢。3.對所有代謝產(chǎn)物進行代謝通路分析,發(fā)現(xiàn)兒童紫癜性腎炎主要涉及的代謝通路為:氮代謝,半胱氨酸和蛋氨酸代謝,�；撬岷蛠喤；撬岽x,戊糖磷酸途徑,檸檬酸循環(huán)(TCA循環(huán)),賴氨酸降解。上述結果表明在兒童紫癜性腎炎尿液代謝產(chǎn)物與正常組可以明顯區(qū)分,熱傷腎絡證與腎陰不足證具有差異性物質基礎,差異化合物主要涉及氨基酸代謝及能量代謝異常。
[Abstract]:Objective: to study the metabolites in urine samples of children with purpura nephritis with heat injury and deficiency of kidney yin by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS), and to compare the substance basis of the two syndrome types. To search for the differential metabolites of purpura nephritis and deficiency syndrome, and analyze the pathway of different metabolites. Objective index of deficiency and excess syndrome of TCM in children with Henoch-Schonlein purpura nephritis (HSPN). Methods: 21 cases of children with Henoch-Schonlein purpura nephritis were detected by gas chromatography-four-step mass spectrometer. Urine metabolites in 19 cases of deficiency of kidney yin syndrome and 30 cases of healthy children) were processed with XCMS online data to obtain the relative peak area of the compounds. Principal component Analysis (PCA) and orthogonal partial least Square-discriminant Analysis (OPLS-DA) were used to carry out multidimensional statistical analysis of the sample data and to screen out potential biomarkers in each group. Comprehensive evaluation of related metabolic pathways may be involved by MetaboAnalyst analysis. To explain the material basis and possible mechanism of syndrome classification of Henoch-Schonlein purpura nephritis in children. Results 1. In OPLS-DA, the two syndrome types of children with purpura nephritis can be distinguished from the normal group. The parameters of OPLS-DA model were R2YP0.802Q2O0.205.2.The renal collateral syndrome of heat injury of purpura nephritis could be distinguished from that of normal group in OPLS-DA. The model parameters were R2YP0. 922OQ2O0.342. According to the VIP value greater than 1, 14 endogenous compounds were selected, which were 偽 -hydroxyisobutyric acid, glycolic acid, propionic acid and cystathion. L-threonol, erythritol, L-alanine, pentenedioic acid, citric acid, 3-hydroxy-3-hydroxyphenyl -3-hydroxypropionic acid, D-mannitol, D-glucoic acid, N- 偽 -acetyl-L-lysine. Shark inositol .3.The model parameter is R2YT 0.985Q2O0.553. Creatinine was screened out in the model group and the normal group and the group with deficiency of kidney yin in Henoch-Schonlein purpura nephritis were distinguished obviously in OPLS-DA. 1-aminocyclopropane carboxylic acid, taurine, palmitic acid, glucosinic acid, hippuric acid, stearic acid, fibronectose. Shark inositol 9 kinds of endogenous metabolites .4. the two groups of syndrome of kidney meridian injury and deficiency of kidney yin can be distinguished in OPLS-DA, the model parameter is R2YN 0.972. Finally, four endogenous compounds were identified as citrate 6-azotouracil, fibronectin N- 偽 -acetyl-L-lysine. Taurine showed a downward trend in the group of deficiency of kidney yin. Cystathithione showed an upward trend in the heat injury kidney collaterals group; Lysine showed a down-regulation trend in the heat injury kidney collaterals syndrome group; Shark inositol showed an upward trend in heat injury and deficiency of kidney yin group. Citric acid in heat injury kidney collateral syndrome group showed a downward trend .2.Compared with heat injury kidney collateral syndrome group, lysine, citric acid 6-azotinopyrimidine. Analysis of metabolic pathway of all metabolites found that the main metabolic pathways involved in Henoch-Schonlein purpura nephritis in children were nitrogen metabolism, cysteine and methionine metabolism. Taurine and subtaurine metabolism, pentose phosphoric acid pathway, citric acid cycle TCA cycle, lysine degradation. Heat injury kidney collaterals syndrome and kidney yin deficiency syndrome have different material basis, the difference compounds mainly involve amino acid metabolism and energy metabolism abnormality.
【學位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R272

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本文編號：1471634