本文關(guān)鍵詞： 輪狀病毒 乳鼠 腸道外損害 肝臟 細胞因子　出處：《蚌埠醫(yī)學院》2013年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的：1.建立輪狀病毒(Rotavirus，RV)腸道內(nèi)、腸道外感染的BALB/C乳鼠模型。2.檢測乳鼠外周血IL-12(Th1類細胞因子）和IL-10（Th2類細胞因子）的表達水平，比較IL-10，IL-12兩種細胞因子在不同時間點，以及在RV腸道內(nèi)、腸道外感染中表達的差異，從而進一步了解Th1/Th2失衡與RV腸道外臟器損害的相關(guān)性，為臨床上防治重癥RV感染提供新的思路和方法。3.觀察RV感染后，乳鼠的臨床表現(xiàn)和不同時間點肝臟組織的形態(tài)學改變，了解其病理損害的特點。 方法：將恒河猴RVSA11株分裝，置-80℃冰箱冷藏備用。選用3～4日齡清潔級BALB/C乳鼠90只，隨機分成3組，每組30只，即正常對照組：不做任何特殊處理；腸道內(nèi)組：經(jīng)口腔滴注100μlSA11株病毒培養(yǎng)液（病毒滴度TCID50為1×10-4）；腸道外組：經(jīng)腹腔注射100μlSA11株病毒培養(yǎng)液。病毒接種后，各組乳鼠隔離飼養(yǎng)。以接種當天為第0天計，每日觀察乳鼠的精神狀態(tài)、活動情況、體型、毛色光澤度、大便變化情況以及有無皮膚脫水及肛門紅腫等，收集乳鼠大便檢測其中輪狀病毒抗原。分別于RV感染后的第3天和第8天，收集乳鼠外周血，離心后留取血清，經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）法檢測細胞因子IL-10和IL-12的表達水平。同時處死乳鼠，留取肝臟組織，蘇木精－伊紅（HE）染色，光鏡下觀察肝臟組織的病理改變。 結(jié)果：1.RV感染后乳鼠食欲不佳，精神萎靡，反應(yīng)差，皮膚皺褶，腹部腫脹，肛門紅腫，生長發(fā)育緩慢，并出現(xiàn)腹瀉，表現(xiàn)為大便次數(shù)和大便量增多。在RV感染后第3天，腹瀉達最高峰，以后逐漸減輕，至第8天基本恢復(fù)正常。感染組乳鼠大便RV抗原檢測均為陽性。2.RV感染后第3天，腸道內(nèi)組和腸道外組乳鼠血清中IL-12表達水平較正常對照組顯著升高（P0.01、P0.01），但腸道內(nèi)、外組間IL-12的表達水平無差異性（P＞0.05）；至RV感染后第8天，腸道內(nèi)、外組IL-12水平均有所下降，但仍高于正常對照組（P0.05、P0.01）。腸道外組IL-10水平在RV感染后第3天高于腸道內(nèi)組和正常對照組（P0.05、P0.01），至第8天降至正常范圍，三組間無顯著性差異（P＞0.05）。在整個實驗過程中，腸道內(nèi)組IL-10表達水平無顯著性改變（P＞0.05）。3.光鏡下肝細胞體積增大，胞質(zhì)疏松透明，細胞核分裂甚至消失，肝細胞壞死，空泡樣變性明顯，可見大量淋巴細胞浸潤。并且，腸道外組乳鼠肝臟病理損傷程度較腸道內(nèi)組重。 結(jié)論：1.RV腸道內(nèi)、腸道外感染BALB/C乳鼠模型建立成功。RV腸道內(nèi)感染乳鼠后以IL-12表達為主，Th1應(yīng)答占優(yōu)勢；腸道外感染乳鼠早期呈現(xiàn)Th1/Th2混合反應(yīng)，而后期以Th1應(yīng)答占優(yōu)勢。推測Th1/Th2類細胞因子失衡，可能是導(dǎo)致輪狀病毒腸道外肝臟損害的重要機制。2.RV感染后，可引起乳鼠肝臟組織發(fā)生病理改變，但隨病情的恢復(fù)，，肝臟損害也逐漸愈合，呈現(xiàn)一定的自限性。
[Abstract]:Objective 1. To establish rotavirus rotavirus (RV) in the intestine. The expression levels of IL-12(Th1 cytokines and IL-10(Th2 cytokines in peripheral blood of neonatal rats were detected. To compare the expression of IL-10 IL-12 and IL-12 in different time points and in RV intestinal tract. So as to further understand the relationship between Th1/Th2 imbalance and external organ damage of RV, and provide a new way of thinking and method for clinical prevention and treatment of severe RV infection. 3. Observe the infection of RV after RV infection. The clinical manifestations and morphologic changes of liver tissues at different time points in neonatal rats were studied to understand the characteristics of pathological damage. Methods: the RVSA11 strain of rhesus monkey was divided into three groups, which were refrigerated at -80 鈩

本文編號：1454087