發(fā)布時(shí)間：2017-10-28 07:33

  本文關(guān)鍵詞：膽道閉鎖肝病理學(xué)診斷價(jià)值及熱休克蛋白47與肝纖維化相關(guān)性研究

  更多相關(guān)文章： 膽道閉鎖 肝臟病理 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn) 熱休克蛋白47 肝纖維化 預(yù)后

【摘要】：研究背景：膽道閉鎖(biliary atresia, BA)是兒童最常見(jiàn)的嚴(yán)重肝臟疾病之一。BA主要表現(xiàn)為肝內(nèi)外膽管不同程度的炎癥和纖維化梗阻,進(jìn)而導(dǎo)致肝內(nèi)膽汁淤積以及進(jìn)行性加重的肝臟纖維化。目前,雖然BA患兒可以通過(guò)Kasai手術(shù)重建膽汁流出道,但仍有約68%～80% BA患兒在術(shù)后存在各級(jí)膽管進(jìn)行性梗阻及炎癥損傷,導(dǎo)致膽汁淤積和肝纖維化加重,進(jìn)展為肝功能衰竭,最終需要接受肝臟移植。因此,早期診斷與手術(shù)及對(duì)肝纖維化發(fā)展趨勢(shì)的準(zhǔn)確判斷對(duì)提高BA患兒長(zhǎng)期預(yù)后具有關(guān)鍵性作用。目前對(duì)于膽道閉鎖的診斷主要依據(jù)臨床表現(xiàn)、血生化、肝膽B(tài)超及同位素等指標(biāo)綜合評(píng)估,缺乏一定的特異性和敏感性,且術(shù)前沒(méi)有明確指標(biāo)能夠?qū)純焊闻K纖維化及預(yù)后進(jìn)行評(píng)估。國(guó)外有學(xué)者報(bào)道肝臟病理組織學(xué)活檢能夠作為術(shù)前診斷BA的可靠標(biāo)準(zhǔn),診斷準(zhǔn)確率高達(dá)88.2-95%,并可通過(guò)相關(guān)病理學(xué)改變推測(cè)患兒預(yù)后。而現(xiàn)階段國(guó)內(nèi)有關(guān)BA病理學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)及其改變與預(yù)后相關(guān)性研究十分有限。肝臟纖維化進(jìn)展程度是影響B(tài)A患兒Kasai術(shù)后長(zhǎng)期預(yù)后的一項(xiàng)重要因素,前期研究證實(shí)熱休克蛋白(heat shock protein, HSP)47在BA肝臟組織中表達(dá)明顯上調(diào),結(jié)合有關(guān)HSP47在肝硬化、肺纖維化、心肌梗塞、腎小球腎炎等多種器官膠原異常聚集的纖維化疾病中均有表達(dá)的文獻(xiàn)報(bào)道,提示HSP47與器官纖維化進(jìn)程密切相關(guān)。研究目的：1.結(jié)合國(guó)外膽道閉鎖(BA)肝臟病理半定量標(biāo)準(zhǔn),初步建立我國(guó)相應(yīng)的BA肝臟病理半定量評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)以及預(yù)后指標(biāo),探討肝臟病理學(xué)半定量評(píng)分系統(tǒng)在BA術(shù)前早期診斷中的價(jià)值,分析肝臟病理評(píng)估參數(shù)與BA預(yù)后的相關(guān)性,為BA預(yù)后的判斷提供可靠依據(jù)；2.研究熱休克蛋白47(HSP47)在BA患兒肝臟組織及血清中的表達(dá)變化,分析HSP47與BA肝組織纖維化程度的相關(guān)性,探討HSP47作為BA預(yù)后隨訪指標(biāo)的可行性。材料與方法：一、膽道閉鎖(BA)肝臟病理學(xué)評(píng)分的診斷價(jià)值及與預(yù)后相關(guān)性探討：1.病例入組標(biāo)準(zhǔn)及預(yù)后評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)：收集復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院外科2012年6月至2013年7月間收治入院手術(shù)的96例梗阻性黃疸患兒入組,根據(jù)術(shù)中膽道造影診斷結(jié)果將患兒分為BA組共58例(Ⅲ型)與非BA組共28例(除外PFIC、膽道發(fā)育不良、Allagie綜合征)。分別記錄各組病例性別、年齡、術(shù)前與術(shù)后肝功能及術(shù)后隨訪等臨床資料。同時(shí)選取入組病例術(shù)后肝臟組織蘇木精一伊紅(hematoxylin-eosinstaining, HE)染色病理切片各1張并隨機(jī)編號(hào),由一名對(duì)診斷結(jié)果未知的專(zhuān)業(yè)病理醫(yī)師解讀病理切片,運(yùn)用基于8個(gè)病理特征(肝臟纖維化、膽小管增生、匯管區(qū)膽栓形成、膽汁淤積、肝細(xì)胞病變、匯管區(qū)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、髓外造血、膽管板發(fā)育異常),總分為21分的半定量肝臟組織病理評(píng)分系統(tǒng)對(duì)各組病例肝臟的相關(guān)病理特征進(jìn)行半定量評(píng)分,記錄得分,做出病理診斷。同時(shí)根據(jù)BA患兒術(shù)后半年血膽紅素水平,將入組BA患兒再分為預(yù)后良好組(膽紅素降至正常水平)與預(yù)后不良組(膽紅素高于正常水平)。2.比較各組病例肝臟組織病理診斷與術(shù)中膽道造影診斷符合率,并分析BA患兒肝臟組織相關(guān)病理特征與其預(yù)后相關(guān)性。二、熱休克蛋白47(HSP47)在BA患兒肝臟組織及血清中的表達(dá)變化及其與BA患兒肝纖維化程度相關(guān)性研究：分別選取20例BA、10例膽汁淤積、10例膽總管囊腫術(shù)中活檢的肝臟組織及術(shù)后肝臟組織病理切片,應(yīng)用熒光定量RT-PCR和western blot檢測(cè)各組肝臟組織中HSP47mRNA及蛋白水平表達(dá)量變化；同時(shí)根據(jù)Okhuma's分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),光學(xué)顯微鏡下觀察各組病例肝臟組織HE染色病理切片,比較各組肝組織纖維化程度；此外,運(yùn)用ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)比較各組患兒血清中HSP47蛋白表達(dá)水平變化。分析HSP47與BA肝臟纖維化程度相關(guān)性。結(jié)果：一、膽道閉鎖(BA)肝臟病理學(xué)評(píng)分的診斷價(jià)值及與預(yù)后相關(guān)性探討：1.入組96例梗阻性黃疸患兒,根據(jù)術(shù)中膽道造影診斷,共有58例BA(男性33例,女性26例)及28例膽汁淤積癥(男性22例,女性6例),兩組患兒平均年齡及性別比無(wú)明顯差異。BA組患兒總膽紅素、堿性磷酸酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶及膽汁酸水平分別為173.9±66.4,605.0±223.4,171.4±114.3,111.9±85.5,與膽汁淤積癥組患兒相比,均無(wú)顯著差異(157.8±64.5,603.6±301.3,140.5±105.7,129.8±116.2),而B(niǎo)A組患兒谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶及直接膽紅素水平較膽汁淤積組顯著較高(859.2±688.5 vs.404.1±400.2,P0.01;134.2±50.1vs.110.5±41.8,P0.05)。2.依據(jù)肝臟組織病理學(xué)評(píng)分(8個(gè)特征-21分制),BA組肝臟組織病理學(xué)平均評(píng)分分值明顯高于膽汁淤積組(10.9±2.2 vs.5.9±1.3,P0.001)。ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)依據(jù)肝臟組織病理學(xué)評(píng)分系統(tǒng),當(dāng)評(píng)分分值≥8分時(shí),診斷BA的機(jī)率隨著分值的升高而逐漸增加,其診斷敏感度和特異度分別為93.1%和99.8%,當(dāng)評(píng)分分值8分時(shí),診斷膽汁淤積而非BA得機(jī)率則隨著分值的升高而逐漸增加,診斷的敏感性和特異度分別為85.7%和99.9%�？傮w上使用肝臟組織病理學(xué)評(píng)分系統(tǒng)診斷BA的敏感性、特異性及準(zhǔn)確率分別為94.7%、86.2%和91.9%,明顯高于傳統(tǒng)BA病理診斷方法(敏感性、特異性及準(zhǔn)確率：86.4%、74.1%及82.6%；P0.01)。3.BA組肝臟組織病理學(xué)評(píng)分分值大小與BA患兒性別、總膽紅素水平、總膽汁酸無(wú)明顯相關(guān)性(r1=-0.14,P10.05；r2=0.181,P20.05；r3=0.103,P30.05),而與BA患兒的年齡分布、直接膽紅素水平及谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶水平呈正相關(guān),(r1=0.289,P10.01,r2=0.272,P20.01,r3=0.367,P30.01)。4.所有BA組患兒均存在不同程度的肝臟組織纖維化,以中度肝臟纖維化以上為主,肝纖維化率及程度較膽汁淤積組明顯,后者僅有14.2%患兒存在輕度肝臟組織纖維化；BA組膽管增生率為92.1%,較膽汁淤積組(25%)明顯升高；膽栓形成及膽管板發(fā)育異常僅見(jiàn)于膽道閉鎖組,發(fā)生率分別為51.7%%和17.2%,(vs.膽汁淤積組,P0.01)。肝臟纖維化與患兒年齡呈正相關(guān),纖維化程度越嚴(yán)重,提示遠(yuǎn)期預(yù)后不佳。二、熱休克蛋白47(HSP47)在BA患兒肝臟組織及血清中的表達(dá)變化及其與BA患兒肝纖維化程度相關(guān)性研究：1.BA組肝臟組織中HSP47 mRNA水平相對(duì)表達(dá)量為0.915±0.730較膽汁淤積組及膽總管囊腫組顯著增高(0.066±0.037與0.314±0.150,P0.05)；同時(shí)HSP47蛋白在BA組肝臟組織中的表達(dá)水平明顯高于膽汁淤積組及膽總管囊腫組。(3.06181±0.504763 vs 1.358018±0.373174,3.06181±0.504763 vs1.23649±0.350173),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.BA組患兒血清中HSP47蛋白平均濃度為63.38±17.11,均高于膽汁淤積組(57.87±14.83)及膽總管囊腫組(45.78±11.23)。4.BA組肝臟組織中HSP47 mRNA,蛋白水平表達(dá)量與HSP47血清濃度間呈正相關(guān)(mRNA水平VS蛋白水平r=0.836,P0.05,蛋白水平VS血清濃度r=0.989,P0.01,mRNA水平VS血清濃度r=0.883,P0.05)。5.結(jié)合光鏡下觀察肝臟組織HE染色切片按照0khuma 's肝纖維化分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行肝纖維化程度分級(jí)情況,血清HSP47的表達(dá)與肝纖維化程度成正相關(guān),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0.669,P0.01)。與術(shù)后半年內(nèi)膽紅素指標(biāo)是否降至正常內(nèi)關(guān)系不顯著,不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,根據(jù)隨訪至今存活情況行Logic回歸分析,血清HSP47的表達(dá)與術(shù)后生存情況存在相關(guān)性(χ2=5.417,P=0.020.05)。結(jié)論：1.肝組織病理評(píng)分(8個(gè)特征-21分制)對(duì)于BA診斷及BA與其他膽汁淤積癥間的鑒別診斷較以往的病理診斷方法具有更高的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性。2.通過(guò)肝臟病理評(píng)分系統(tǒng)分析相關(guān)病理特征的程度與膽道閉鎖患兒預(yù)后情況,具備可行性。3.熱休克蛋白47在肝臟組織及血清表達(dá)具有一致性,表達(dá)量與肝臟纖維化程度呈正相關(guān),能夠提示膽道閉鎖患兒肝臟纖維化程度。4.血清熱休克蛋白47的表達(dá)情況可能作為隨訪BA患兒遠(yuǎn)期預(yù)后的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】：膽道閉鎖 肝臟病理 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn) 熱休克蛋白47 肝纖維化 預(yù)后
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R726.5
【目錄】：

• 中文摘要4-8
• 英文摘要8-13
• 前言13-17
• 參考文獻(xiàn)15-17
• 第一部分 膽道閉鎖肝臟病理評(píng)分系統(tǒng)的診斷價(jià)值17-31
• 材料與方法17-20
• 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析20
• 結(jié)果20-25
• 討論25-27
• 小結(jié)27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 第二部分 膽道閉鎖熱休克蛋白47與肝纖維化的相關(guān)性研究31-49
• 材料與方法31-38
• 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析38-39
• 結(jié)果39-44
• 討論44-46
• 小結(jié)46-47
• 參考文獻(xiàn)47-49
• 結(jié)論49
• 創(chuàng)新點(diǎn)49-50
• 中英文縮略詞對(duì)照表50-51
• 綜述51-59
• 參考文獻(xiàn)56-59
• 研究生期間文章發(fā)表59-60
• 致謝60-61

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 湯紹濤,阮慶蘭;膽道閉鎖診治體會(huì)[J];腹部外科;2004年03期

2 Becker D.J. ,Islam S. ,Geiger J.D.,王一飛;膽道閉鎖伴左心發(fā)育不全綜合征:1例病例報(bào)道及文獻(xiàn)綜述[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(兒科學(xué)分冊(cè));2005年02期

3 馬亞貞;湯紹濤;;膽道閉鎖發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展[J];臨床小兒外科雜志;2006年06期

4 陳衛(wèi)兵;李炳;陳宗義;郭亞;王壽青;王亞麗;;膽道閉鎖的治療[J];臨床醫(yī)學(xué);2007年12期

5 孟慶婭;詹江華;;膽道閉鎖病因?qū)W研究進(jìn)展[J];天津醫(yī)藥;2008年10期

6 劉波;徐曄;彭雪華;楊靜;冉啟英;;三維磁共振胰膽管成像診斷嬰兒膽道閉鎖[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2010年09期

7 李林;裴廣華;王世城;李莉;鄭津生;;嬰兒膽道閉鎖超聲診斷價(jià)值[J];臨床兒科雜志;2011年05期

8 ;救助一個(gè)孩子，溫暖一個(gè)家庭——愛(ài)肝一生《貧困小兒膽道閉鎖資助項(xiàng)目》立項(xiàng)[J];肝博士;2013年02期

9 李桂生,劉鈞澄,蘇誠(chéng),周李,陳潔;88例膽道閉鎖診治體會(huì)[J];現(xiàn)代臨床普通外科;1998年02期

10 李艷陽(yáng);楊合英;王家祥;張大;呂陽(yáng);;膽道閉鎖99例臨床診療分析[J];河南醫(yī)學(xué)研究;2013年06期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李林;裴廣華;王世城;李莉;鄭津生;;嬰兒膽道閉鎖的超聲診斷價(jià)值[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

2 鄭珊;宋再;余家康;鐘惠;陳蘭萍;陳淑云;汪鍵;;膽道閉鎖標(biāo)準(zhǔn)化診斷治療臨床多中心研究分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)小兒外科學(xué)術(shù)會(huì)論文集[C];2010年

3 董淳強(qiáng);楊體泉;羅意革;唐咸明;陳嘉波;王紅;劉強(qiáng);陳超;董昆;;膽道閉鎖生存2年以上患兒臨床評(píng)價(jià)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)小兒外科學(xué)術(shù)會(huì)論文集[C];2010年

4 李英存;張明滿;蒲從倫;金先慶;康權(quán);;膽道閉鎖與膽道狹窄病理對(duì)比分析研究[A];中國(guó)西南地區(qū)第九屆小兒科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

5 劉曉;夏焙;王斌;江賢平;;嬰兒膽道閉鎖的超聲診斷[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

6 周莎;蔣麗蓉;儲(chǔ)波;徐亞珍;;膽道閉鎖臨床分析和近期手術(shù)影響[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會(huì)議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

7 湯紹濤;楊瑛;趙志祥;曹?chē)?guó)慶;;膽道閉鎖我們手術(shù)的年齡還是太晚[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)小兒外科學(xué)術(shù)會(huì)論文集[C];2010年

8 張金山;王文曉;李龍;張軍;李頎;吳濤;劉樹(shù)立;謝華偉;崔龍;;膽道閉鎖術(shù)中膽汁流量和膽汁成分與預(yù)后的關(guān)系研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)小兒外科學(xué)術(shù)會(huì)論文集[C];2010年

9 武慶斌;;膽道閉鎖的新進(jìn)展[A];2006（第三屆）江浙滬兒科學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省兒科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

10 于成文;劉道禎;穆柯曉;欒曉萍;陳芳;;新生兒及嬰兒膽道閉鎖的超聲表現(xiàn)[A];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第八屆全國(guó)腹部超聲學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 記者 陳飛;膽道閉鎖患兒資助項(xiàng)目啟動(dòng)[N];健康報(bào);2013年

2 李群艷;治小兒膽道閉鎖別超兩個(gè)月[N];健康報(bào);2007年

3 杜恩;不退黃 警惕小兒膽道閉鎖[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2008年

4 李龍;小兒膽道閉鎖有救了[N];健康報(bào);2003年

5 身體周刊記者 肖蓓　實(shí)習(xí)生 張一然 鄭珊;鄭珊：拯救殘缺的小生命[N];東方早報(bào);2013年

6 胡立麗;照顧黃疸寶寶有訣竅[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2007年

7 復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院副院長(zhǎng)、外科主任、教授 鄭珊　復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院外科醫(yī)生 沈楨;新生兒黃膽需要早期診治[N];文匯報(bào);2011年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙瑞;膽道閉鎖致病基因的檢測(cè)及功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

2 王炫;活性氧產(chǎn)物對(duì)膽道閉鎖小兒術(shù)后嗎啡代謝的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

3 李士星;膽道閉鎖的超聲圖像特征與組織學(xué)改變的相關(guān)性研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2008年

4 鄧盼墨;膽道閉鎖和特發(fā)性膽汁淤積癥肝臟組織差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

5 王瑋;膽道閉鎖與病毒感染的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

6 劉勇軍;調(diào)節(jié)性和效應(yīng)性T細(xì)胞在膽道閉鎖小鼠免疫炎癥發(fā)展中的作用及影響[D];華中科技大學(xué);2014年

7 毛永忠;基質(zhì)金屬蛋白酶及其組織抑制因子在小兒膽道畸形組織中的表達(dá)及意義[D];華中科技大學(xué);2005年

8 楊瑛;調(diào)節(jié)性、效應(yīng)性T細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞在膽道閉鎖患兒免疫炎癥發(fā)展中的作用[D];華中科技大學(xué);2011年

9 劉鴻圣;64層CT陰性法膽胰管成像技術(shù)在嬰兒膽道閉鎖診斷中的應(yīng)用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年

10 賴(lài)東蘭;膽道閉鎖Kasai術(shù)后中醫(yī)證候暨中藥干預(yù)治療的臨床研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 薛萍;膽道閉鎖肝病理學(xué)診斷價(jià)值及熱休克蛋白47與肝纖維化相關(guān)性研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 孫穎華;肝內(nèi)血管多普勒超聲檢查在嬰兒膽道閉鎖術(shù)前以及術(shù)后隨訪中的應(yīng)用研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

3 潘俊濤;激素干預(yù)在膽道閉鎖診治中的應(yīng)用價(jià)值分析[D];鄭州大學(xué);2011年

4 李艷陽(yáng);99例膽道閉鎖術(shù)后療效及相關(guān)因素分析[D];鄭州大學(xué);2014年

5 郭鵬;小兒膽道閉鎖中基質(zhì)金屬蛋白酶-2的表達(dá)及與肝纖維化及預(yù)后的關(guān)系[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2010年

6 關(guān)茜思;髓源抑制性細(xì)胞與膽道閉鎖相關(guān)性研究[D];廣州醫(yī)科大學(xué);2014年

7 王會(huì);母源性微嵌合體與膽道閉鎖發(fā)病機(jī)制的相關(guān)性研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2011年

8 張宜琪;77例Ⅲ型膽道閉鎖Kasai術(shù)后近期療效及部分影響預(yù)后因素分析[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

9 鐘微;十二指腸內(nèi)膽紅素連續(xù)性監(jiān)測(cè)在膽道閉鎖診斷中的應(yīng)用研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2005年

10 胡傳兵;BDL所致幼鼠膽道閉鎖后肝臟纖維化相關(guān)生物分子的時(shí)序性變化[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：1107267