本文關(guān)鍵詞：谷氨酰胺預(yù)防新生鼠壞死性小腸結(jié)腸炎的作用研究

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【摘要】：目的：通過建立新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎的動物模型,探討預(yù)防性補充谷氨酰胺對壞死性小腸結(jié)腸炎新生鼠的腸粘膜中白細胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子α(TNF-a)、白細胞介素-10(IL-10)及分泌型球蛋白IgA (SIgA)含量的影響,為臨床應(yīng)用谷氨酰胺預(yù)防新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎提供科學依據(jù)。方法：選用60只兩日齡新生Wistar鼠,雌雄不限,隨機分三組：空白對照組(A)、模型組(B)、干預(yù)組(C),每組n=20只。A組于母鼠旁正常喂養(yǎng),B、C組均人工喂養(yǎng)代鼠乳,C組：每只0.3g/Kg谷氨酰胺灌胃,每天一次,持續(xù)五天；B組和C組均于實驗第六天起內(nèi)毒素(LPS) 5mg/kg灌胃,每天一次,持續(xù)三天。LPS灌胃結(jié)束后第2、6、12、24小時,每個時間點隨機抽取5只采用斷頸法處死,解剖留取十二指腸下端至直腸上端腸道組織,其中回盲部近端腸管觀察Wistar鼠病理標本,剩余的腸管用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測腸組織勻漿中TNF-α、IL-6、IL-10、SIgA的含量。采用免疫組化法檢測三組Wistar鼠腸道病理組織標本,觀察腸組織中IL-6、TNF-a、IL-10炎癥因子表達。結(jié)果：1.各組新生、Vistar鼠一般情況和腸組織病理形態(tài)學改變B組中新生鼠逐漸萎靡、體毛雜亂,其中12只出現(xiàn)腹部青紫,6只發(fā)生抽搐、血便,3只在實驗過程中死亡。動物處死后,見胃潴留明顯,腸壁充血,腸管擴張、水腫,腸腔滲出物增多,可見腸壁片狀出血壞死。H-E染色后光鏡下變化：B組2小時腸上皮細胞變性,黏膜下和固有層水腫分離,絨毛萎縮、脫落；6小時可見腸上皮結(jié)構(gòu)基本消失腸絨毛結(jié)構(gòu)崩解分離,黏膜下層和肌層重度水腫；12小時腸上皮結(jié)構(gòu)開始修復(fù),絨毛結(jié)構(gòu)不清；24小時后黏膜下層、基層水腫,絨毛結(jié)構(gòu)開始修復(fù)。C組中新生鼠少動、體毛稍雜亂,伴腹部膨隆,解剖后見腸壁輕度擴張、水腫,無出血壞死灶,光鏡下腸組織病理損傷改變較B組輕。2。各組新生Wistar鼠腸組織IL-6、TNF-a、IL-10、SIgA含量變化B組腸組織IL-6的含量在2h、6h、12h、24h與A組比較有顯著增加(P0.05),C組腸組織IL-6的含量在2h、6h、12h與B組比較有顯著降低(P0.05)。B組腸組織TNF-a的含量在2h、6h、12h、24h與A組比較有顯著增加(P0.05),C組腸組織TNF-a的含量在2h、6h、12h、24h與B組比較有顯著降低(P0.05)。B組腸組織IL-10的含量在2h、6h、12h、24h與A組比較有顯著增加(P0.05),C組腸組織IL-10的含量在12h、24h與B組比較有顯著增加(P0.05)。B組腸組織SIgA的含量在2h、6h、12h、24h與A組比較有顯著降低(P0.05),C組腸組織SIgA的含量在12h、24h與B組比較有顯著增加(P0.05)。結(jié)論：1.通過人工喂養(yǎng)聯(lián)合LPS灌胃成功誘導新生鼠壞死性小腸結(jié)腸炎模型2.人工喂養(yǎng)聯(lián)合LPS灌胃建立的NEC模型中,預(yù)先外源性給予谷氨酰胺的干預(yù)組中腸組織TNF-a、IL-6的含量與模型組比較明顯降低,而干預(yù)組中腸組織IL-10的含量與模型組比較明顯升高,表明谷氨酰胺可能通過抑制炎癥級聯(lián)反應(yīng)中TNF-α、IL-6表達,促進IL-10表達進而保護腸道,達到減輕壞死性小腸結(jié)腸炎新生鼠的腸組織病理損傷。3.人工喂養(yǎng)聯(lián)合LPS灌胃建立的NEC模型中,預(yù)先外源性給予谷氨酰胺的干預(yù)組中腸組織SIgA的含量與模型組比較明顯增加,表明谷氨酰胺可能通過提高腸道體液免疫因子SIgA的表達而保護腸黏膜。
【關(guān)鍵詞】：谷氨酰胺 壞死性小腸結(jié)腸炎 人工喂養(yǎng) 內(nèi)毒素 炎癥級聯(lián) 腸道免疫 白介素6 腫瘤壞死因子-α 白介素10 分泌型IgA
【學位授予單位】：揚州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R722.1
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• 英文摘要4-8
• 符號說明8-9
• 引言9-11
• 第一部分 新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎動物模型的建立11-15
• 1 材料和試劑11-12
• 2 實驗方法12-14
• 3 結(jié)果14-15
• 第二部分 谷氨酰胺預(yù)防新生鼠壞死性小腸結(jié)腸炎的作用機制15-27
• 1 材料和試劑15-17
• 2 實驗方法17-19
• 3 統(tǒng)計學分析19-20
• 4 結(jié)果20-27
• 第三部分 討論27-31
• 第四部分 結(jié)論31-32
• 參考文獻32-36
• 綜述36-43
• 參考文獻39-43
• 致謝43-44
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文44-45

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本文編號：1053705