PEDV感染介導(dǎo)Vero E6細(xì)胞差異表達(dá)蛋白篩選及功能解析
發(fā)布時(shí)間:2021-11-12 06:20
豬流行性腹瀉(porcine epidemic diarrhea, PED)是由豬流行性腹瀉病毒(porcineepidemic diarrhea virus, PEDV)引起的以腹瀉、嘔吐、脫水為主要特征的一種腸道傳染病,對(duì)哺乳仔豬致死率可達(dá)90%。近年來(lái),PEDV的感染呈現(xiàn)明顯抬頭趨勢(shì)。開(kāi)展PEDV致病機(jī)理相關(guān)的基礎(chǔ)研究具有現(xiàn)實(shí)意義和緊迫性。本研究中,我們使用等重同位素多標(biāo)簽相對(duì)定量蛋白質(zhì)組學(xué)(iTRAQ)技術(shù)對(duì)PEDV感染的Vero E6細(xì)胞(V組,3個(gè)生物重復(fù))和PEDV未感染的Vero E6細(xì)胞(C組,3個(gè)生物重復(fù))差異表達(dá)的蛋白進(jìn)行了篩選和功能解析。結(jié)果顯示,在V組和C組中,鑒定肽段總數(shù)為15564個(gè),鑒定蛋白數(shù)為3178個(gè),有定量信息的蛋白數(shù)為3171個(gè)。在V組和C組之間,一共存在126個(gè)差異表達(dá)的蛋白(p<0.05;V/C或C/V>1.2),其中表達(dá)水平上調(diào)的蛋白數(shù)為58個(gè),表達(dá)水平下調(diào)蛋白數(shù)為68個(gè)。GO分析結(jié)果顯示,126個(gè)差異表達(dá)蛋白的分子功能主要為結(jié)合作用和催化活性。KEGG Pathways分析結(jié)果表明,126個(gè)差異表達(dá)蛋白主要參與代謝、有機(jī)體系統(tǒng)...
【文章來(lái)源】:黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省
【文章頁(yè)數(shù)】:79 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
iTRAQ技術(shù)實(shí)驗(yàn)操作流程
感染PEDV的VeroE6細(xì)胞的制備:VeroE6細(xì)胞PEDV感染組為V1-V3(三個(gè)生物學(xué)重復(fù));對(duì)照組為C1-C3(三個(gè)生物學(xué)重復(fù))
PEDV在VeroE6細(xì)胞上的繁殖Westernblot鑒定:對(duì)照組為C1-C3(三個(gè)生物學(xué)重復(fù));VeroE6細(xì)胞PEDV感染組為V1-V3(三個(gè)生物學(xué)重復(fù))
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬流行性腹瀉病毒N蛋白與Vero E6核仁蛋白Fibrillarin的亞細(xì)胞定位分析[J]. 石達(dá),陳建飛,時(shí)洪艷,張志榜,馮力. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(11)
[2]2010—2011年仔豬腹瀉的病因分析和防控措施[J]. 陳建飛,劉孝珍,時(shí)洪艷,仇華吉,劉長(zhǎng)明,馮力. 養(yǎng)豬. 2011(05)
[3]流行性腹瀉病毒E基因與pSFV重組RNA的構(gòu)建[J]. 余麗蕓,侯喜林. 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報(bào). 2005(01)
[4]差異蛋白質(zhì)組學(xué)及其應(yīng)用[J]. 何大澄,肖雪媛. 北京師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2002(04)
[5]Vero細(xì)胞培養(yǎng)特性的研究[J]. 房廉潔,呂曉萍,董麗華. 白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2000(03)
[6]豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉病毒的免疫電鏡診斷的研究[J]. 王繼科,劉長(zhǎng)明,馬思奇,王明,魏鳳祥,于文濤,周金法. 中國(guó)畜禽傳染病. 1991(02)
[7]應(yīng)用豬胎腸單層細(xì)胞培養(yǎng)豬流行性腹瀉病毒的研究[J]. 宣華,邢德坤,王殿瀛,朱維正,趙鳳玉,鞏懷俊,費(fèi)思閣. 獸醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 1984(03)
[8]免疫酶技術(shù)證實(shí):國(guó)內(nèi)的豬傳染性胃腸炎病毒與比利時(shí)的CLV在血清學(xué)上相一致[J]. 錢(qián)永清,王兆久,劉洪云,唐騏駿,嚴(yán)仲烈. 獸醫(yī)科技雜志. 1981(08)
[9]吉林省“豬傳染性胃腸炎”疫情調(diào)查、人工感染傳代和病毒分離試驗(yàn)[J]. 李佑民,柳桂信,朱維正,邢德坤,李忠來(lái),武云蓮,錢(qián)順生. 家畜傳染病. 1981(01)
[10]豬傳染性胃腸炎熒光抗體診斷法的研究——國(guó)內(nèi)毒株(吉毒)芡光抗體的制備和應(yīng)用[J]. 朱維正,李佑民,邢德坤. 家畜傳染病. 1980(04)
本文編號(hào):3490340
【文章來(lái)源】:黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省
【文章頁(yè)數(shù)】:79 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
iTRAQ技術(shù)實(shí)驗(yàn)操作流程
感染PEDV的VeroE6細(xì)胞的制備:VeroE6細(xì)胞PEDV感染組為V1-V3(三個(gè)生物學(xué)重復(fù));對(duì)照組為C1-C3(三個(gè)生物學(xué)重復(fù))
PEDV在VeroE6細(xì)胞上的繁殖Westernblot鑒定:對(duì)照組為C1-C3(三個(gè)生物學(xué)重復(fù));VeroE6細(xì)胞PEDV感染組為V1-V3(三個(gè)生物學(xué)重復(fù))
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬流行性腹瀉病毒N蛋白與Vero E6核仁蛋白Fibrillarin的亞細(xì)胞定位分析[J]. 石達(dá),陳建飛,時(shí)洪艷,張志榜,馮力. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(11)
[2]2010—2011年仔豬腹瀉的病因分析和防控措施[J]. 陳建飛,劉孝珍,時(shí)洪艷,仇華吉,劉長(zhǎng)明,馮力. 養(yǎng)豬. 2011(05)
[3]流行性腹瀉病毒E基因與pSFV重組RNA的構(gòu)建[J]. 余麗蕓,侯喜林. 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報(bào). 2005(01)
[4]差異蛋白質(zhì)組學(xué)及其應(yīng)用[J]. 何大澄,肖雪媛. 北京師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2002(04)
[5]Vero細(xì)胞培養(yǎng)特性的研究[J]. 房廉潔,呂曉萍,董麗華. 白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2000(03)
[6]豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉病毒的免疫電鏡診斷的研究[J]. 王繼科,劉長(zhǎng)明,馬思奇,王明,魏鳳祥,于文濤,周金法. 中國(guó)畜禽傳染病. 1991(02)
[7]應(yīng)用豬胎腸單層細(xì)胞培養(yǎng)豬流行性腹瀉病毒的研究[J]. 宣華,邢德坤,王殿瀛,朱維正,趙鳳玉,鞏懷俊,費(fèi)思閣. 獸醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 1984(03)
[8]免疫酶技術(shù)證實(shí):國(guó)內(nèi)的豬傳染性胃腸炎病毒與比利時(shí)的CLV在血清學(xué)上相一致[J]. 錢(qián)永清,王兆久,劉洪云,唐騏駿,嚴(yán)仲烈. 獸醫(yī)科技雜志. 1981(08)
[9]吉林省“豬傳染性胃腸炎”疫情調(diào)查、人工感染傳代和病毒分離試驗(yàn)[J]. 李佑民,柳桂信,朱維正,邢德坤,李忠來(lái),武云蓮,錢(qián)順生. 家畜傳染病. 1981(01)
[10]豬傳染性胃腸炎熒光抗體診斷法的研究——國(guó)內(nèi)毒株(吉毒)芡光抗體的制備和應(yīng)用[J]. 朱維正,李佑民,邢德坤. 家畜傳染病. 1980(04)
本文編號(hào):3490340
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