為了建立一種體外誘導(dǎo)培養(yǎng)水牛外周血來源樹突狀細(xì)胞（dendritic cell,DC）的方法,試驗(yàn)分離了水牛外周血來源的單個核細(xì)胞（PBMC）,在粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）和白細(xì)胞介素（IL-4）聯(lián)合作用下進(jìn)行誘導(dǎo)分化,并以LPS誘導(dǎo)的未成熟樹突狀細(xì)胞發(fā)育為成熟樹突狀細(xì)胞作對照組,通過顯微鏡（光學(xué)顯微鏡、掃描電子顯微鏡、透射電子顯微鏡）和流式細(xì)胞術(shù)分別對獲得的細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察和表型鑒定。結(jié)果表明:PBMC在50 ng/mL GM-CSF和50 ng/mL IL-4體外持續(xù)作用6 d后,流式細(xì)胞術(shù)檢測表現(xiàn)出CD11c^highMHCⅡ^medCD40^medCD86^low的表型特征,與未成熟樹突狀細(xì)胞的一般表型特征相符。培養(yǎng)至第4天,圓形的PBMC開始呈現(xiàn)出不規(guī)則狀態(tài);培養(yǎng)至第6天,可在細(xì)胞膜上觀察到小的微絨毛、突起和細(xì)胞聚集等未成熟樹突狀細(xì)胞的形態(tài)特征,與表型鑒定結(jié)果一致。在LPS的進(jìn)一步作用下,PBMC呈現(xiàn)出成熟樹突狀細(xì)胞的典型形態(tài)。說明GM-CSF和IL-4聯(lián)合作用可以獲得未成熟樹... 

【文章來源】：黑龍江畜牧獸醫(yī). 2020,(19)北大核心

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水牛樹突狀細(xì)胞流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果

上述結(jié)果表明,水牛PBMC在體外經(jīng)50 ng/mL GM-CSF和50 ng/mL IL-4持續(xù)作用6 d后獲得的細(xì)胞符合哺乳動物未成熟樹突狀細(xì)胞的基本特征,并且該細(xì)胞可以在LPS的進(jìn)一步作用下發(fā)育成熟。圖3 水牛外周血來源樹突狀細(xì)胞掃描電子顯微鏡觀察結(jié)果

水牛外周血來源樹突狀細(xì)胞掃描電子顯微鏡觀察結(jié)果


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