REV感染對SPF雛雞免疫器官細胞凋亡及細胞增殖相關因子表達的影響
發(fā)布時間：2021-08-21 13:53
由于禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒（REV）感染導致的免疫抑制特性,現(xiàn)今禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生�。≧E）對禽養(yǎng)殖業(yè)仍造成較大的危害。為了有效降低REV對養(yǎng)禽業(yè)的危害,迫切需要了解REV導致雛雞免疫抑制的詳細機制。本研究以1日齡SPF雛雞為研究對象,將實驗動物隨機分為REV感染組和對照組。其中REV感染組的1日齡雛雞于腹腔注射500μL的REV病毒稀釋液,對照雛雞腹腔注射500μL的滅菌生理鹽水,于感染后7、14、21、28、35d取材。分別應用PI單染和Anexin V-FITC/PI雙染的方法檢測雛雞免疫器官中淋巴細胞周期和細胞凋亡的動態(tài)變化、應用CCK8方法檢測免疫器官中淋巴細胞增殖功能變化、應用RT-PCR技術檢測REV感染后免疫器官中REV拷貝數(shù)的動態(tài)改變和Cyclin D1、Cyclin E、CDK2、CDK4 mRNA表達水平的變化、應用Western Blot方法檢測Cyclin D1、Cyclin E蛋白含量的動態(tài)變化。為REV免疫致病機制的闡明和防治（制）提供了重要參考依據(jù),主要結果如下:（1）1日齡SPF雛雞感染REV后7-28 d,其胸腺中檢測到了病毒;脾臟中在在整個實驗的...
【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學黑龍江省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：83 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
細胞周期中Cyclin與CDK在不同時相的相互作用（引自百度圖片）
該結構也叫周期素盒(cyclin box)，該部位能夠結合 CDKs，并激活其發(fā)揮作用。該蛋白的 C 端也含有一個 PEST 序列，該序列與蛋白降解密切相關，還有研究發(fā)現(xiàn)，在 Cyclin E 第380 位蘇氨酸可發(fā)生自身磷酸化，能夠使 Cyclin E 發(fā)生降解，這一殘基的磷酸化與泛素化路徑處理有關。因此，Cyclin E 能通過上述兩種方式降解。Cyclin E 在 G1 中期合成，細胞周期G1 期向 S 期過渡時含量最高，當進入 S 期后 Cyclin E 會被迅速降解，其含量急劇降低至消失[84]。（2）Cyclin E-CDK2 與增殖異常的關系 細胞異常增殖是腫瘤發(fā)生的重要前提，是由細胞周期調(diào)控相關蛋白表達異常所致。主要表現(xiàn)在細胞周期各個階段的變化及 Cyclins、CDKs和 CKI 三者表達異常。隨著人們對細胞周期相關研究的不斷深入，對 Cyclin E 和 CDK2 認知更深，認為 Cyclin E 表達失調(diào)，使細胞周期中染色體穩(wěn)定性變?nèi)酰瑥亩斐杉毎鲋钞惓�，進而引起腫瘤的發(fā)生[85]。Cyclin E-CDK2 也是作用于 G1/S 期，與 Cyclin D-CDK4/6 具有協(xié)同作用，二者形成了對 Rb 蛋白磷酸化的陽性反饋回路，共同促進細胞由 G1 到 S 期的轉換，因此，故 Cyclin E-CDK2 表達異�？墒辜毎� G1-S 期調(diào)控失調(diào)，導致細胞增殖異常。有研究表明，通過 ATP 分子抑制劑來抑制 CDK2 活性，使 CDK2 和 Cyclin E 分離來降低 CDK2-CyclinE 復合物的活性水平，可阻止細胞進入 S 期[86]。據(jù)報道，在人結腸癌中，細胞周期蛋白 E和 CDK2 過度表達與人結腸癌的發(fā)展有密切聯(lián)系[85]。因此，Cyclin E-CDK2 復合物的不正常表達與增殖異常密切相關。
EV 感染 SPF 雛雞胸腺淋巴細胞凋亡變化 感染 1 日齡 SPF 雛雞后 14-21 d，其胸腺淋巴細胞凋亡數(shù)量顯著（P<0.0.01）高于對照雛雞，其余未見統(tǒng)計學差異（P>0.05）（表 3-1，圖 3-1 和表 3-1 REV 感染 SPF 雛雞后第 14 和 21 d 胸腺淋巴細胞凋亡百分比變3-1 Changes of apoptosis percentage in thymus lymphocytes of SPF chicks infeREV at 14 and 21 days組別 groups C I14 1.82±0.23 6.45±0.62*21 2.97±0.37 5.67±0.46*C—對照組；I—REV 感染組*表示差異顯著，P<0.05；**表示差異極顯著，P<0.01；無標注表示差異不顯著，P>C—control group; I—group infected with REVThe values with asterisk differ significantly(with single asterisk, P<0.05) or very significansterisk, P<0.01), and no significant(with no asterisk, P>0.05), the following is same as here
【參考文獻】：
期刊論文
[1]鎘對雞胚成纖維細胞增殖和凋亡的影響[J]. 吳漢東,王會. 畜牧與獸醫(yī). 2018(01)
[2]網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒免疫抑制狀態(tài)下禽波氏菌對雛雞致病性增強[J]. 楊萍萍,袁朋,魏凱,胡莉萍,朱瑞良. 畜牧獸醫(yī)學報. 2017(08)
[3]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒依賴Caspase途徑誘導仔豬胸腺細胞凋亡[J]. 張沖,趙識非,王剛,于穎,劉永剛,常亞飛,涂亞斌,王淑杰,姜成剛,蔡雪輝. 中國預防獸醫(yī)學報. 2016(12)
[4]網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒改良型LAMP檢測方法的建立[J]. 曾婷婷,謝芝勛,謝麗基,劉加波,龐耀珊,范晴,羅思思,鄧顯文,謝志勤. 動物醫(yī)學進展. 2013(08)
[5]傳染性法氏囊病毒對SPF雛雞免疫器官細胞凋亡及bcl-2mRNA表達的影響[J]. 佟美姣,高雪麗,李博韜,鄭世民. 畜牧獸醫(yī)學報. 2013(04)
[6]病毒感染對細胞周期調(diào)控影響的研究進展[J]. 周雪紅,李凱. 微生物學免疫學進展. 2012(06)
[7]細胞周期中G1/S檢驗點的研究進展[J]. 舒麗娟. 中國醫(yī)學工程. 2012(07)
[8]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒套式PCR檢測方法的建立[J]. 畢研麗,孫翠平,王金良,郭廣君,呂素芳,苗立中,沈志強. 畜牧與獸醫(yī). 2011(12)
[9]Cyclin D1與細胞周期調(diào)控[J]. 盧夢玲,閆超,賴多,徐漢虹. 生物技術通報. 2011(10)
[10]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒囊膜基因gp90的克隆表達及ELISA方法的初步建立[J]. 余沖,黃勇,田明星,石敏,李敏,趙芳芳. 浙江大學學報(農(nóng)業(yè)與生命科學版). 2011(04)
博士論文
[1]REV感染對SPF雛雞miRNA及其靶基因mRNA表達的影響[D]. 于志強.東北農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]豬圓環(huán)病毒2型感染誘導PK-15細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激與凋亡的機制研究[D]. 周瑩珊.浙江大學 2016
[3]宿主波形蛋白在禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒感染中的作用機制研究[D]. 胡峰.中國農(nóng)業(yè)科學院 2015
[4]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病基因工程亞單位疫苗及DNA疫苗的研制[D]. 李凱.中國農(nóng)業(yè)科學院 2014
[5]黃芪多糖對人紅白血病K562細胞增殖和凋亡的影響及機制[D]. 李超.南方醫(yī)科大學 2014
[6]CyclinD1通過激活NDR調(diào)控細胞周期的機制研究[D]. 杜朝陽.中國科學技術大學 2013
[7]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒與J-亞群白血病病毒的致病性及其疫苗研究[D]. 孫淑紅.山東農(nóng)業(yè)大學 2007
碩士論文
[1]丹東地區(qū)雞傳染性貧血病毒的分離鑒定及VP3蛋白促凋亡作用的研究[D]. 蔡靜.沈陽農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]茶樹油提取物粉對大小鼠免疫功能的影響[D]. 韓玲玲.揚州大學 2017
[3]REV感染對SPF雛雞免疫器官免疫功能及Cyclin D1表達的影響[D]. 齊偉.東北農(nóng)業(yè)大學 2017
[4]REV感染對雞胚成纖維細胞凋亡及P53表達的影響[D]. 白玉.東北農(nóng)業(yè)大學 2017
[5]細胞周期相關蛋白在人結腸癌組織中的表達及其臨床意義的探討[D]. 陳楚杰.廣西醫(yī)科大學 2017
[6]REV感染對SPF雛雞免疫器官細胞凋亡及Bcl-2、C-myc基因表達的影響[D]. 侯寧.東北農(nóng)業(yè)大學 2016
[7]Cyclin E蛋白表達與局部晚期乳腺癌新輔助化療療效相關性研究[D]. 朱恒光.南昌大學醫(yī)學院 2015
[8]IBDV感染SPF雛雞免疫器官細胞凋亡及相關基因表達變化[D]. 佟美姣.東北農(nóng)業(yè)大學 2013
[9]REV感染SPF雞中IL-6、IL-18和IFN-γ的定量檢測[D]. 陳雪鋒.山東農(nóng)業(yè)大學 2012
[10]吳茱萸堿誘導人肝癌細胞HepG2細胞周期阻滯機制研究[D]. 劉溪.哈爾濱商業(yè)大學 2012
本文編號：3355725
【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學黑龍江省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：83 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
細胞周期中Cyclin與CDK在不同時相的相互作用（引自百度圖片）
該結構也叫周期素盒(cyclin box)，該部位能夠結合 CDKs，并激活其發(fā)揮作用。該蛋白的 C 端也含有一個 PEST 序列，該序列與蛋白降解密切相關，還有研究發(fā)現(xiàn)，在 Cyclin E 第380 位蘇氨酸可發(fā)生自身磷酸化，能夠使 Cyclin E 發(fā)生降解，這一殘基的磷酸化與泛素化路徑處理有關。因此，Cyclin E 能通過上述兩種方式降解。Cyclin E 在 G1 中期合成，細胞周期G1 期向 S 期過渡時含量最高，當進入 S 期后 Cyclin E 會被迅速降解，其含量急劇降低至消失[84]。（2）Cyclin E-CDK2 與增殖異常的關系 細胞異常增殖是腫瘤發(fā)生的重要前提，是由細胞周期調(diào)控相關蛋白表達異常所致。主要表現(xiàn)在細胞周期各個階段的變化及 Cyclins、CDKs和 CKI 三者表達異常。隨著人們對細胞周期相關研究的不斷深入，對 Cyclin E 和 CDK2 認知更深，認為 Cyclin E 表達失調(diào)，使細胞周期中染色體穩(wěn)定性變?nèi)酰瑥亩斐杉毎鲋钞惓�，進而引起腫瘤的發(fā)生[85]。Cyclin E-CDK2 也是作用于 G1/S 期，與 Cyclin D-CDK4/6 具有協(xié)同作用，二者形成了對 Rb 蛋白磷酸化的陽性反饋回路，共同促進細胞由 G1 到 S 期的轉換，因此，故 Cyclin E-CDK2 表達異�？墒辜毎� G1-S 期調(diào)控失調(diào)，導致細胞增殖異常。有研究表明，通過 ATP 分子抑制劑來抑制 CDK2 活性，使 CDK2 和 Cyclin E 分離來降低 CDK2-CyclinE 復合物的活性水平，可阻止細胞進入 S 期[86]。據(jù)報道，在人結腸癌中，細胞周期蛋白 E和 CDK2 過度表達與人結腸癌的發(fā)展有密切聯(lián)系[85]。因此，Cyclin E-CDK2 復合物的不正常表達與增殖異常密切相關。
EV 感染 SPF 雛雞胸腺淋巴細胞凋亡變化 感染 1 日齡 SPF 雛雞后 14-21 d，其胸腺淋巴細胞凋亡數(shù)量顯著（P<0.0.01）高于對照雛雞，其余未見統(tǒng)計學差異（P>0.05）（表 3-1，圖 3-1 和表 3-1 REV 感染 SPF 雛雞后第 14 和 21 d 胸腺淋巴細胞凋亡百分比變3-1 Changes of apoptosis percentage in thymus lymphocytes of SPF chicks infeREV at 14 and 21 days組別 groups C I14 1.82±0.23 6.45±0.62*21 2.97±0.37 5.67±0.46*C—對照組；I—REV 感染組*表示差異顯著，P<0.05；**表示差異極顯著，P<0.01；無標注表示差異不顯著，P>C—control group; I—group infected with REVThe values with asterisk differ significantly(with single asterisk, P<0.05) or very significansterisk, P<0.01), and no significant(with no asterisk, P>0.05), the following is same as here
【參考文獻】：
期刊論文
[1]鎘對雞胚成纖維細胞增殖和凋亡的影響[J]. 吳漢東,王會. 畜牧與獸醫(yī). 2018(01)
[2]網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒免疫抑制狀態(tài)下禽波氏菌對雛雞致病性增強[J]. 楊萍萍,袁朋,魏凱,胡莉萍,朱瑞良. 畜牧獸醫(yī)學報. 2017(08)
[3]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒依賴Caspase途徑誘導仔豬胸腺細胞凋亡[J]. 張沖,趙識非,王剛,于穎,劉永剛,常亞飛,涂亞斌,王淑杰,姜成剛,蔡雪輝. 中國預防獸醫(yī)學報. 2016(12)
[4]網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒改良型LAMP檢測方法的建立[J]. 曾婷婷,謝芝勛,謝麗基,劉加波,龐耀珊,范晴,羅思思,鄧顯文,謝志勤. 動物醫(yī)學進展. 2013(08)
[5]傳染性法氏囊病毒對SPF雛雞免疫器官細胞凋亡及bcl-2mRNA表達的影響[J]. 佟美姣,高雪麗,李博韜,鄭世民. 畜牧獸醫(yī)學報. 2013(04)
[6]病毒感染對細胞周期調(diào)控影響的研究進展[J]. 周雪紅,李凱. 微生物學免疫學進展. 2012(06)
[7]細胞周期中G1/S檢驗點的研究進展[J]. 舒麗娟. 中國醫(yī)學工程. 2012(07)
[8]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒套式PCR檢測方法的建立[J]. 畢研麗,孫翠平,王金良,郭廣君,呂素芳,苗立中,沈志強. 畜牧與獸醫(yī). 2011(12)
[9]Cyclin D1與細胞周期調(diào)控[J]. 盧夢玲,閆超,賴多,徐漢虹. 生物技術通報. 2011(10)
[10]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒囊膜基因gp90的克隆表達及ELISA方法的初步建立[J]. 余沖,黃勇,田明星,石敏,李敏,趙芳芳. 浙江大學學報(農(nóng)業(yè)與生命科學版). 2011(04)
博士論文
[1]REV感染對SPF雛雞miRNA及其靶基因mRNA表達的影響[D]. 于志強.東北農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]豬圓環(huán)病毒2型感染誘導PK-15細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激與凋亡的機制研究[D]. 周瑩珊.浙江大學 2016
[3]宿主波形蛋白在禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒感染中的作用機制研究[D]. 胡峰.中國農(nóng)業(yè)科學院 2015
[4]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病基因工程亞單位疫苗及DNA疫苗的研制[D]. 李凱.中國農(nóng)業(yè)科學院 2014
[5]黃芪多糖對人紅白血病K562細胞增殖和凋亡的影響及機制[D]. 李超.南方醫(yī)科大學 2014
[6]CyclinD1通過激活NDR調(diào)控細胞周期的機制研究[D]. 杜朝陽.中國科學技術大學 2013
[7]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒與J-亞群白血病病毒的致病性及其疫苗研究[D]. 孫淑紅.山東農(nóng)業(yè)大學 2007
碩士論文
[1]丹東地區(qū)雞傳染性貧血病毒的分離鑒定及VP3蛋白促凋亡作用的研究[D]. 蔡靜.沈陽農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]茶樹油提取物粉對大小鼠免疫功能的影響[D]. 韓玲玲.揚州大學 2017
[3]REV感染對SPF雛雞免疫器官免疫功能及Cyclin D1表達的影響[D]. 齊偉.東北農(nóng)業(yè)大學 2017
[4]REV感染對雞胚成纖維細胞凋亡及P53表達的影響[D]. 白玉.東北農(nóng)業(yè)大學 2017
[5]細胞周期相關蛋白在人結腸癌組織中的表達及其臨床意義的探討[D]. 陳楚杰.廣西醫(yī)科大學 2017
[6]REV感染對SPF雛雞免疫器官細胞凋亡及Bcl-2、C-myc基因表達的影響[D]. 侯寧.東北農(nóng)業(yè)大學 2016
[7]Cyclin E蛋白表達與局部晚期乳腺癌新輔助化療療效相關性研究[D]. 朱恒光.南昌大學醫(yī)學院 2015
[8]IBDV感染SPF雛雞免疫器官細胞凋亡及相關基因表達變化[D]. 佟美姣.東北農(nóng)業(yè)大學 2013
[9]REV感染SPF雞中IL-6、IL-18和IFN-γ的定量檢測[D]. 陳雪鋒.山東農(nóng)業(yè)大學 2012
[10]吳茱萸堿誘導人肝癌細胞HepG2細胞周期阻滯機制研究[D]. 劉溪.哈爾濱商業(yè)大學 2012
本文編號：3355725
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/dongwuyixue/3355725.html
最近更新
教材專著
