為了解坦布蘇病毒病在我國家禽類中的流行情況,應用間接ELISA方法對江蘇、山東、四川的鴨、雞和鵝進行了抗坦布蘇病毒抗體測定,并對可疑病例的病料進行了病毒分離。2012年5月至2013年1月江蘇省抗體陽性率為78.5%（142/181）,四川省抗體陽性率為0（0/40）。其中抗體陽性地區(qū)紹興鴨（蛋鴨）的抗體陽性率為90.9%（100/110）,楓葉鴨（種鴨）為65.6%（40/61）,櫻桃谷鴨（種鴨）為20%（2/10）。通過對南京某鴨群多次抗體檢測結(jié)果表明,5月和次年1月抗體水平較低,9月抗體水平較高,5月到9月份抗體水平呈升高趨勢,9月到次年1月呈下降趨勢。2012年10月至2013年1月江蘇部分地區(qū)的84份雞血清（卵黃）抗坦布蘇病毒抗體總體陽性率為57.1%（49/84）。溧陽抗體陽性率為84.6%（11/13）;南京抗體陽性率為57.7%（15/26）;鎮(zhèn)江抗體陽性率為51.1%（23/45）。蛋雞的抗體陽性率為66.7%（26/39）,肉雞的抗體陽性率為51.1%（23/45）。應用套式RT-PCR方法檢測10份肉雞可疑病料,結(jié)果病原陽性率為0（0/10）。應用酶標鴨二抗間接E... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略表
引言
第一章 文獻綜述
    1 病原學
        1.1 病毒形態(tài)及理化特性
        1.2 病毒培養(yǎng)特性
    2 分子生物學
        2.1 基因結(jié)構(gòu)及復制機制
        2.2 編碼的蛋白
    3 流行病學
    4 臨床癥狀與病理變化
    5 診斷方法
        5.1 病毒分離
        5.2 分子生物學檢測
        5.3 血清學檢測
    6 防治
第二章 鴨坦布蘇病毒病流行情況調(diào)查
    摘要
    1 材料
        1.1 病毒株、重組E蛋白、陰陽性血清、陰陽性卵黃抗體
        1.2 主要試劑
        1.3 主要實驗儀器
    2 方法
        2.1 調(diào)查地點選取
        2.2 流行病學調(diào)查
        2.3 樣品采集
        2.4 間接ELISA方法
    3 結(jié)果
        3.1 江蘇及四川樣品ELISA檢測結(jié)果
        3.2 不同采樣時間的鴨坦布蘇病毒抗體效價變化
        3.3 不同品種鴨抗體陽性率結(jié)果
    4 討論
    ABSTRACT
第三章 雞坦布蘇病毒病流行情況調(diào)查
    摘要
    1 材料
        1.1 重組E蛋白、陰陽性血清、陰陽性卵黃抗體
        1.2 主要試劑
        1.3 主要實驗儀器
    2 方法
        2.1 樣品采集與處理
        2.2 間接ELISA
        2.3 套式RT-PCR檢測
    3 結(jié)果
        3.1 江蘇不同地區(qū)ELISA檢測結(jié)果
        3.2 不同品種雞抗體陽性率結(jié)果
        3.3 套式RT-PCR檢測結(jié)果
    4 討論
    ABSTRACT
第四章 鵝坦布蘇病毒病流行情況調(diào)查
    摘要
    1 材料
        1.1 主要試劑及菌種
        1.2 主要實驗儀器
    2 方法
        2.1 流行病學調(diào)查
        2.2 樣品采集與處理
        2.3 間接ELISA檢測
        2.4 套式RT-PCR檢測
        2.5 PCR陽性產(chǎn)物鑒定及回收
        2.6 膠回收產(chǎn)物與T載體的連接
        2.7 DH5a感受態(tài)細胞的制備
        2.8 連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化
        2.9 重組質(zhì)粒的提取
        2.10 重組質(zhì)粒的鑒定
        2.11 NS5基因的序列測定與分析
    3 結(jié)果
        3.1 發(fā)病情況調(diào)查及剖檢病變觀察結(jié)果
        3.2 江蘇、山東與四川樣品ELISA檢測結(jié)果
        3.3 不同品種鵝抗體陽性率結(jié)果
        3.4 套式RT-PCR檢測結(jié)果
        3.5 重組質(zhì)粒的鑒定
        3.6 NS5基因部分片段的序列分析結(jié)果
    4 討論
    ABSTRACT
第五章 三重抗體ELISA方法的建立
    摘要
    1 材料
        1.1 實驗動物
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2 方法
        2.1 羊抗鵝二抗的制備
        2.2 ELISA方法的建立
        2.3 江蘇部分地區(qū)鵝血清樣品的檢測
    3 結(jié)果
        3.1 粗提蛋白含量與純度檢測結(jié)果
        3.2 免疫雙擴散結(jié)果
        3.3 ELISA反應條件優(yōu)化結(jié)果
        3.4 江蘇,山東部分地區(qū)鵝血清檢測結(jié)果
    4 討論
    ABSTRACT
參考文獻
全文總結(jié)
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]禽坦布蘇病毒病的防控[J]. 劉宇卓.  農(nóng)家致富. 2013(03)
[2]鴨坦布蘇病毒RT-PCR診斷方法的建立與應用[J]. 李國平.  中國畜牧獸醫(yī). 2013(01)
[3]種鴨黃病毒病疫苗免疫效果觀察[J]. 張金強,王勝,張青嬋,玄甲峰,王蕾,胡北俠,許明清,李霞,張秀美.  中國家禽. 2013(02)
[4]鵝黃病毒囊膜蛋白的原核表達及抗原性分析[J]. 黃欣梅,李銀,趙冬敏,劉宇卓,張敬峰,韓凱凱,鈕慧敏.  華北農(nóng)學報. 2012(05)
[5]禽黃病毒套式RT-PCR檢測方法的建立及應用[J]. 黃欣梅,趙冬敏,劉宇卓,張敬峰,韓凱凱,李銀.  畜牧與獸醫(yī). 2012(06)
[6]鵝黃病毒JS804株的生物學特性[J]. 鈕慧敏,李銀,黃欣梅,趙東敏,劉宇卓,張敬峰,劉飛,李彤彤,周曉波,李祥瑞.  江蘇農(nóng)業(yè)學報. 2012(02)
[7]檢測鴨坦布蘇病毒卵黃抗體間接ELISA方法的建立[J]. 施少華,傅光華,萬春和,程龍飛,陳紅梅,林建生,林芳,梁昭平,王斌,李敏,王鑫,許芬芬,黃瑜.  養(yǎng)禽與禽病防治. 2012(02)
[8]鴨坦布蘇病毒一步法RT-PCR檢測方法的建立和應用[J]. 張帥,云濤,葉偉成,鄧曉輝,崔言順,華炯鋼,張存,張燕.  浙江農(nóng)業(yè)學報. 2012(01)
[9]一例鴨坦布蘇病毒與大腸桿菌混合感染的診斷[J]. 劉友生,傅光華,黃瑜,陳紅梅,程龍飛,施少華,萬春和,林建生,林芳.  福建畜牧獸醫(yī). 2012(01)
[10]新型黃病毒在種鵝中垂直傳播的研究[J]. 趙冬敏,黃欣梅,劉宇卓,張敬峰,李銀.  南方農(nóng)業(yè)學報. 2012(01)

碩士論文
[1]鴨坦布蘇病毒巢式PCR檢測方式及其重組E蛋白間接ELISA診斷方法的研究[D]. 郝明飛.山東農(nóng)業(yè)大學 2012



本文編號：2992985