利用營養(yǎng)水平誘導(dǎo)新疆哈薩克綿羊產(chǎn)后發(fā)情激素變化規(guī)律及部分相關(guān)基因表達研究
本文選題:哈薩克綿羊 切入點:乏情期 出處:《石河子大學(xué)》2015年碩士論文
【摘要】:新疆是我國綿羊養(yǎng)殖大省,但綿羊的季節(jié)性繁殖性狀嚴(yán)重制約著新疆綿羊養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。綿羊的季節(jié)性發(fā)情受到下丘腦-垂體-卵巢(hypothalamic-pituitary-gonadal axis,HPG)系統(tǒng)的調(diào)控。同時營養(yǎng)對綿羊的發(fā)情表現(xiàn)也存在很大影響的,目前的研究表明,綿羊季節(jié)繁殖是光周期在其中起到了關(guān)鍵作用,那么這種由營養(yǎng)水平誘導(dǎo)的發(fā)情性狀與一般認為的光周期調(diào)控通路的關(guān)系如何?所以本研究以哈薩克羊為研究對象,在乏情期觀察其發(fā)情表現(xiàn),檢測發(fā)情周期中生殖激素變化規(guī)律,結(jié)合Kisspeptin/GPR54系統(tǒng)和TSH/Dio系統(tǒng)主要關(guān)鍵基因的表達規(guī)律,具體內(nèi)容如下:(1)為了解新疆哈薩克綿羊乏情期血清中4種重要生殖激素孕酮(P4)、雌激素(E2)、促黃體素(LH)和促卵泡素(FSH)濃度,解析新疆哈薩克綿羊乏情期發(fā)情綿羊血清中生殖激素變化規(guī)律。本試驗采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定P4、E2、LH和FSH濃度,研究新疆哈薩克綿羊乏情期發(fā)情及不發(fā)情綿羊體內(nèi)激素變化。結(jié)果表明:乏情期發(fā)情綿羊P4的含量顯著低于不發(fā)情綿羊(P0.05),發(fā)情綿羊E2、LH和FSH的含量顯著高于不發(fā)情綿羊(P0.05),E2的顯著變化可以作為舍飼哈薩克綿羊發(fā)情的參考指標(biāo),測定3天時間內(nèi)舍飼哈薩克綿羊體內(nèi)E2含量,若E2含量顯著上升時,舍飼哈薩克綿羊的生理狀態(tài)可能為發(fā)情狀態(tài)。(2)比較新疆哈薩克綿羊乏情期和發(fā)情期發(fā)情綿羊血清中4種重要生殖激素孕酮(P4)、雌激素(E2)、促黃體素(LH)和促卵泡素(FSH)濃度,解析綿羊乏情期和發(fā)情期哈薩克綿羊發(fā)情時生殖激素的變化規(guī)律,采用ELISA的方法測定4種生殖激素濃度,結(jié)果表明:乏情期發(fā)情綿羊P4、E2、LH和FSH的濃度顯著低于發(fā)情期發(fā)情綿羊(P0.05),發(fā)情母羊P4在發(fā)情周期內(nèi)呈現(xiàn)波動式變化,發(fā)情綿羊E2、LH和FSH在發(fā)情周期內(nèi)呈現(xiàn)脈沖式變化;乏情期發(fā)情綿羊的發(fā)情時間發(fā)生在羔羊斷奶后的第10-15天,而發(fā)情期發(fā)情綿羊的發(fā)情周期持續(xù)時間較長,可以維持整個繁殖季節(jié)。乏情期綿羊不發(fā)情則是因為LH和FSH的分泌量不足,不足以引起E2和P4的變化,不能引起綿羊的發(fā)情。(3)乏情期提高營養(yǎng)水平,誘導(dǎo)哈薩克綿羊發(fā)情,檢測乏情期哈薩克綿羊血清中4種重要生殖激素孕酮(P4)、雌激素(E2)、促黃體素(LH)和促卵泡素(FSH)濃度,解析綿羊乏情期發(fā)情的生殖激素變化規(guī)律,為營養(yǎng)因素調(diào)控綿羊乏情期發(fā)情提供激素方面的理論依據(jù)。試驗選用36只成年哈薩克綿羊,隨機分成兩組,高營養(yǎng)試驗組補飼精料,對照組正常飼喂,在乏情期對發(fā)情及不發(fā)情綿羊靜脈采血,采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定P4、E2、LH和FSH濃度,結(jié)果表明:高營養(yǎng)試驗組綿羊發(fā)情率為44%,要顯著高于對照組16%的發(fā)情率;營養(yǎng)誘導(dǎo)下,試驗組發(fā)情綿羊P4、LH和FSH的分泌量顯著高于對照組發(fā)情綿羊(P0.05);生殖激素P4、LH和FSH與營養(yǎng)水平呈正相關(guān),E2含量變化不明顯。試驗組生殖激素含量的升高可能與其攝入粗蛋白含量增大相關(guān),營養(yǎng)水平調(diào)控激素的變化,進而可以調(diào)節(jié)綿羊的發(fā)情。(4)乏情期提高營養(yǎng)水平,誘導(dǎo)哈薩克綿羊發(fā)情,結(jié)合kisspeptin/GPR54系統(tǒng)和TSH/Dio系統(tǒng),檢測乏情期哈薩克發(fā)情綿羊和不發(fā)情綿羊的kiss-1、GPR54、TSH和Dio2基因的相對表達量。采用實時熒光定量PCR的方法,對各個采集組織的相關(guān)基因進行分析。結(jié)果表明:kiss-1、GPR54、TSH和Dio2基因的表達部位廣泛,乏情期發(fā)情綿羊的kiss-1、GPR54、TSH和Dio2基因的相對表達量高于不發(fā)情綿羊,尤其是在下丘腦中,發(fā)情綿羊的kiss-1、GPR54、TSH和Dio2基因的相對表達量顯著高于不發(fā)情綿羊(P0.05)。kisspeptin/GPR54系統(tǒng)和TSH/Dio系統(tǒng)相關(guān)基因的高表達,均會刺激GnRH的分泌,進而刺激LH和FSH分泌,促進E2和P4的分泌,促使乏情期綿羊發(fā)情,說明基因表達量的變化和生殖激素的變化是共同影響綿羊發(fā)情的的,并不是相互獨立影響的。表明:營養(yǎng)調(diào)控通路并不是獨立影響綿羊發(fā)情,可能是在光周期調(diào)控系統(tǒng)上游部位發(fā)揮作用,促使光周期調(diào)控系統(tǒng)中關(guān)鍵基因高表達,促使生殖激素發(fā)生改變,最終影響綿羊的發(fā)情。
[Abstract]:In this study , the changes of reproductive hormones in sheep were studied by enzyme - linked immunosorbent assay ( ELISA ) . The results showed that the content of E _ 2 , LH and FSH in sheep was significantly higher than that of non - estrus sheep ( P0.05 ) . ( 2 ) There were four important reproductive hormones progesterone ( P4 ) , estrogen ( E2 ) , progesterone ( LH ) and follicle - stimulating hormone ( FSH ) in sheep serum during estrus and estrus in Xinjiang . ( 3 ) The concentration of 4 important reproductive hormones progesterone ( P4 ) , estrogen ( E2 ) , LH and FSH in the serum of sheep were determined by enzyme - linked immunosorbent assay ( ELISA ) . The results showed that the relative expression of kiss - 1 , GPRS 54 , TSH and Dio2 genes were higher than those of non - estrus sheep ( P0.05 ) . The results showed that the relative expression of kiss - 1 , GPRS 54 , TSH and Dio2 genes in estrus sheep was higher than that of non - estrus sheep ( P0.05 ) .
【學(xué)位授予單位】:石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:S826
【參考文獻】
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,本文編號:1705214
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