重組腦膜炎球菌PorB蛋白對豬偽狂犬弱毒疫苗的免疫增強效力
發(fā)布時間:2018-01-20 21:02
本文關(guān)鍵詞: 腦膜炎球菌PorB蛋白 豬偽狂犬弱毒疫苗 免疫增強 出處:《江蘇農(nóng)業(yè)學報》2017年02期 論文類型:期刊論文
【摘要】:探討原核表達的重組腦膜炎球菌外膜蛋白PorB對豬偽狂犬弱毒活疫苗免疫的增強效果。將Gen Bank公布的腦膜炎球菌外膜蛋白PorB基因克隆到原核表達載體pQZⅢ中,命名為pQZ-PorB質(zhì)粒,轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21中表達重組蛋白。采用SDS-PAGE、Western-blot技術(shù)和Ni~(2+)-NTA柱鑒定并純化重組蛋白。將每份含100μg劑量的重組PorB蛋白與豬偽狂犬弱毒疫苗混合后分別滴鼻免疫3日齡仔豬和肌肉注射免疫50日齡豬,同時設(shè)PBS對照組和免疫前對照組。免疫28 d后測定IgG和IgA抗體水平、豬外周血淋巴細胞增殖情況以及細胞因子(IFN-γ、IL-10、IL-6)的表達水平。SDS-PAGE和Western-blot結(jié)果表明,PorB基因在大腸桿菌中表達,表達的重組PorB蛋白是可溶性的,Ni~(2+)-NTA柱能夠有效純化重組蛋白。重組PorB蛋白不但能夠刺激免疫豬在較短時間內(nèi)產(chǎn)生的較高血清IgG抗體、黏膜IgA抗體和中和抗體,而且可以通過誘導機體產(chǎn)生IFN-γ和IL-6來促進細胞免疫反應。在豬偽狂犬弱毒疫苗免疫中,重組PorB蛋白可以作為一種優(yōu)良的免疫增強劑。
[Abstract]:To investigate the effect of recombinant meningococcal outer membrane protein (PorB) expressed in prokaryotic cells on the immunization of porcine pseudorabies attenuated live vaccine. The PorB gene of meningococcal outer membrane protein published by Bank was cloned into prokaryotic expression vector pQZ 鈪,
本文編號:1449445
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