發(fā)布時(shí)間：2017-12-21 10:44

  本文關(guān)鍵詞：大鼠β-catenin miRNA表達(dá)載體的構(gòu)建及在脂肪干細(xì)胞中沉默效果的檢測　出處：《四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2014年05期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 脂肪干細(xì)胞 β-catenin miRNA 表達(dá)載體

【摘要】：目的構(gòu)建具有沉默大鼠脂肪干細(xì)胞β-catenin表達(dá)的miRNA(miR)表達(dá)載體。方法通過酶切法將合成的miR表達(dá)載體寡聚核苷酸引物與質(zhì)粒pSWH相連,形成pSWH-miR;PCR擴(kuò)增出增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP)開放閱讀框,插入經(jīng)雙酶切處理的pSWH-miR形成pSWH-EGFP-miR。β-catenin miR表達(dá)質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染SD大鼠脂肪干細(xì)胞(adipose-derived stem cells derived from rats,rADSCs),72h后提取細(xì)胞全蛋白,Western blot檢測β-catenin的表達(dá)情況。結(jié)果針對大鼠β-catenin的不同位點(diǎn),一共構(gòu)建了5個(gè)miRNA表達(dá)載體(miR-780、miR-796、miR-1467、miR-1948、miR-1960),其中miR-780、miR-796對β-catenin沉默效果最好(P0.05),miR-1960的沉默效果次之(P0.05),miR-1467、miR-1948不具有沉默效果(P0.05)。結(jié)論 miR-780、miR-796能夠有效沉默SD大鼠脂肪干細(xì)胞中β-catenin的表達(dá)。
【作者單位】： 四川大學(xué)口腔再生醫(yī)學(xué)國家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室;四川大學(xué)口腔疾病研究國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;四川大學(xué)材料科學(xué)與工程學(xué)院;四川大學(xué)華西口腔醫(yī)院兒童口腔科;四川大學(xué)華西口腔醫(yī)院口腔頜面外科;
【基金】：國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(No.2011AA030107) 國家自然科學(xué)基金(No.30973348) 四川省科技支撐計(jì)劃(No.2012SZ0013、No.2012SZ0035、No.2013GZX0158及No.2013SZ0015)資助
【分類號】：R329
【正文快照】： 脂肪干細(xì)胞能夠分化形成多種組織來源的細(xì)胞,如脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等,這為臨床治療組織損傷相關(guān)疾病帶來了*國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(No.2011AA030107)、國家自然科學(xué)基金(No.30973348)和四川省科技支撐計(jì)劃(No.2012SZ0013、No.2012SZ0035、No.2

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