低溫是限制桃樹生長、發(fā)育、繁殖以及地理分布的一個重要環(huán)境因子。明確桃響應(yīng)低溫脅迫的分子調(diào)控機(jī)制有可能為培育和篩選出相對抗寒的桃品系提供研究基礎(chǔ)。以抗寒性較強(qiáng)的秋燕桃為試材,將一年生休眠枝條置于-5 (CK),-15,-25℃低溫處理48 h,應(yīng)用雙向電泳技術(shù)(Two-dimensional electrophoresis, 2-DE)測定枝條皮層蛋白質(zhì)表達(dá)變化情況。結(jié)果顯示:通過質(zhì)譜鑒定發(fā)現(xiàn),有150個蛋白質(zhì)點(diǎn)的表達(dá)豐度在低溫脅迫后發(fā)生明顯變化,豐度顯著上調(diào)的有97個,豐度顯著下調(diào)的有53個,通過蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)檢索成功地鑒定了其中的20個蛋白,發(fā)現(xiàn)這些蛋白質(zhì)主要參與氨基糖和核苷酸糖代謝、蔗糖和淀粉代謝、氨基酸代謝、MAPK信號通路、苯丙氨酸代謝和DNA的復(fù)制等代謝過程。利用RT-PCR驗(yàn)證了Alpha淀粉酶(M5VVU6)、葉綠素a/b結(jié)合蛋白(M5WUQ0)和環(huán)氧化物水解酶(D8L7V9)蛋白編碼的基因,隨著低溫脅迫的增加而上調(diào)表達(dá)。研究結(jié)果暗示了這些代謝途徑和3個特異蛋白可能在桃的抗寒機(jī)制中起重要作用。

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【部分圖文】：

圖1不同溫度下蛋白的表達(dá)分布示意圖

采用pH值4～7的非線性IPG干膠條和12.5%SDS-PAGE膠對不同溫度脅迫下樣品蛋白進(jìn)行分離，經(jīng)考馬斯亮藍(lán)染色后，獲得了分辨率和重復(fù)性較好的雙向電泳圖譜。本研究采用雙向電泳分析軟件(ImageMaster2Dplatinum5.0)比較分析了不同溫度脅迫下秋燕桃在-....

圖2相關(guān)基因的差異表達(dá)變化趨勢

由于蛋白質(zhì)的翻譯經(jīng)常伴隨發(fā)生磷酸化、糖基化和可變剪切等翻譯后的修飾，一個基因有可能會調(diào)控多個蛋白，致使基因的表達(dá)量和蛋白質(zhì)的表達(dá)量不一致，出現(xiàn)蛋白質(zhì)水平和基因水平的相關(guān)變化不一致的現(xiàn)象。通過RT-PCR分析發(fā)現(xiàn)所檢測的蛋白質(zhì)有5個蛋白質(zhì)水平和基因水平表達(dá)變化一致(圖2)。以-5....

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