為柑橘黃龍病快速準確檢測與海南柑橘黃龍病防控提供方法和依據(jù)支持,采用Taqman探針RT-qPCR法檢測了紅肉蜜柚、紅江橙植株不同部位組織中柑橘黃龍病菌(Candidatus Liberibacter asiaticus,Las)的含量與海南柑橘主產(chǎn)區(qū)主栽品種斑駁黃化型葉樣的Las含量。結(jié)果表明:采用Taqman探針RTqPCR法可實現(xiàn)對Las的靈敏快速檢測,檢測極限為1.49×10⁷個/g葉中脈。在疑似感染Las的紅肉蜜柚和紅江橙植株根、莖、葉、梢等組織中均檢測出Las,但不同組織的含量差異較大。其中:紅肉蜜柚的次級根中Las含量最高、達2.31×10¹¹個/g,新梢中Las含量最低、為1.15×10⁷個/g;紅江橙的新葉中Las含量最高、達3.65×10¹¹個/g,主根中的Las含量最低、為1.51×10⁹個/g。在部分表現(xiàn)正常的柑橘葉片中也檢測出Las,但斑駁黃化型葉片Las含量顯著高于表型正常葉片,老葉高出10⁴～10⁶倍,新...

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圖1RT-qPCR檢測HLBaspr引物探針組和內(nèi)參COXfpr

對感染了Las的臨高紅肉蜜柚樣品DNA進行10倍的連續(xù)濃度梯度100、10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6稀釋（表1）后進行qPCR。檢測結(jié)果表明：HLBaspr引物探針組在DNA稀釋到10-5時，每5μLDNA中仍能檢測到Las（圖1），而稀釋到10-6....

圖2qPCR定量檢測紅肉蜜柚和紅江橙不同組織中黃龍病菌的含量差異

對臨高縣的紅肉蜜柚和澄邁縣的紅江橙2品種各3株疑似黃龍病感病植株按主根、次級根、莖、新梢、老葉、新葉6個部位取樣進行qPCR。檢測結(jié)果（表2）表明：紅肉蜜柚和紅江橙植株各部位均可檢測出Las病原菌，且各部位Las的含量差異較大。紅肉蜜柚各部位Las的含量從次級根、老葉、主根、新葉....

圖3RT-qPCR定量檢測紅肉蜜柚和紅江橙顯癥與不顯癥葉片中黃龍病菌的含量

采用Taqman探針RT-qPCR法對海南省瓊中縣、澄邁縣、屯昌縣、臨高縣、儋州市等柑橘主產(chǎn)區(qū)主栽的紅肉蜜柚、水晶蜜柚、甜橙、福橙、檸檬等品種的疑似黃龍病樣品進行檢測的結(jié)果表明（表3）：在主產(chǎn)區(qū)采集的23個疑似黃龍病樣品DNA樣品中，只有來自儋州市的其中1份水晶蜜柚樣品檢測呈陰性....

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