[目的]江蘇宜興是我國百合生產(chǎn)的傳統(tǒng)優(yōu)勢產(chǎn)區(qū),百合枯萎病是嚴(yán)重阻礙百合產(chǎn)業(yè)化健康發(fā)展的一個關(guān)鍵因子。通過分離鑒定百合枯萎病的致病菌株,接種不同濃度的病原菌孢子懸液,研究百合的發(fā)病程度,為江蘇宜興百合枯萎病的生物防治提供科學(xué)基礎(chǔ)。[方法]采集宜興百合種植區(qū)典型枯萎病發(fā)病嚴(yán)重的植株及鱗莖分離致病菌株,通過柯赫氏法則回接試驗初步確定致病性,對致病性強的菌株進(jìn)行DNA提取、PCR擴增和測序,基于病原菌rDNA-ITS基因序列和GenBank中已有相關(guān)尖孢鐮刀菌序列,應(yīng)用MEGA 7.0軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹;采用刺傷百合鱗片接種不同濃度的病原菌孢子懸液與在土壤中接種不同濃度病原菌孢子懸液的方法,評估不同濃度孢子懸液對百合枯萎病發(fā)病程度的影響。[結(jié)果]從典型枯萎病嚴(yán)重發(fā)病的植株上共分離得到4株病原菌株:P-OF、P-PF、P-RF和P-BF,分離率分別為25%、20%、10%和5%�？潞帐戏▌t回接試驗表明:接種菌株P(guān)-OF、P-PF百合發(fā)病率為100%,鱗片病情指數(shù)分別為92.50、48.25、15.00、30.00;盆栽試驗表明:接種菌株P(guān)-OF的百合植株最先發(fā)病,初步確定菌株P(guān)-OF的致病性最強...

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圖4鱗片接種不同濃度百合枯萎病病原菌孢子懸液試驗

盆栽試驗結(jié)果(表3)表明:土壤接種不同濃度孢子懸液對百合植株病情指數(shù)的影響不同。隨接種病原菌濃度增加,植株病情指數(shù)顯著增加,T55和T66處理病情指數(shù)顯著高于其他病原菌孢子懸液濃度處理,T55與T66處理之間無顯著差異。試驗期內(nèi),CK處理百合植株沒有出現(xiàn)發(fā)病現(xiàn)象。表3接種不同濃....

圖1病原菌回接試驗

除對照外,接種百合枯萎病4個菌株13d后,百合植株開始發(fā)病,最先發(fā)病的是接種菌株P(guān)-OF的處理,其他依次分別為接種菌株P(guān)-PF、P-BF、P-RF的處理。以上結(jié)果表明:菌株P(guān)-OF、P-PF、P-BF和P-RF均是導(dǎo)致宜興百合枯萎病的病原菌,其中菌株P(guān)-OF的致病性最強,后續(xù)相....

圖2百合枯萎病病原菌菌株P(guān)-OF的形態(tài)觀察

DNA測序結(jié)果表明,病原菌菌株P(guān)-OFrDNA-ITS序列長度為547bp(GenBankNo.MN883862)。將其在NCBI網(wǎng)站中進(jìn)行BLAST比對,用鄰接法通過MEGA7.0軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,結(jié)果(圖3)表明,該病原菌菌株與Fusariumoxysporum....

圖3基于菌株P(guān)-OFrDNA-ITS序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹

圖2百合枯萎病病原菌菌株P(guān)-OF的形態(tài)觀察2.5接種不同濃度百合枯萎病病原菌菌株P(guān)-OF孢子懸液對百合枯萎病的影響

本文編號：3967183