金針菇黑腐病病原菌的分離與分子鑒定
發(fā)布時間:2024-02-25 05:59
為了明確山東省金針菇(Flammulina velutipes)工廠化廠房內(nèi)發(fā)現(xiàn)的細菌性病害的種類,從感病子實體組織分離獲得病原菌菌株,通過提取其基因組總DNA并分別擴增病原菌的16S rDNA和gyrB基因,序列分析結(jié)果表明該病原菌為托拉斯假單胞桿菌(Pseudomonas tolaasii)。
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本文編號:3910183
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圖1黑腐病對金針菇的為害癥狀
工廠化金針菇自然發(fā)病癥狀見圖1A、圖1B,致病性試驗接種菌蓋和菌柄后發(fā)病癥狀見圖1C、圖1D。如圖1A、圖1B所示,該病害一般從菌柄基部(瓶口周圍)發(fā)病,初期呈黃褐色至黑褐色,并可延菌柄往上侵染幼小菇蕾,導致其萎蔫死亡;亦可直接侵染菌蓋,呈現(xiàn)凹陷病斑,初期黃色,后期顏色逐漸加深,....
圖2基于ITS基因序列構(gòu)建的NJ系統(tǒng)發(fā)育樹
利用Solarbio細菌基因組DNA提取試劑盒提取致病菌基因組DNA。以DNA為模板,使用高保真酶,利用表1的引物分別擴增3個致病菌的16SrDNA和gyrB基因。PCR擴增結(jié)束后,電泳并切膠回收目的產(chǎn)物送測序公司測序。分別得到長度約為1400bp的16SrDNA基....
圖3基于gyrB基因序列構(gòu)建的NJ系統(tǒng)發(fā)育樹
圖2基于ITS基因序列構(gòu)建的NJ系統(tǒng)發(fā)育樹從圖2和圖3可知,同源性比對結(jié)果表明分離的3個致病菌的16SrDNA基因與GenBank中托拉斯假單胞桿菌(Pseudomonastolaasii)的分離物的同源性最高,核苷酸一致率最高為100%;gyrB基因與GenBan....
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