杜鵑RoDREB2C轉(zhuǎn)錄因子克隆與誘導(dǎo)表達(dá)分析
發(fā)布時間:2024-01-16 19:04
DREB (Dehydration responsive element binding protein),即干旱應(yīng)答元件結(jié)合蛋白,能夠結(jié)合HSFA3啟動子上的DRE元件來提高植物的耐熱性。本研究以杜鵑耐熱品種‘胭脂蜜’(Rhododendron obtusum’Yan zhimi’)為材料,基于轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)信息,克隆了RoDREB2C基因開放閱讀框(opening reading frame, ORF)全長,推測它可以編碼340個氨基酸。同源性分析發(fā)現(xiàn)其與茶樹同源蛋白(Camellia sinensis, CsDREB2C)的進(jìn)化關(guān)系最近。亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示RoDREB2C蛋白定位在細(xì)胞核。我們構(gòu)建過表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化模式植物擬南芥(Arabidopsis taliana),通過實時熒光定量PCR驗證了RoDREB2C基因過量表達(dá)情況。隨后,我們測定了高溫處理后擬南芥幼苗的成活率、離子滲透率以及葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fv/Fm,結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因擬南芥耐熱性均極顯著高于野生型擬南芥。通過不同非生物脅迫(高溫, ABA, SA, MeJA)來分析其在杜鵑葉片中的表達(dá)模式,40℃高溫處理時,表達(dá)量呈現(xiàn)先升...
【文章頁數(shù)】:9 頁
本文編號:3879047
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