【目的】利用酵母單雜交文庫篩選巨峰葡萄VvFT基因啟動子上游調(diào)控因子,挖掘參與調(diào)控葡萄開花時間的因子,為揭示花期轉(zhuǎn)變代謝通路和定向改良葡萄品種提供理論參考�！痉椒ā坷肞lantCARE分析預(yù)測VvFT基因啟動子順式作用元件,并以VvFT基因啟動子為誘餌,利用酵母單雜交文庫篩選技術(shù),篩選作用在VvFT基因啟動子上游的調(diào)控因子�！窘Y(jié)果】葡萄VvFT基因啟動子區(qū)域存在13種啟動子順式作用元件,包括A-box、CAAT-box和TATA-box組成型調(diào)控元件;光響應(yīng)調(diào)控元件ATC-motif、Box 4、G-Box和GT1-motif;茉莉酸甲酯（MeJA）響應(yīng)調(diào)控元件CGTCA-motif和TGACG-motif;干旱誘導(dǎo)的MYB結(jié)合位點元件MBS;玉米蛋白代謝必需的調(diào)控元件O2-site;參與生物鐘控制的調(diào)控元件circadian;厭氧誘導(dǎo)必需調(diào)控元件ARE。以VvFT基因啟動子為誘餌,篩選獲得34條表達序列標簽（EST）,其中有21條為未知功能,有13條在植物生長、抗逆防御、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白酶等方面均有已知或預(yù)測的功能,包括轉(zhuǎn)錄抑制因子ft41、GRF1互作因子ft44、NAP... 

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
0 引言
1 材料與方法
    1.1 試驗材料
    1.2 試驗方法
        1.2.1 Vv FT啟動子克隆及序列分析
        1.2.2 誘餌載體p Ab Ai-p Vv FT構(gòu)建
        1.2.3 誘餌載體p Ab Ai-p Vv FT轉(zhuǎn)化酵母菌株
        1.2.4 c DNA文庫構(gòu)建
        1.2.5 Vv FT基因啟動子互作蛋白篩選
        1.2.6 酵母單雜交點對點驗證互作蛋白
2 結(jié)果與分析
    2.1 Vv FT基因啟動子序列分析
    2.2 誘餌菌株Y1H-pAbAi-pVvFT構(gòu)建
    2.3 c DNA文庫構(gòu)建及互作蛋白篩選
    2.4 EST序列的BLASTx分析和功能注釋結(jié)果
    2.5 Vv Dna J10與Vv FT基因啟動子互作驗證結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]水稻高鹽脅迫下的酵母雙雜交文庫構(gòu)建及OsRPK1胞內(nèi)互作蛋白質(zhì)的篩選[J]. 鄒禹,劉園園,錢寶云,占新春,鄭樂婭,張煒,張培江.  江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2019(04)
[2]葡萄赤霉素合成關(guān)鍵基因VvGA20ox2的克隆、亞細胞定位和表達分析[J]. 高世敏,董陽,王武,陶建敏.  江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2018(06)
[3]調(diào)控植物花發(fā)育的MYB類轉(zhuǎn)錄因子研究進展[J]. 錢景華,李增強,廖小芳,湯丹峰,史奇奇,周瑞陽,陳鵬.  生物技術(shù)通訊. 2016(02)
[4]秈稻與粳稻花時對茉莉酸甲酯（MeJA）響應(yīng)的敏感性差異[J]. 閆志強,徐海,馬作斌,高東昌,徐正進.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(13)
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本文編號：3732729