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金花茶類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆和功能初步研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-02 07:46
  類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UDP-flavonoid glycosyltransferase, UFGT)催化黃酮醇、花青素等形成穩(wěn)定的糖苷,是黃酮醇苷、花青素苷合成的最后一步反應(yīng)的關(guān)鍵。該研究以金花茶的花瓣為材料,采用PCR擴(kuò)增的方法,獲得了2個(gè)金花茶轉(zhuǎn)錄組中篩選到的類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶基因。結(jié)果顯示:(1)CnUFGT14基因(登錄號(hào)為MT370521)全長(zhǎng)1 562 bp,開放閱讀框1 380 bp,編碼459個(gè)氨基酸;CnUFGT15基因(登錄號(hào)為MT370520)全長(zhǎng)1 546 bp,開放閱讀框1 368 bp,編碼455個(gè)氨基酸;兩個(gè)蛋白序列均具有UFGT蛋白特有的PSPG保守區(qū)域。(2)系統(tǒng)進(jìn)化樹分析發(fā)現(xiàn),CnUFGT14和CnUFGT15分別與茶樹UFGT78A14和UFGT78A15親緣關(guān)系最近。(3)熒光定量PCR分析發(fā)現(xiàn),CnUFGT14基因的表達(dá)量與多種多酚組分的含量呈正相關(guān),CnUFGT15基因的表達(dá)量與花瓣黃酮醇、多酚等的含量相關(guān)性不顯著。(4)亞細(xì)胞定位研究發(fā)現(xiàn),CnUFGT14、CnUFGT15蛋白在細(xì)胞核膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜部位均呈現(xiàn)明顯的定位。(5)葉盤法轉(zhuǎn)化煙草... 

【文章來(lái)源】:西北植物學(xué)報(bào). 2020,40(12)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:11 頁(yè)

【部分圖文】:

金花茶類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆和功能初步研究


CnUFGT14和CnUFGT15的克隆與編碼蛋白特征分析

序列,蛋白,野生型,煙草


6個(gè)CnUFGT14基因過(guò)表達(dá)株系花朵中,黃酮總量(TF)、多酚總量(TP)均顯著高于野生型煙草(CK),但陽(yáng)性株系間差異不顯著,表達(dá)量對(duì)組分含量影響較小(圖8,Ⅰ),多酚總量(TP)明顯高于黃酮總量(TF)。多酚組分中,除兒茶素沒(méi)食子酸酯(CG)在UFGT14-51、沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(GCG)在UFGT14-13等株系的含量與野生型差異不顯著,其他陽(yáng)性株系中的含量均顯著高于野生型煙草(圖8,Ⅱ、Ⅲ);黃酮組分中,槲皮素3-蕓香糖苷(Qu3R)、蘆丁(Ru)和二氫槲皮素(DHQ)在6個(gè)陽(yáng)性株系的含量均顯著高于野生型煙草,山奈酚(Ka)和槲皮素7-O-β-D-葡萄糖苷(Qu7G)低于野生型煙草中的含量,槲皮素3-O-葡萄糖苷(Qu3G)在6個(gè)陽(yáng)性株系和野生型煙草中的含量變化不顯著(圖8,Ⅳ、Ⅴ)。說(shuō)明CnUFGT14基因主要促進(jìn)合成部分無(wú)色多酚,對(duì)黃酮醇合成的促進(jìn)作用不顯著。圖3 不同物種UFGT蛋白氨基酸序列比對(duì)

序列,物種,預(yù)測(cè)圖,進(jìn)化樹


不同物種UFGT蛋白氨基酸序列比對(duì)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]金花茶組植物花朵內(nèi)多酚組分含量分析[J]. 姜麗娜,李紀(jì)元,范正琪,童冉,莫潤(rùn)宏,李志輝,蔣昌杰.  林業(yè)科學(xué)研究. 2020(04)
[2]植物類黃酮生物合成相關(guān)UDP–糖基轉(zhuǎn)移酶研究進(jìn)展[J]. 解林峰,任傳宏,張波,徐昌杰,李鮮.  園藝學(xué)報(bào). 2019(09)
[3]丹參類黃酮3-O糖基轉(zhuǎn)移酶基因Sm UF3GT的克隆、亞細(xì)胞定位及時(shí)空表達(dá)分析[J]. 李紅艷,劉景玲,金偉波,梁宗鎖.  中國(guó)中藥雜志. 2019(10)
[4]金花茶組植物花色與細(xì)胞內(nèi)重要環(huán)境因子的關(guān)系[J]. 姜麗娜,李紀(jì)元,童冉,何麗波,張蕾,李志輝,黃曉娜.  廣西植物. 2019(12)
[5]三種山茶屬金花茶組植物花朵類黃酮成分研究[J]. 李辛雷,王佳童,孫振元,王潔,殷恒福,范正琪,李紀(jì)元.  廣西植物. 2019(07)
[6]茶花紅葉芽變品種‘金華美女’葉色突變相關(guān)主要化學(xué)成分含量變化[J]. 應(yīng)震,張晶,殷恒福,范正琪,倪穗,吳斌,李紀(jì)元.  園藝學(xué)報(bào). 2017(04)
[7]苦蕎糖基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆及活性鑒定[J]. 李茂菲,周婧,姚攀鋒,趙學(xué)榮,李成磊,吳琦.  西北植物學(xué)報(bào). 2016(12)
[8]植物花青素合成代謝途徑及其分子調(diào)控[J]. 賈趙東,馬佩勇,邊小峰,楊清,郭小丁,謝一芝.  西北植物學(xué)報(bào). 2014(07)

博士論文
[1]金花茶花色相關(guān)基因的克隆及其功能研究[D]. 周興文.中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院 2012



本文編號(hào):3317181

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