本研究以矮牽牛為實(shí)驗(yàn)材料,利用VIGS技術(shù)驗(yàn)證矮牽牛類胡蘿卜素代謝途徑關(guān)鍵酶基因PhLcyB的功能,為探究植物葉片中類胡蘿卜素的代謝調(diào)控的分子機(jī)制及類胡蘿卜素在葉片呈色方面的作用機(jī)理提供理論依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)克隆獲得了PhLcyB基因的完整ORF序列,通過(guò)VIGS技術(shù)構(gòu)建了TRV-PhLcyB和TRV-PhCHS重組載體,通過(guò)侵染發(fā)現(xiàn)TRV-PhLcyB侵染的的矮牽牛植株葉片出現(xiàn)大面積白化現(xiàn)象,花瓣顏色沒(méi)有明顯變化。進(jìn)行葉片生化檢測(cè)后,發(fā)現(xiàn)PhLcyB基因沉默后葉片中類胡蘿卜素含量明顯降低,尤其是葉黃素降低明顯,同時(shí)葉片中葉綠素a和葉綠素b含量明顯降低。PhLcyB基因?qū)Π珷颗Ｈ~片中類胡蘿卜素（尤其是葉黃素）的代謝調(diào)節(jié)有重要作用。 

【文章來(lái)源】：基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020,39(11)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【部分圖文】：

攜帶Ph Lcy B,Ph CHS基因片段的重組載體驗(yàn)證注:M:DL1000 DNA Marker

圖4 攜帶Ph Lcy B,Ph CHS基因片段的重組載體驗(yàn)證注:M:DL1000 DNA Marker1.5 矮牽牛Ph Lcy B基因的定量表達(dá)分析

以TRV-Ph Lcy B組，TRV空載體組和Mock control組花期矮牽牛的葉片為實(shí)驗(yàn)材料，提取RNA進(jìn)行表達(dá)量檢測(cè)分析。TRV-Ph Lcy B植株，TRV空載體對(duì)照植株均檢測(cè)出TRV1載體，表明農(nóng)桿菌侵染成功，并且Mock control組中沒(méi)有檢測(cè)到TRV載體；TRV-Ph Lcy B組中Ph Lcy B基因表達(dá)量明顯低于TRV空載體組和Mock control組中Ph Lcy B基因表達(dá)量，出現(xiàn)了基因沉默現(xiàn)象(圖7)。q RT-PCR分析結(jié)果顯示，TRV-Ph Lcy B組中Ph Lcy B基因表達(dá)量明顯低于TRV空載體組和Mock control組中Ph Lcy B基因表達(dá)量。而TRV空載體組和Mock control組中Ph Lcy B基因表達(dá)量相比并未出現(xiàn)明顯變化(圖8)。2 討論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3315028