為篩選適于在山西省主栽品種晉大53號推廣應(yīng)用的根瘤菌資源,以晉大53號大豆根瘤為研究對象,采用組織塊分離法、平板劃線法、震蕩培養(yǎng)法以及分子生物學(xué)方法,對根瘤菌進行分離、純化和鑒定,并研究其產(chǎn)酸、堿能力、耐鹽特性以及結(jié)瘤能力。結(jié)果表明:從晉大53號大豆根瘤中成功分離并純化出1株根瘤菌,編號為53-4,具有剛果紅染料抗性,產(chǎn)酸快,可耐5%濃度NaCl。測序獲得該菌株的16S rDNA序列,經(jīng)NCBI在線數(shù)據(jù)庫比對后,發(fā)現(xiàn)53-4菌株同Rhizobia sp.(HQ589024.1)、Beijerinckia fluminensis(NR 116306.1)和Mesorhizobium sp.(JN622153.1)等具有高達99%的序列同源性。NJ系統(tǒng)發(fā)育樹顯示該菌株同Mesorhizobium sp.(JN622153.1)聚為同一支,表明53-4菌株屬于中慢生根瘤菌(Mesorhizobium sp.)。對該菌株結(jié)瘤基因nodA進行PCR擴增,經(jīng)電泳檢測能夠擴增出明顯條帶,說明該菌株基因組中具有根瘤菌關(guān)鍵結(jié)瘤基因nodA。回接53-4的晉大53號的株高、地上部鮮重、根鮮重、植株干重和根...

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【部分圖文】：

圖1根瘤菌53-4表型及剛果紅抗性

晉大53號大豆根瘤各破損組織塊附近均有菌落生長,且各細菌菌落形態(tài)及顏色一致。從較大的單菌落中挑選到1株不被剛果紅染色的細菌,編號為53-4。菌落表面濕潤、不透明、乳白色、微微凸起(圖1),這些生長特點均與根瘤菌的基本特征[25]相符,初步判斷該菌株為根瘤菌。2.2根瘤菌16S....

圖2根瘤菌53-4菌株16SrDNA序列NJ系統(tǒng)發(fā)育樹

對53-4菌株的16SrDNA擴增序列NCBI在線數(shù)據(jù)庫比對結(jié)果顯示,菌株53-4同Rhizobiasp.(HQ589024.1)、Beijerinckiafluminensis(NR116306.1)和Mesorhizobiumsp.(JN622153.1)等具有較高....

圖3根瘤菌53-4結(jié)瘤基因nodA電泳檢測結(jié)果

回接結(jié)果顯示,接種USDA110的晉大53號大豆的地上部分鮮重、植株干重、根瘤數(shù)和根瘤鮮重顯著高于不接菌對照;回接根瘤菌53-4的晉大53號大豆的株高、地上部分鮮重、根鮮重、植株干重和根瘤鮮重均高于不接菌處理和接種USDA110處理,其中地上部分鮮重和根瘤鮮重顯著高于接種根瘤菌U....

圖4根瘤菌53-4回接結(jié)果

表1根瘤菌回接后大豆生長情況Table1Soybeangrowthafterre-inoculationofrhizobia處理Treatment株高Plantheight/cm地上部分鮮重Shootfreshweight/g根鮮重Rootfres....

本文編號：3956164