發(fā)布時間：2022-01-09 15:17

　　為探討RcCNGC2在蓖麻耐鹽中的作用,以通蓖5號葉片為材料,克隆獲得環(huán)核苷酸門控離子通道RcCNGC2完整編碼區(qū)序列（CDS）,并對該序列進行序列比對、蛋白結(jié)構(gòu)分析,構(gòu)建多元表達載體,分析了在鹽脅迫下蓖麻RcCNGC2基因根、莖、葉組織中6個時間點的表達量變化。結(jié)果顯示,RcCNGC2 CDS長度為2 148 bp,編碼715個氨基酸,蛋白分子量為34.15 ku,等電點為9.96,存在5個跨膜結(jié)構(gòu)域。氨基酸序列一致性分析表明,RcCNGC2與橡膠樹一致性最高,達89.15%。qRT-PCR分析結(jié)果顯示,NaCl處理后RcCNGC2表達量在根中上調(diào)且差異顯著,在莖、葉中隨NaCl處理時間延長而顯著減少。綜上,RcCNGC2在蓖麻受到鹽脅迫時起重要信號傳導(dǎo)作用。 

【文章來源】：華北農(nóng)學報. 2020,35(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

蓖麻RcCNGC2基因PCR擴增產(chǎn)物

經(jīng)測序為陽性菌液擴搖,提取質(zhì)粒后,應(yīng)用限制性內(nèi)切酶SmaⅠ和XbaⅠ將該質(zhì)粒與表達載體pCG-3300進行雙酶切,T4連接酶連接酶切產(chǎn)物,轉(zhuǎn)化到大腸桿菌感受態(tài)Top10細胞中,通過Kan抗性篩選陽性菌,擴搖后提質(zhì)粒,進行重組質(zhì)粒PCR鑒定和雙酶切鑒定,瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果(圖7)顯示,重組質(zhì)粒約為108 681 bp且明顯大于酶切后表達載體電泳條帶,酶切后目的片段大小與RcCNGC2序列大小一致,植物表達載體構(gòu)建成功。圖3 RcCNGC2蛋白保守區(qū)預(yù)測

RcCNGC2蛋白保守區(qū)預(yù)測

【參考文獻】：
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本文編號：3578960