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澳洲棉細(xì)菌人工染色體文庫構(gòu)建

發(fā)布時(shí)間:2021-11-24 05:12
  攜帶大片段基因組DNA的細(xì)菌人工染色體(bacterial artificial chromosome, BAC)文庫是進(jìn)行基因組結(jié)構(gòu)與功能等相關(guān)研究的重要基因組資源。澳洲棉是二倍體野生棉,具有抗或耐棉蚜、抗黃萎病、抗干旱、增加衣分率、提高纖維成熟度的潛力,種子無腺體或植株有腺體等許多優(yōu)良性狀。本研究是在現(xiàn)有的野生棉二倍體和四倍體棉BAC文庫基礎(chǔ)上,以二倍體野生棉種澳洲棉為實(shí)驗(yàn)材料,提取澳洲棉幼嫩葉的DNA,經(jīng)過HindⅢ酶切片段化,克隆到pSMART BAC (HindⅢ)載體,構(gòu)建了澳洲棉的基因組細(xì)菌人工染色體(bacterial artificial chromosome, BAC)文庫。該文庫總共包含16 128個(gè)克。42個(gè)384孔板),平均插入的片段為120 kb,基因組覆蓋率約1.06倍。澳洲棉BAC文庫的構(gòu)建將為棉屬野生種質(zhì)資源的保存與利用積累重要基因組資源。 

【文章來源】:分子植物育種. 2020,18(21)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

澳洲棉細(xì)菌人工染色體文庫構(gòu)建


酶切片段的選擇

澳洲棉細(xì)菌人工染色體文庫構(gòu)建


最佳酶切量的測定

質(zhì)量圖,基因組DNA,質(zhì)量,濃度


對選擇的目的片段進(jìn)行電洗脫,回收其中的DNA,用已稀釋過濃度的λDNA標(biāo)準(zhǔn)液為對照,檢測回收的DNA濃度,據(jù)條帶亮度對比(圖4),得出回收的DNA濃度應(yīng)在于3~4 ng/μL之間,后續(xù)操作按3 ng/μL計(jì)算。圖2 最佳酶切量的測定


本文編號(hào):3515302

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