為建立和優(yōu)化特色藥食兩用植物黑老虎（Kadsura coccinea）的ISSR-PCR反應(yīng)體系和擴增程序,通過正交和單因素試驗研究Mg²⁺、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、退火溫度及循環(huán)次數(shù)等因素對黑老虎ISSR-PCR反應(yīng)體系擴增效果的影響。結(jié)果表明,在20μL的反應(yīng)體系中,最佳擴增條件為Mg²⁺濃度2.5mmol/L、dNTPs濃度0.1mmol/L、引物濃度0.6μmol/L、Taq DNA聚合酶用量1.50U、模板DNA用量45ng,退火溫度50.4℃,循環(huán)40次。這一優(yōu)化體系的建立可為深入開展黑老虎種質(zhì)資源遺傳多樣性研究奠定基礎(chǔ)。 

【文章來源】：廣西科學. 2020,27(04)

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
0 引言
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 儀器及藥品
    1.3 方法
        1.3.1 黑老虎植物基因組DNA的提取
        1.3.2 ISSR-PCR反應(yīng)體系正交試驗
        1.3.3 ISSR-PCR反應(yīng)單因素試驗設(shè)計
        1.3.4 ISSR-PCR反應(yīng)程序的優(yōu)化
        1.3.5 ISSR反應(yīng)體系的驗證
2 結(jié)果與分析
    2.1 ISSR反應(yīng)體系正交試驗結(jié)果
    2.2 Mg2+濃度對ISSR?PCR擴增效果的影響
    2.3 dNTPs濃度對ISSR?PCR擴增效果的影響
    2.4 引物濃度對ISSR?PCR擴增效果的影響
    2.5 Taq DNA聚合酶用量對ISSR?PCR擴增效果的影響
    2.6 模板DNA用量對ISSR?PCR擴增效果的影響
    2.7 退火溫度對ISSR?PCR擴增效果的影響
    2.8 循環(huán)次數(shù)對ISSR?PCR擴增效果的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]極小種群喙核桃ISSR-PCR反應(yīng)條件的建立與優(yōu)化[J]. 史艷財,鄒蓉,朱成豪,熊忠臣,蔣運生.  廣西科學院學報. 2020(01)
[2]特色水果黑老虎的栽培技術(shù)[J]. 張海平,覃秀順,蔣振華.  果樹實用技術(shù)與信息. 2019(11)
[3]黑老虎的研究進展[J]. 梁忠厚,范適,宋光桃,李有清.  湖南生態(tài)科學學報. 2017(03)
[4]黑老虎果實化學成分和生理活性研究進展[J]. 謝瑋,張賢賢,平永良.  農(nóng)產(chǎn)品加工. 2017(02)
[5]木質(zhì)藤本植物黑老虎的居群結(jié)構(gòu)與動態(tài)[J]. 付玉嬪,司馬永康,祁榮頻,郝佳波,毛云玲,尹艾萍,陳少瑜,劉冬芬,張榮貴.  東北林業(yè)大學學報. 2015(09)
[6]不同地區(qū)冷飯團單株雌花占比率調(diào)查初報[J]. 龍世林,高漸飛,楊紅梅,胡瑾,房小晶,范志偉.  耕作與栽培. 2015(03)
[7]甜菜樹ISSR-PCR反應(yīng)體系的建立與優(yōu)化[J]. 吳春妍,楊冠松,張愛麗,申仕康,王躍華.  西南農(nóng)業(yè)學報. 2014(06)
[8]廣西藥用植物兩面針遺傳多樣性的ISSR分析[J]. 向巧彥,黃夕洋,李虹,蔣水元.  廣西科學. 2014(05)
[9]黑老虎的藥理活性成份研究進展[J]. 石焱芳,陳海玲.  海峽藥學. 2013(07)
[10]冷飯團特性及其栽培技術(shù)[J]. 吳智濤.  中國園藝文摘. 2012(06)

博士論文
[1]黑老虎及胡桃枝皮的化學成分研究[D]. 李賀然.中國協(xié)和醫(yī)科大學 2006



本文編號：3470789