采用標準稀釋平板法從馬尾松根際土中分離溶磷細菌,利用鉬銻抗比色法測定溶磷細菌的溶磷特性;通過分析溶磷菌的溶磷能力與發(fā)酵液pH的關系,以及液相色譜-質(zhì)譜(HPLC-MS)聯(lián)用對發(fā)酵液中有機酸的測定,探究其溶磷機制;通過對接種溶磷菌馬尾松盆栽苗生長、生理、土壤養(yǎng)分和土壤酶活性的測定,明確溶磷菌對馬尾松生長和生理的影響。結果表明:由馬尾松根際土壤中共篩選到溶磷細菌16株,其中菌株WJ27溶磷效果最優(yōu),液體培養(yǎng)5 d時的溶磷量達411.98 mg·L^-1。經(jīng)過表型觀察、生理生化鑒定和系統(tǒng)發(fā)育樹分析,發(fā)現(xiàn)菌株WJ27屬于伯克霍爾德菌屬;其對不同磷源的溶磷特性存在差異,溶磷能力依次為:Ca₃(PO₄)₂(220.85 mg·L^-1)>AlPO₄(182.33 mg·L^-1)>FePO₄·2H₂O(129.19 mg·L^-1)>CaHPO₄·2...

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圖1部分溶磷細菌的溶磷圈

從貴陽市花溪區(qū)馬尾松林根際土壤中分離出能產(chǎn)生明顯溶磷透明圈的細菌共16株(圖1)。培養(yǎng)5d時,根據(jù)透明圈法初篩結果顯示(表1),16株溶磷細菌的溶磷圈直徑(D)與菌落直徑(d)的比值范圍在1.9～5.0,各菌株間D/d值存在差異,其中,5≥D/d>3的菌株有7株,占總數(shù)的43.....

圖4不同磷源培養(yǎng)液中溶磷量(PSC)和pH的變化

圖3菌株WJ27基于16SrDNA序列同源性構建的系統(tǒng)發(fā)育樹2.5菌株WJ27分泌有機酸種類及相對含量的測定

圖5伯克霍爾德氏菌WJ27中有機酸物質(zhì)的高效液相色譜-質(zhì)譜分析

表4溶磷菌株WJ27分泌有機酸的相對含量Table4RelativecontentsoforganicacidssecretedfromsolublephosphorusstrainWJ27相對含量Relativecontent峰面積Peakar....

圖2菌株WJ27的革蘭氏染色結果(a)和個體形態(tài)(b)

菌株WJ27對4種不同磷酸鹽的溶解能力及溶解動態(tài)變化如下:搖瓶培養(yǎng)前4天,菌株WJ27對磷酸鐵的溶解量呈上升趨勢,并在第4天時達到最高,為129.19mg·L-1,之后出現(xiàn)下降,可能是因為培養(yǎng)液中細菌數(shù)量較多,導致對磷的消耗較大;培養(yǎng)液pH在前3天呈明顯下降趨勢,之后趨于平穩(wěn)....

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