過氧化氫酶(Catalase)廣泛存在于生物體內(nèi),主要功能是清除植物細(xì)胞內(nèi)光呼吸、線粒體電子傳遞及脂肪β-氧化等過程中產(chǎn)生的H₂O₂,從而保護(hù)細(xì)胞免于過氧化氫酶的毒害。為了解檳榔過氧化氫酶基因的相關(guān)信息,利用植物總RNA提取試劑盒提取檳榔葉片總RNA,通過同源克隆和RACE技術(shù)獲得檳榔全長(zhǎng)cDNA,并對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析及亞細(xì)胞定位。結(jié)果表明:獲得ArCAT1(MN692600)、ArCAT2(MN692601)、ArCAT3(MN692602)3個(gè)同源基因,其序列全長(zhǎng)均為1476 bp,編碼492個(gè)氨基酸。遺傳進(jìn)化分析顯示,ArCATS與同為棕櫚科的油棕(Elaeis guineensis)、海棗(Phoenixdactylifera)等植物的過氧化氫酶氨基酸序列具有較高的相似性,其中與油棕的親緣關(guān)系最近。亞細(xì)胞定位結(jié)果表明,ArCAT1蛋白定位于過氧化物酶體中,而ArCAT2和ArCAT3既定位于過氧化物酶體又定位于細(xì)胞核中。這為進(jìn)一步研究Catalase基因在檳榔中的生物學(xué)功能奠定基礎(chǔ)。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 葉片總RNA的提取及c DNA合成
        1.2.2 候選基因的同源克隆
        1.2.3 目的基因全長(zhǎng)序列克隆
        1.2.4 生物信息學(xué)分析
        1.2.5 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化和亞細(xì)胞定位分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 目的基因全長(zhǎng)序列的克隆
    2.2 Ar CATS基因的生物信息學(xué)分析
    2.3 亞細(xì)胞定位
3 討論



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