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巴西橡膠樹MADS-box基因家族6個成員的染色體物理定位

發(fā)布時(shí)間:2021-09-28 01:14
  MADS-box基因家族廣泛分布于真核生物中,巴西橡膠樹的MADS-box基因家族主要參與花形態(tài)建成,對生殖生長起到重要的調(diào)節(jié)作用。目前,MADS-box基因家族的26個相關(guān)基因已被克隆分析,但它們在染色體上的具體位置還未確定。本研究以巴西橡膠樹‘熱研7-33-97’品種為材料,將MADS-box基因家族的6個成員(HbAGL8、HbAG15、HbAGL30、HbTT16、HbAP1和HbSVP1)定位在細(xì)胞核染色體上,通過雙探針熒光原位雜交技術(shù)(FISH)對巴西橡膠樹MADS-box基因家族的這6個成員在細(xì)胞核染色體上進(jìn)行物理定位分析。結(jié)果表明:MADS-box基因家族的6個基因分別位于不同的染色體上,其中HbAGL15、HbAG8、HbAG30和HbSVP1基因定位在第4、5、7和8號染色體長臂上,其信號位點(diǎn)到著絲粒的平均百分距離是11.85、39.71、48.94和6.70;HbTT16和HbAP1基因定位在第1和13號染色體短臂上,其信號位點(diǎn)到著絲粒的平均百分距離是22.19和18.01。本研究結(jié)果揭示了巴西橡膠樹MADS-box基因家族的6個成員在細(xì)胞核染色體上的實(shí)際位置,展... 

【文章來源】:熱帶作物學(xué)報(bào). 2020,41(12)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:7 頁

【部分圖文】:

巴西橡膠樹MADS-box基因家族6個成員的染色體物理定位


橡膠樹古銅期嫩葉(A)與黃綠色嫩葉(B)

原位雜交,有絲分裂,熒光,染色體


制作探針時(shí),Hb AGL8目的序列用生物素標(biāo)記,Hb AGL15目的序列用地高辛標(biāo)記,然后進(jìn)行雙探針熒光原位雜交實(shí)驗(yàn),以檢測其在染色體上的實(shí)際位置。雜交檢測過程中2個基因的信號位點(diǎn)在細(xì)胞分裂間期、前期和中期均能同時(shí)檢測到,并且紅色和綠色熒光位點(diǎn)明顯分布在不同的染色體上(圖2A、圖2B、圖2C);陰性對照試驗(yàn)中,不加入探針進(jìn)行熒光原位雜交,用熒光顯微鏡檢測時(shí)檢測不到任何熒光信號(圖2D)。以高和瓊等[26]分析的‘熱研7-33-97’品種的核型所得的核型參數(shù)為依據(jù),進(jìn)行中期染色體核型分析,得到核型圖(圖2E)和核型模式圖(圖5)。結(jié)果表明,Hb AGL8定位在5號染色體長臂上,信號位點(diǎn)到著絲粒的百分距離平均值為39.71;Hb AGL15位于4號染色體長臂上,信號位點(diǎn)到著絲粒的百分距離平均值11.85。2.2 Hb AGL30和Hb TT16基因的FISH檢測與物理定位分析

原位雜交,有絲分裂,熒光,染色體


制作探針時(shí),Hb TT16目的序列用生物素標(biāo)記,Hb AGL30目的序列用地高辛標(biāo)記,進(jìn)行雙探針熒光原位雜交實(shí)驗(yàn),檢測其在染色體上的實(shí)際位置。雜交檢測過程中2個基因的信號位點(diǎn)在細(xì)胞分裂間期、前期和中期均能同時(shí)檢測到,并且紅色和綠色熒光位點(diǎn)明顯分布在不同的染色體上(圖3A、圖3B、圖3C);陰性對照試驗(yàn)中,不加入探針進(jìn)行熒光原位雜交,用熒光顯微鏡檢測時(shí)檢測不到任何熒光信號(圖3D)。以高和瓊等[26]分析的‘熱研7-33-97’品種的核型所得的核型參數(shù)為依據(jù),進(jìn)行中期染色體核型分析,得到核型圖(圖3E)和核型模式圖(圖5)。結(jié)果表明:Hb TT16定位在1號染色體短臂上,信號位點(diǎn)到著絲粒的百分距離平均值為22.19;Hb AGL30位于7號染色體長臂上,信號位點(diǎn)到著絲粒的百分距離平均值48.94。2.3 Hb AP1和Hb SVP1基因的FISH檢測與物理定位分析


本文編號:3410963

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