為探究桑椹果腐病的發(fā)病原因,采用常規(guī)組織分離法,從桑椹果腐病病果中分離得到一株真菌菌株,在PDA培養(yǎng)基上菌落呈圓形,可產(chǎn)生白色氣生菌絲和紫色色素。根據(jù)顯微觀察結(jié)果,大型分生孢子較少,呈紡錘型或鐮刀型,稍彎曲,向兩端逐漸變尖,具有2～5個(gè)隔膜,大小(154～407)μm×(14～31)μm;小型分生孢子較多,一端尖細(xì)、一端鈍圓,大小(33～95)μm×(20～38)μm,無隔膜或有1個(gè)隔膜。通過菌落形態(tài)和分生孢子形態(tài)觀察,初步認(rèn)為其為層出鐮刀菌(Fusarium proliferatum)。利用真菌EF-1α基因和rDNA ITS通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序分析,進(jìn)一步確認(rèn)桑椹果腐病的病原菌是層出鐮刀菌。根據(jù)柯赫氏法則鑒定病原菌,發(fā)現(xiàn)層出鐮刀菌對桑椹具有較強(qiáng)的感染能力。

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圖1病原菌Z4在PDA培養(yǎng)基上的形態(tài)圖3病原菌Z4在SNA培養(yǎng)基上的形態(tài)

圖5基于EF-1α基因和ITS序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹3討論

圖3病原菌Z4在SNA培養(yǎng)基上的形態(tài)圖5基于EF-1α基因和ITS序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹

田間采集的病果樣品呈現(xiàn)白色，或者出現(xiàn)枯黃、萎蔫的癥狀，同時(shí)果柄部位干枯（圖6-A）。人工接種結(jié)果表明，待測菌株接種桑椹發(fā)病率為100%，接種5d后桑椹整個(gè)或部分面積由紅色變?yōu)榘咨瑫r(shí)周圍未被接種的桑椹也被感染發(fā)�。▓D6-B）。7d后，染病的白色桑果變?yōu)榘迭S色，果柄部位也發(fā)生....

本文編號(hào)：4008805