本文利用TaqMan探針實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)檢測(cè)技術(shù)對(duì)梅州地區(qū)疑似柑橘黃龍病樣品進(jìn)行檢測(cè),并與常規(guī)PCR檢測(cè)進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果表明,實(shí)時(shí)熒光定量PCR用于檢測(cè)柑橘黃龍病菌結(jié)果快速、準(zhǔn)確、可靠且無(wú)污染。采用2種方法對(duì)梯度稀釋的陽(yáng)性樣本進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn),實(shí)時(shí)熒光定量PCR的靈敏度較常規(guī)PCR更高,能夠檢出樣品中痕量的病原菌。本研究在梅州地區(qū)建立了以實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法進(jìn)行柑橘黃龍病疑似植株的檢測(cè),可以為梅州地區(qū)提供更準(zhǔn)確、更靈敏、快速的黃龍病檢測(cè)技術(shù)。

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【部分圖文】：

圖1柑橘黃龍病PCR凝膠電泳圖譜

給常規(guī)PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，9個(gè)樣品在1167bp處擴(kuò)增出特異性電泳條帶，陰性對(duì)照、空白對(duì)照在此位置無(wú)特異性擴(kuò)增條帶；實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，12個(gè)樣品的CT值≤35，即為黃龍病陽(yáng)性，陰性對(duì)照、空白對(duì)照無(wú)CT值。對(duì)比檢測(cè)結(jié)果，只要實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)為陽(yáng)性的樣品，常規(guī)PCR全....

圖2柑橘黃龍病實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果

圖1柑橘黃龍病PCR凝膠電泳圖譜2.3實(shí)時(shí)熒光定量PCR與常規(guī)PCR靈敏度對(duì)比

圖3實(shí)時(shí)熒光定量PCR與常規(guī)PCR的檢測(cè)靈敏度對(duì)比

本實(shí)驗(yàn)室在梅州地區(qū)建立了柑橘黃龍病PCR快速檢測(cè)技術(shù)[6]，在檢測(cè)篩查過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，同樣的植株，半年前檢測(cè)結(jié)果為陰性，在半年后的檢測(cè)中呈陽(yáng)性，顯示常規(guī)PCR檢測(cè)技術(shù)對(duì)黃龍病感染初期的檢出率較低。因此，本研究建立了以實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法進(jìn)行柑橘黃龍病疑似植株的檢測(cè)，可以為梅州地區(qū)提....

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