土傳青枯病是最嚴(yán)重的細(xì)菌性病害之一,專性侵染細(xì)菌的病毒——噬菌體在青枯病的防控中發(fā)揮重要作用。前期研究發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)的青枯菌在遺傳型和生理型上呈現(xiàn)高度多態(tài)性,但噬菌體宿主專一性強(qiáng),對(duì)來(lái)自同一地方的青枯菌的侵染能力較強(qiáng)。擬針對(duì)特定地區(qū)的病原青枯菌,從原位篩選高效穩(wěn)定的噬菌體,并探究其抑菌的穩(wěn)定性。以分離自南京麒麟大棚的一株病原青枯菌為宿主,從同一地區(qū)病土中篩選其專性噬菌體;并從中篩選出一株抑菌能力最強(qiáng)的噬菌體NJ-P3,室內(nèi)檢測(cè)了其基礎(chǔ)生物學(xué)特性、穩(wěn)定性和最佳保存方式,盆栽試驗(yàn)探究其最佳應(yīng)用方式。噬菌體NJ-P3屬于裂解性短尾噬菌體,基因組中含有特殊的蛋白可能與其強(qiáng)裂解性相關(guān);抗逆性強(qiáng),能夠耐受50℃高溫、4-10的pH、紫外線80 min的照射;在SM緩沖液中低溫保存效果穩(wěn)定,常溫條件可短期保存;盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明與傳統(tǒng)灌根法相比,莖部注射方式接種噬菌體NJ-P3應(yīng)用效果更好,對(duì)土傳青枯病的防控效果提高了37.5%。從原位篩選到一株高效穩(wěn)定的青枯菌專性噬菌體,系統(tǒng)地研究了其最佳保存條件和應(yīng)用方式,為建立青枯菌噬菌體資源庫(kù)防控土傳病害的廣泛應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ)。

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圖2噬菌體NJ-P3頭尾連接蛋白發(fā)育樹(shù)(A)及基因圖譜(B)

如圖2-B所示的基因組信息表明噬菌體NJ-P3基因大小為42528bp。經(jīng)預(yù)測(cè)噬菌體NJ-P3含有51個(gè)基因,總長(zhǎng)度為38454bp,覆蓋了基因組的90.42%,平均基因長(zhǎng)度為754bp,基因的GC百分含量為62.86%。噬菌體NJ-P3在CAZY數(shù)據(jù)庫(kù)中注釋到了裂解酶....

圖3噬菌體NJ-P3的穩(wěn)定性(熱穩(wěn)定性A、酸堿耐受性B、紫外線耐受性C)及不同溫度和溶劑對(duì)噬菌體保存效果的影響(D)

3討論本研究從土傳青枯病發(fā)病嚴(yán)重的南京麒麟蔬菜大棚中原位分離青枯菌專性噬菌體,并系統(tǒng)研究了其中一株抑菌能力強(qiáng)的噬菌體NJ-P3的穩(wěn)定性、保存及應(yīng)用效果。噬菌體NJ-P3在青枯菌平板上形成直徑為1-2mm的清晰透明噬菌斑,透射電鏡觀察結(jié)果表明該噬菌體頭部呈正二十面體,屬于有尾噬....

圖4盆栽試驗(yàn)中不同接種方式對(duì)噬菌體防控番茄土傳青枯菌效果的影響

本研究從土傳青枯病發(fā)病嚴(yán)重的南京麒麟蔬菜大棚中原位分離青枯菌專性噬菌體,并系統(tǒng)研究了其中一株抑菌能力強(qiáng)的噬菌體NJ-P3的穩(wěn)定性、保存及應(yīng)用效果。噬菌體NJ-P3在青枯菌平板上形成直徑為1-2mm的清晰透明噬菌斑,透射電鏡觀察結(jié)果表明該噬菌體頭部呈正二十面體,屬于有尾噬菌體目,....

圖1番茄根際土壤中分離篩選的青枯菌專性噬菌體NJ-P3的噬菌斑(A)及電鏡形態(tài)(B)

表1噬菌體的篩選編號(hào)分離地點(diǎn)噬菌斑直徑/mm抑菌率抑菌時(shí)間/h1南京1.70.376362南京1.50.789363南京1.80.852417南京1.50.487368南京1.30.822362.2青枯菌專性噬菌體的....

本文編號(hào)：3900777