由膠孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起的柱花草炭疽病是熱帶和亞熱帶牧草豆科植物柱花草可持續(xù)生產(chǎn)的嚴重制約因素,對廣泛使用殺菌劑以維持飼料高質(zhì)量的擔憂導致要求采用更安全的控制替代品。為獲得對柱花草炭疽病菌有良好拮抗效果的生防菌株,經(jīng)組織分離法從堅尼草葉片上分離獲得一株對柱花草炭疽菌有拮抗作用的JNC2菌株。以該菌株基因組DNA為模板,通過形態(tài)學觀察、生理生化特性、16S rDNA和gyrA基因序列分析,鑒定JNC2菌株為Bacillus amyloliquefaciens。對峙培養(yǎng)結果表明,經(jīng)JNC2菌株處理后病原菌的菌絲生長呈現(xiàn)受抑制的現(xiàn)象,菌絲中的原生質(zhì)凝集,腫脹膨大且出現(xiàn)不同程度的縊縮,凸起變形。利用特異性引物對JNC2基因組脂肽類抗生素合成有關基因進行檢測,從該菌的基因組DNA中擴增獲得bacA、ituA、ituD、Ipa-14、fenD、bmyB、mycB、sfp、Hag和tasA等脂肽類抗生素合成酶基因。離體葉片試驗結果表明JNC2菌株能夠明顯抑制柱花草炭疽病病菌的擴展,對柱花草葉斑病的防效達到66%以上。本研究為柱花草炭疽病的生物防... 

【文章來源】：基因組學與應用生物學. 2020,39(12)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

JNC2菌株對柱花草炭疽病菌的抑菌作用

進一步用細菌分類中常用的gyr A基因?qū)NC2進行分析，以JNC2的基因組DNA為模板，擴增gyr A基因，電泳檢測gyr A基因目的片段與預計片段大小相吻合。gyr A基因序列經(jīng)BLAST軟件同源性比較結果表明，JNC2菌株與已報道的B.amyloliquefaciens strain 41B-1 DNA gyrase subunit A (gyr A) gene KF60-1552.1,B.amyloliquefaciens strain 9121 gyrase subunit A (gyr A) gene KC011344.1,B.amyloliquefaciens strain PG12 DNA gyrase subunit A (gyr A) gene KC797584.1相似度99%以上。通過Mega 6.0軟件構建系統(tǒng)發(fā)育樹結果表明，JNC2菌株與B.amyloliquefaciens親緣關系最近(圖5)，結合形態(tài)特征、生理生化特性和16S r DNA基因序列結果，確定JNC2為解淀粉芽孢桿菌B.amyloliquefaciens。圖3 JNC2菌株革蘭氏染色(100X)與菌落形態(tài)

基于16s r DNA JNC2的系統(tǒng)發(fā)育樹

【參考文獻】：
期刊論文
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