香蕉內(nèi)生細(xì)菌G9R-3分離鑒定及其拮抗香蕉枯萎病菌活性評價
發(fā)布時間：2022-01-09 17:43
【目的】分離、鑒定香蕉內(nèi)生細(xì)菌G9R-3并評價其拮抗香蕉枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4,Foc4）活性,為開發(fā)利用該菌株防控香蕉枯萎�。‵usarium wilt）提供理論依據(jù)�！痉椒ā客ㄟ^形態(tài)學(xué)觀察、生理生化特性分析及分子檢測鑒定從桂蕉9號健康香蕉植株根部分離的一株香蕉內(nèi)生細(xì)菌G9R-3菌株。分別運用平板對峙法、生長速率法、平板對扣法及杯苗灌根接種法,分析菌株G9R-3拮抗香蕉枯萎病菌的活性并綜合評價其防效。【結(jié)果】菌株G9R-3鑒定為解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）,對香蕉枯萎病菌平板菌落的抑制率為83.05%;發(fā)酵上清液對Foc4菌絲生長抑制率為42.35%;揮發(fā)性氣體對Foc4菌絲生長抑制率為58.64%。對盆栽香蕉枯萎病的防控結(jié)果表明,菌株G9R-3對香蕉枯萎病菌具有拮抗活性,其中接種桂蕉1號的相對防效為65.00%,接種紅研2號的相對防效為29.91%,接種萬鐘4號的相對防效為16.11%,接種桂蕉9號的相對防效為48.83%�！窘Y(jié)論】G9R-3是一株對香蕉枯萎病菌具有拮抗活性的內(nèi)...
【文章來源】：西南農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2020,33(07)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】：6 頁
【部分圖文】：
基于gyrB基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹
從桂蕉9號植株根部分離得到一株內(nèi)生細(xì)菌,通過平板對峙試驗篩選得到具有較強(qiáng)拮抗香蕉枯萎病菌Foc4活性的菌株G9R-3;菌株經(jīng)革蘭氏染色呈陽性,桿狀,產(chǎn)芽孢,在NA培養(yǎng)基上菌落呈圓形,邊緣不規(guī)則,表面光滑濕潤(圖1),呈淡黃色。其生理生化特性檢測結(jié)果見表1。PCR擴(kuò)增菌株G9R-3的16S rDNA序列全長為1427 bp,在NCBI上進(jìn)行BLAST比對,結(jié)果與B. amyloliquefaciens 、B.velezensis和B.subtilis序列相似度均在99 %以上(圖2)。選取相應(yīng)菌種模式菌株序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹,菌株G9R-3與B.velezensis SQR9、B.amyloliquefaciens FZB42聚在同一分支,親緣關(guān)系較近。為進(jìn)一步確認(rèn)其親緣關(guān)系,采用PCR擴(kuò)增菌株G9R-3 gyrB基因序列與相應(yīng)菌種模式菌株序列進(jìn)行BLAST比對,結(jié)果(圖3)表明,該菌株基因序列全長為1265 bp,與B.amyloliquefaciens FZB42相似度最高,達(dá)99 %,聚于同一分支,親緣關(guān)系更近。綜合以上序列比對結(jié)果,將菌株G9R-3鑒定為解淀粉芽孢桿菌。表1 菌株G9R-3生理生化特性Table 1 Physiological and biochemical characteristics of strain G9R-3 鑒別特征Characteristics 菌株G9R-3Strain G9R-3 鑒別特征Characteristics 菌株G9R-3Strain G9R-3 革蘭氏染色 + 明膠液化 + 氧化酶 + 酯酶 - 接觸酶 + 牛奶水解 + 甲基紅(M.R) - 精氨酸雙水解酶 - V-P測定 + 脲酶 + 3-酮基乳糖 - pH<5.6生長 + 纖維素水解 - 5 %NaCl生長 + 七葉靈水解 + 4 ℃生長 - 淀粉水解 - 50 ℃生長 + 糖醇類發(fā)酵 + 注:+表示陽性反應(yīng);-表示陰性反應(yīng)。Note:+ meant positive reaction;-meant negative reaction.
表1 菌株G9R-3生理生化特性Table 1 Physiological and biochemical characteristics of strain G9R-3 鑒別特征Characteristics 菌株G9R-3Strain G9R-3 鑒別特征Characteristics 菌株G9R-3Strain G9R-3 革蘭氏染色 + 明膠液化 + 氧化酶 + 酯酶 - 接觸酶 + 牛奶水解 + 甲基紅(M.R) - 精氨酸雙水解酶 - V-P測定 + 脲酶 + 3-酮基乳糖 - pH<5.6生長 + 纖維素水解 - 5 %NaCl生長 + 七葉靈水解 + 4 ℃生長 - 淀粉水解 - 50 ℃生長 + 糖醇類發(fā)酵 + 注:+表示陽性反應(yīng);-表示陰性反應(yīng)。Note:+ meant positive reaction;-meant negative reaction.圖3 基于gyrB基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹
本文編號：3579163
【文章來源】：西南農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2020,33(07)北大核心CSCD
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基于gyrB基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹
從桂蕉9號植株根部分離得到一株內(nèi)生細(xì)菌,通過平板對峙試驗篩選得到具有較強(qiáng)拮抗香蕉枯萎病菌Foc4活性的菌株G9R-3;菌株經(jīng)革蘭氏染色呈陽性,桿狀,產(chǎn)芽孢,在NA培養(yǎng)基上菌落呈圓形,邊緣不規(guī)則,表面光滑濕潤(圖1),呈淡黃色。其生理生化特性檢測結(jié)果見表1。PCR擴(kuò)增菌株G9R-3的16S rDNA序列全長為1427 bp,在NCBI上進(jìn)行BLAST比對,結(jié)果與B. amyloliquefaciens 、B.velezensis和B.subtilis序列相似度均在99 %以上(圖2)。選取相應(yīng)菌種模式菌株序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹,菌株G9R-3與B.velezensis SQR9、B.amyloliquefaciens FZB42聚在同一分支,親緣關(guān)系較近。為進(jìn)一步確認(rèn)其親緣關(guān)系,采用PCR擴(kuò)增菌株G9R-3 gyrB基因序列與相應(yīng)菌種模式菌株序列進(jìn)行BLAST比對,結(jié)果(圖3)表明,該菌株基因序列全長為1265 bp,與B.amyloliquefaciens FZB42相似度最高,達(dá)99 %,聚于同一分支,親緣關(guān)系更近。綜合以上序列比對結(jié)果,將菌株G9R-3鑒定為解淀粉芽孢桿菌。表1 菌株G9R-3生理生化特性Table 1 Physiological and biochemical characteristics of strain G9R-3 鑒別特征Characteristics 菌株G9R-3Strain G9R-3 鑒別特征Characteristics 菌株G9R-3Strain G9R-3 革蘭氏染色 + 明膠液化 + 氧化酶 + 酯酶 - 接觸酶 + 牛奶水解 + 甲基紅(M.R) - 精氨酸雙水解酶 - V-P測定 + 脲酶 + 3-酮基乳糖 - pH<5.6生長 + 纖維素水解 - 5 %NaCl生長 + 七葉靈水解 + 4 ℃生長 - 淀粉水解 - 50 ℃生長 + 糖醇類發(fā)酵 + 注:+表示陽性反應(yīng);-表示陰性反應(yīng)。Note:+ meant positive reaction;-meant negative reaction.
表1 菌株G9R-3生理生化特性Table 1 Physiological and biochemical characteristics of strain G9R-3 鑒別特征Characteristics 菌株G9R-3Strain G9R-3 鑒別特征Characteristics 菌株G9R-3Strain G9R-3 革蘭氏染色 + 明膠液化 + 氧化酶 + 酯酶 - 接觸酶 + 牛奶水解 + 甲基紅(M.R) - 精氨酸雙水解酶 - V-P測定 + 脲酶 + 3-酮基乳糖 - pH<5.6生長 + 纖維素水解 - 5 %NaCl生長 + 七葉靈水解 + 4 ℃生長 - 淀粉水解 - 50 ℃生長 + 糖醇類發(fā)酵 + 注:+表示陽性反應(yīng);-表示陰性反應(yīng)。Note:+ meant positive reaction;-meant negative reaction.圖3 基于gyrB基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹
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