為了明確庫爾勒香梨黑斑病的病原種類,采用常規(guī)組織分離法對病果進行病原菌的分離與純化;通過無傷和有傷接種對分離純化的菌株進行致病力測定;選取P8和P21作為代表菌株,通過觀察形態(tài)學(xué)特征、構(gòu)建多基因聯(lián)合系統(tǒng)發(fā)育樹,對病原菌種類進行鑒定。菌株分離結(jié)果顯示,從病組織中分離獲得36株病原菌,其中鏈格孢34株,占分離菌株總數(shù)的94.4%。有傷接種3 d和無傷接種5～7 d均可在庫爾勒香梨的接種部位觀察到與田間相似的黑褐色壞死病斑,表明從庫爾勒香梨上分離獲得的鏈格孢是梨黑斑病的致病菌。在P8菌株形態(tài)學(xué)鑒定的基礎(chǔ)上,基于過敏原基因（Alt-a1）和翻譯延長因子基因（tef1）構(gòu)建多基因聯(lián)合系統(tǒng)發(fā)育樹,將P8菌株的種類鑒定為交鏈孢（Alternaria alternata）;在P21菌株形態(tài)學(xué)鑒定的基礎(chǔ)上,基于過敏原基因（Alt-a1）和鈣調(diào)蛋白基因（Cal）構(gòu)建的多基因聯(lián)合系統(tǒng)發(fā)育樹,將P21菌株鑒定為細(xì)極鏈格孢（Alternaria tenuissima）。綜上所述,交鏈孢和細(xì)極鏈格孢是導(dǎo)致庫爾勒香梨黑斑病的病原。 

【文章來源】：石河子大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2020,38(05)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

庫爾勒香梨黑斑病的癥狀及病原菌培養(yǎng)性狀

從上述致病的鏈格孢中選取P8和P21菌株作為代表菌株進行形態(tài)學(xué)鑒定。如圖2所示，P8菌株的分生孢子梗為褐色，具分枝。分生孢子短鏈生，孢子鏈一般由10個以內(nèi)孢子構(gòu)成;孢子鏈的中間孢子與頂端孢子基部以合軸式延伸產(chǎn)孢，形成樹狀短分支的分生孢子鏈。分生孢子為倒棍棒形、卵形或長橢圓形;淡褐色至褐色，表面光滑或具微刺;具2～5個橫膈膜，0～3個縱隔膜;大小為(6.0～12.5)μm×(11.2～34.5)μm，平均大小為9.3μm×20.3μm;無喙或具短喙，部分喙可轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)孢假喙，喙及假喙長0～17.7μm。根據(jù)這些形態(tài)學(xué)特征，初步將P8菌株的種類鑒定為交鏈孢(Alternariaalternata)。如圖3所示，P21菌株的分生孢子梗淡褐色，偶分枝。分生孢子鏈生，一般由10個以上孢子構(gòu)成;因多數(shù)孢子只在假喙頂端次生產(chǎn)孢，所以分生孢子長鏈多不分枝。分生孢子倒棍棒形或倒梨形，淡褐色至中褐色，表面光滑或具微刺;成熟分生孢子具4～7個橫隔膜，0～2個縱隔膜，孢子中部有2～3個主橫隔膜，明顯較粗，略隘縮;大小為(8.6～16.2)μm×(15.9～41.2)μm，平均值為12.7μm×25.9μm，喙及假喙柱狀，長0～44.1μm。根據(jù)這些形態(tài)學(xué)特征，初步將P21菌株的種類鑒定為細(xì)極鏈格孢(Alternaria tenuissima)。

如圖3所示，P21菌株的分生孢子梗淡褐色，偶分枝。分生孢子鏈生，一般由10個以上孢子構(gòu)成;因多數(shù)孢子只在假喙頂端次生產(chǎn)孢，所以分生孢子長鏈多不分枝。分生孢子倒棍棒形或倒梨形，淡褐色至中褐色，表面光滑或具微刺;成熟分生孢子具4～7個橫隔膜，0～2個縱隔膜，孢子中部有2～3個主橫隔膜，明顯較粗，略隘縮;大小為(8.6～16.2)μm×(15.9～41.2)μm，平均值為12.7μm×25.9μm，喙及假喙柱狀，長0～44.1μm。根據(jù)這些形態(tài)學(xué)特征，初步將P21菌株的種類鑒定為細(xì)極鏈格孢(Alternaria tenuissima)。2.3 病原菌的分子生物學(xué)鑒定

【參考文獻】：
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