【目的】明確近年在福建砂梨產(chǎn)區(qū)新發(fā)生的梨急性花枯病的病原菌種類。【方法】從產(chǎn)區(qū)采集顯現(xiàn)急性花枯癥狀的‘翠冠’梨病樣品進(jìn)行組織分離,并利用形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)相結(jié)合的方法對獲得的菌株進(jìn)行種類鑒定和致病性驗(yàn)證。【結(jié)果】通過組織分離和純化,并根據(jù)其菌落形態(tài)特征從福建砂梨急性花枯病樣品中獲得31個(gè)刺盤孢屬（Colletotrichum）菌株。選取其中的14個(gè)代表菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察和多基因（ITS、ACT、TUB、CHS-1及GAPDH）系統(tǒng)發(fā)育分析的結(jié)果顯示,它們均為松針刺盤孢（C. fioriniae）。在一周花齡的砂梨（品種‘豐水梨’）、西洋梨（品種‘三季梨’）和秋子梨（品種‘南果梨’）的離體花序上噴霧接種代表菌株（CFZH1、CFZH6、CFZH15）分生孢子懸浮液的結(jié)果顯示,均產(chǎn)生有急性花枯癥狀,平均發(fā)病率分別95.8%、63.9%和81.3%�！窘Y(jié)論】福建砂梨產(chǎn)區(qū)導(dǎo)致梨急性花枯病的病原菌為松針刺盤孢（C. fioriniae）。本研究是福建砂梨產(chǎn)區(qū)松針刺盤孢引起梨花枯死的首次報(bào)道。 

【文章來源】：果樹學(xué)報(bào). 2020,37(10)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

砂梨急性花枯病的田間癥狀表現(xiàn)

對從病花序樣品中分離獲得的31個(gè)刺盤孢(Colletotrichum）菌株中的14個(gè)菌株，提取基因組DNA，進(jìn)行ITS、ACT、GAPDH、TUB2和CHS-1序列的PCR擴(kuò)增，得到大小為579～583 bp、238～247 bp、250～256 bp、740～760 bp和275～291 bp的特異性片段。根據(jù)在福建建寧從砂梨品種‘翠冠’上采集的14個(gè)菌株各5個(gè)基因的測序結(jié)果（表2），在Gen Bank(http://www.ncbi.nlm.nih.gov）數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行Blast比對后，選取17個(gè)刺盤孢屬真菌的相應(yīng)基因區(qū)域序列作為參考序列，其中以C.orchidophilum CBS 632.80作為外群，進(jìn)行多基因系統(tǒng)發(fā)育分析。結(jié)果顯示，本研究中的14個(gè)菌株與C.fioriniae聚在同一分支（圖3）。由此，可進(jìn)一步證實(shí)本研究所分離獲得的菌株均為松針刺盤孢（C.fioriniae）。圖3 本研究獲得的代表菌株與參考菌株的多基因（ACT、TUB2、CHS-1、GAPDH和ITS）序列采用最大似然法構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹

根據(jù)報(bào)道，松針刺盤孢（C.fioriniae）的不同菌株可聚集成兩個(gè)亞分支（subcladeⅠ和subcladeⅡ），二者的序列之間存在差異[17]。本研究從顯現(xiàn)急性花枯癥狀的花序中所分離獲得的松針刺盤孢菌株均聚集在subcladeⅡ，而本實(shí)驗(yàn)室從顯現(xiàn)灰色病斑癥狀的梨葉中分離獲得的松針刺盤孢菌株，則聚集在subcladeⅠ和subcladeⅡ[12]。從本研究可看出，由松針刺盤孢（C.fioriniae）引起的砂梨急性花枯，其癥狀表現(xiàn)與由梨火疫病菌（E.amylovora）和丁香假單胞桿菌丁香致病型（P.syringae pv.syringae）兩種細(xì)菌引起的梨花枯死存在明顯的差異，后兩種在濕度較高時(shí)病斑處會溢出菌膿，鏡檢均可見噴菌現(xiàn)象，而松針刺盤孢（C.fioriniae）引起的砂梨急性花枯在田間沒有這種現(xiàn)象，但其病情變化又與這兩種細(xì)菌病害十分相似，在氣溫和濕度適宜情況下均可在較短的時(shí)間內(nèi)造成梨花迅速枯死。因此，對松針刺盤孢的侵染菌源、途經(jīng)、寄主范圍及其致病性分化也有待深入研究。本研究結(jié)果顯示，在溫室接種條件下，松針刺盤孢使砂梨、秋子梨和西洋梨均可產(chǎn)生急性花枯癥狀，這就暗示在我國秋子梨和西洋梨產(chǎn)區(qū)也存在與砂梨產(chǎn)區(qū)相同的由松針刺盤孢引起急性花枯的可能，因此，進(jìn)一步研究明確松針刺盤孢在福建省不同梨產(chǎn)區(qū)的地理分布及致病力分化狀況，可為梨產(chǎn)區(qū)有效防治急性花枯病提供科學(xué)依據(jù)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]梨樹黑脛病研究[J]. 梁志宏,李　生,沈崇堯.  中國果樹. 1995(02)



本文編號：3494171