【目的】基于香蕉細菌性枯萎病病原（Ralstonia solanacearum）2號生理小種的特異保守引物和LAMP技術建立一種實時熒光定性檢測方法,解決常規(guī)PCR定性檢測特異性低、靈敏度低、耗時長等問題,實現(xiàn)在1 h內能進行準確高效的定性檢測,為加強該病害防控檢測和檢疫工作提供技術支持�！痉椒ā看_定被測基因靶序列,利用Primer軟件設計兩對內外引物。由兩對引物、具有鏈置換特性的DNA聚合酶、模板DNA、甜菜堿、Mg₂SO₄、反應緩沖液、熒光染料等組成LAMP反應體系,采用不必在反應完開管蓋檢測的實時熒光LAMP方法,針對該方法對于樣品DNA定性檢測的靈敏度、特異性及可重復性進行試驗�！窘Y果】設計的引物能順利擴增目標基因,實時熒光LAMP檢測體系對于香蕉細菌性枯萎病病原生理2號小種有良好的靈敏度、特異性,該方法可重復性強,靈敏度比普通PCR高10倍以上�！窘Y論】香蕉細菌性枯萎病菌熒光LAMP檢測體系檢測特異性強、靈敏度高、耗時短、不易污染,效果較好。 

【文章來源】：廣東農(nóng)業(yè)科學. 2020,47(05)

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

實時熒光LAMP對RS2及其近似種特異性檢測結果

重復性實驗結果(圖3)表明,除陰性對照與空白對照外,樣品組4個重復實驗體系的檢測結果都能出現(xiàn)“S”型曲線,說明本實驗所建立的方法對RS2的DNA檢測具有較高的重復性,結果穩(wěn)定性好,實驗方法可靠。圖3 實時熒光LAMP對RS2重復性檢測結果

實時熒光LAMP對RS2重復性檢測結果

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[3]草莓主要抗藥性病害的環(huán)介導等溫擴增（LAMP）檢測[D]. 胡小然.浙江農(nóng)林大學 2018
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本文編號：3471129