北五味子是東北地區(qū)重要的地道藥材之一。五味子人工園和人工撫育半野生園受到周邊地塊噴施除草劑漂移造成的危害已日趨嚴(yán)重。其中,影響最大的兩種農(nóng)藥為大豆田噴施廣滅靈封閉藥、玉米田噴施2,4-D丁酯農(nóng)藥。本研究分別以兩種農(nóng)藥為唯一碳源,培養(yǎng)及篩選這兩種農(nóng)藥的高效降解菌株,并分析菌的生物學(xué)特點(diǎn)及降解酶分布特點(diǎn)。 1.分別從長期遭受廣滅靈、2,4-D丁酯農(nóng)藥漂移危害的土壤中分離純化出對相應(yīng)農(nóng)藥具有降解作用的細(xì)菌,根據(jù)土壤中農(nóng)藥濃度和篩選時(shí)以相應(yīng)農(nóng)藥為唯一碳源時(shí)農(nóng)藥濃度的不同,分離、篩選出廣滅靈、2,4-D丁酯降解菌株各九株�；谏餃y定法測定農(nóng)藥含量,對各菌株的降解率進(jìn)行了分析,其中廣滅靈高效降解菌株G8的降解率為55.6%,2,4-D丁酯高效降解菌株D8的降解率為53.2%。多種菌混合可明顯促進(jìn)廣滅靈或2,4-D丁酯降解。 2.對菌株G8、D8進(jìn)行了常規(guī)形態(tài)學(xué)觀察及電鏡觀察。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步利用CTAB法提取降解菌株的總DNA,利用細(xì)菌16SrDNA通用引物擴(kuò)增出了細(xì)菌核糖體區(qū)特異片段,并進(jìn)行了克隆測序。經(jīng)序列分析,結(jié)合形態(tài)學(xué)特點(diǎn),鑒定廣滅靈降解菌菌株G8為甲基菌屬細(xì)菌,2,4-D丁酯降解菌菌...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
1 緒論
    1.1 主要漂移除草劑的研究概況
        1.1.1 異惡草酮的研究概況
        1.1.2 2,4-D丁酯的研究概況
    1.2 漂移除草劑的生物測定法
    1.3 變性梯度凝膠電泳(DGGE)技術(shù)
    1.4 本研究的意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與設(shè)備
        2.1.1 取材
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)所需的藥品及試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 農(nóng)藥降解菌的篩選、富集及純化
        2.2.2 除草劑廣滅靈、2,4-D丁酯降解菌降解性質(zhì)的研究
        2.2.3 用丙酮法測五味子植株葉綠素含量
        2.2.4 五味子植株噴灑漂移除草劑前后葉綠素的測定比較
        2.2.5 改進(jìn)CTAB法提取細(xì)菌總DNA及其檢測
        2.2.6 PCR擴(kuò)增及檢測
        2.2.7 PCR特異DNA片段的回收及檢測
        2.2.8 土壤細(xì)菌總DNA的提取
        2.2.9 土壤細(xì)菌總RNA的PCR擴(kuò)增
        2.2.10 漂移除草劑廣滅靈、2,4-D丁酯高效降解菌適宜條件的研究
        2.2.11 廣滅靈、2,4-D丁酯降解菌酶的性質(zhì)研究
3 結(jié)果與分析
    3.1 廣滅靈、2,4-D丁酯抗性菌株的形態(tài)特征觀察
    3.2 廣滅靈、2,4-D丁酯抗性菌株降解性質(zhì)的研究
        3.2.1 廣滅靈農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        3.2.2 2,4-D丁酯標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        3.2.3 廣滅靈抗性菌株降解率
        3.2.4 2,4-D丁酯抗性菌株降解率
        3.2.5 混合菌株降解率測定
    3.3 五味了植株葉綠素的測定
    3.4 CTAB法提取細(xì)菌DNA
    3.5 PCR擴(kuò)增結(jié)果
    3.6 降解細(xì)菌DNA測序結(jié)果分析
    3.7 廣滅靈、2,4-D丁酯高效降解菌適宜條件
        3.7.1 pH對廣滅靈、2,4-D丁酯高效降解菌生長的影響
        3.7.2 溫度對廣滅靈、2,4-D丁酯高效降解菌生長的影響
        3.7.3 轉(zhuǎn)速對廣滅靈、2,4-D丁酯高效降解菌生長的影響
        3.7.4 通氣量對廣滅靈、2,4-D丁酯高效降解菌生長的影響
        3.7.5 農(nóng)藥濃度對廣滅靈、2,4-D丁酯高效降解菌生長的影響
    3.8 土壤菌群總DNA提取及擴(kuò)增
    3.9 降解菌酶分析
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號：3928001