深圳市大沙河中氨氧化古細菌的種群分布研究
發(fā)布時間:2023-12-13 19:22
隨著城市化進程的高速發(fā)展,城市河流污染問題也日趨嚴重,氨氮作為城市河流中的主要污染物之一,其能否被有效去除是影響水質(zhì)情況的一項重要指標。生物脫氮的關(guān)鍵步驟為氨氧化步驟,長期研究表明,參與這一過程的主要微生物為氨氧化細菌(AOB),但是近些年來的研究發(fā)現(xiàn)另外一種微生物也具有氨氧化功能,被稱作氨氧化古菌(AOA)。目前對它的研究主要集中于海洋、土壤,以及污水處理廠中,城市污染河流的研究則非常缺乏。為了進一步認識AOA在城市輕度污染河流中的種群分布規(guī)律,揭示水質(zhì)因子對它的調(diào)控作用以期將其應(yīng)用于河流水質(zhì)凈化,本課題對一個典型城市輕度污染河流——深圳市大沙河中AOA的種群分布進行了研究。 本課題運用熒光定量PCR技術(shù)和FISH技術(shù)對深圳市大沙河中AOA及AOB的數(shù)量進行了定量研究。在所選取的5個典型水體環(huán)境中,AOA的數(shù)量均高于AOB的數(shù)量,并且在大沙河公園處二者比值達到最大值,對這一斷面進行研究也得出了AOA高于AOB的結(jié)論。對各典型水體環(huán)境的水質(zhì)指標及菌群數(shù)量利用統(tǒng)計軟件進行分析得知,大沙河中AOA數(shù)量的主要影響因素為氨氮、總氮和總有機碳。 利用克隆文庫技術(shù),對大沙河各個典型水體環(huán)境中AOA...
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
第1章 緒論
1.1 課題背景
1.1.1 城市河流污染狀況
1.1.2 河流水體自凈中的氨氧化作用
1.1.3 氨氧化菌群的分類及其研究機制
1.2 氨氧化古細菌的研究進展
1.2.1 功能基因及系統(tǒng)發(fā)育研究進展
1.2.2 不同生態(tài)系統(tǒng)中氨氧化古細菌的分布
1.2.3 影響氨氧化古細菌種群分布的影響因子
1.3 氨氧化古細菌的研究方法現(xiàn)狀
1.3.1 PCR 技術(shù)
1.3.2 克隆文庫構(gòu)建技術(shù)
1.3.3 熒光定量 PCR 技術(shù)
1.3.4 梯度凝膠電泳技術(shù)
1.3.5 熒光原位雜交技術(shù)
1.4 課題研究目的及內(nèi)容
1.4.1 課題來源及研究目的
1.4.2 本課題的研究內(nèi)容
第2章 實驗材料與方法
2.1 實驗裝置
2.1.1 正交實驗裝置
2.1.2 擴大化實驗裝置
2.2 實驗材料
2.2.1 現(xiàn)場樣品采集
2.2.2 影響因子考察用水
2.2.3 主要分子生物學(xué)試劑
2.2.4 實驗儀器及設(shè)備
2.3 實驗方法
2.3.1 DNA 提取
2.3.2 目的基因的 PCR 擴增
2.3.3 熒光定量 PCR
2.3.4 克隆文庫的構(gòu)建
2.3.5 熒光原位雜交
2.3.6 水質(zhì)指標測定方法
2.3.7 數(shù)據(jù)分析
第3章 大沙河中 AOA 的數(shù)量分布規(guī)律研究
3.1 大沙河中 AOA 數(shù)量檢測方法的建立
3.1.1 熒光定量 PCR 引物的選取
3.1.2 標準曲線的繪制
3.2 大沙河中 AOA 的數(shù)量分布規(guī)律
3.2.1 水體環(huán)境的水質(zhì)理化性質(zhì)
3.2.2 水體環(huán)境 AOA 的菌群數(shù)量
3.3 大沙河公園斷面 AOA 的數(shù)量分布規(guī)律
3.3.1 斷面水質(zhì)理化性質(zhì)
3.3.2 斷面 AOA 的菌群數(shù)量
3.3.3 FISH 技術(shù)驗證斷面菌群數(shù)量
3.4 大沙河中 AOA 的數(shù)量分布影響因素
3.5 本章小結(jié)
第4章 大沙河中 AOA 的種類分布規(guī)律研究
4.1 大沙河 AMOA 基因文庫的構(gòu)建與分析
4.1.1 PCR 引物的選取
4.1.2 PCR 反應(yīng)條件的優(yōu)化
4.1.3 克隆基因文庫的構(gòu)建與分析
4.2 大沙河中 AOA 的種類分布規(guī)律
4.2.1 AOA 的群落結(jié)構(gòu)
4.2.2 AOA 的系統(tǒng)發(fā)育分析
4.2.3 大沙河中 AOA 的種類分布影響因素
4.3 本章小結(jié)
第5章 大沙河中 AOA 的影響因素研究
5.1 AOA 數(shù)量的影響因素研究
5.1.1 正交表的設(shè)計
5.1.2 影響因素分析
5.2 AOA 生長最優(yōu)條件的確定
5.3 擴大化穩(wěn)定運行研究
5.3.1 最優(yōu)條件穩(wěn)定運行 AOA 數(shù)量變化
5.3.2 最優(yōu)條件穩(wěn)定運行氨氮濃度變化
5.4 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
致謝
本文編號:3873814
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
第1章 緒論
1.1 課題背景
1.1.1 城市河流污染狀況
1.1.2 河流水體自凈中的氨氧化作用
1.1.3 氨氧化菌群的分類及其研究機制
1.2 氨氧化古細菌的研究進展
1.2.1 功能基因及系統(tǒng)發(fā)育研究進展
1.2.2 不同生態(tài)系統(tǒng)中氨氧化古細菌的分布
1.2.3 影響氨氧化古細菌種群分布的影響因子
1.3 氨氧化古細菌的研究方法現(xiàn)狀
1.3.1 PCR 技術(shù)
1.3.2 克隆文庫構(gòu)建技術(shù)
1.3.3 熒光定量 PCR 技術(shù)
1.3.4 梯度凝膠電泳技術(shù)
1.3.5 熒光原位雜交技術(shù)
1.4 課題研究目的及內(nèi)容
1.4.1 課題來源及研究目的
1.4.2 本課題的研究內(nèi)容
第2章 實驗材料與方法
2.1 實驗裝置
2.1.1 正交實驗裝置
2.1.2 擴大化實驗裝置
2.2 實驗材料
2.2.1 現(xiàn)場樣品采集
2.2.2 影響因子考察用水
2.2.3 主要分子生物學(xué)試劑
2.2.4 實驗儀器及設(shè)備
2.3 實驗方法
2.3.1 DNA 提取
2.3.2 目的基因的 PCR 擴增
2.3.3 熒光定量 PCR
2.3.4 克隆文庫的構(gòu)建
2.3.5 熒光原位雜交
2.3.6 水質(zhì)指標測定方法
2.3.7 數(shù)據(jù)分析
第3章 大沙河中 AOA 的數(shù)量分布規(guī)律研究
3.1 大沙河中 AOA 數(shù)量檢測方法的建立
3.1.1 熒光定量 PCR 引物的選取
3.1.2 標準曲線的繪制
3.2 大沙河中 AOA 的數(shù)量分布規(guī)律
3.2.1 水體環(huán)境的水質(zhì)理化性質(zhì)
3.2.2 水體環(huán)境 AOA 的菌群數(shù)量
3.3 大沙河公園斷面 AOA 的數(shù)量分布規(guī)律
3.3.1 斷面水質(zhì)理化性質(zhì)
3.3.2 斷面 AOA 的菌群數(shù)量
3.3.3 FISH 技術(shù)驗證斷面菌群數(shù)量
3.4 大沙河中 AOA 的數(shù)量分布影響因素
3.5 本章小結(jié)
第4章 大沙河中 AOA 的種類分布規(guī)律研究
4.1 大沙河 AMOA 基因文庫的構(gòu)建與分析
4.1.1 PCR 引物的選取
4.1.2 PCR 反應(yīng)條件的優(yōu)化
4.1.3 克隆基因文庫的構(gòu)建與分析
4.2 大沙河中 AOA 的種類分布規(guī)律
4.2.1 AOA 的群落結(jié)構(gòu)
4.2.2 AOA 的系統(tǒng)發(fā)育分析
4.2.3 大沙河中 AOA 的種類分布影響因素
4.3 本章小結(jié)
第5章 大沙河中 AOA 的影響因素研究
5.1 AOA 數(shù)量的影響因素研究
5.1.1 正交表的設(shè)計
5.1.2 影響因素分析
5.2 AOA 生長最優(yōu)條件的確定
5.3 擴大化穩(wěn)定運行研究
5.3.1 最優(yōu)條件穩(wěn)定運行 AOA 數(shù)量變化
5.3.2 最優(yōu)條件穩(wěn)定運行氨氮濃度變化
5.4 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
致謝
本文編號:3873814
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