秸稈的資源化利用已成為我國的研究熱點,而選育高效及活性穩(wěn)定的纖維素降解菌是影響纖維素物質(zhì)應(yīng)用的關(guān)鍵。 本實驗分為三部分對纖維素降解菌進行研究,包括纖維素降解菌的分離純化、單菌株的誘變育種以及突變菌株的培養(yǎng)條件優(yōu)化。 首先,纖維素降解菌的分離純化。從實驗室前期馴化的纖維素降解菌群5號菌群中分離篩選出4株具有降解纖維素能力的菌株,命名為F1、F2、F3和F4,通過染色實驗以及16SrDNA鑒定,四株菌分別是蘇云金芽孢桿菌、生淀粉糖化酶產(chǎn)生菌、糞產(chǎn)堿菌和蠟樣芽孢桿菌。 其次,單菌株的誘變育種。本研究對分離篩選出的菌株F2進行物理單因素誘變——紫外線誘變,以及物理化學(xué)復(fù)合因素誘變——紫外線-氯化鋰誘變。共長出菌落7280個左右,其中紫外線誘變后長出3510個左右,紫外線-氯化鋰誘變后長出菌落3770個左右。經(jīng)革蘭氏碘液初篩共篩出154株正突變株,酶活力復(fù)篩篩出8株,通過酶活穩(wěn)定性分析,最終確定一株由紫外線-氯化鋰誘變產(chǎn)生的穩(wěn)定性較好的菌株——69號菌株,其酶活力值為0.31mg/ml,為出發(fā)菌株的1.4倍。 最后,突變菌株培養(yǎng)條件優(yōu)化。通過分別測定最佳氮源、碳源含量、氮源含量,以及碳源和氮源、...

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 纖維素
        1.1.1 纖維素
        1.1.2 纖維素酶
        1.1.3 纖維素酶產(chǎn)生菌
    1.2 誘變選育
        1.2.1 誘變育種
        1.2.2 誘變劑及其誘變機制
        1.2.3 篩選方法
    1.3 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.3.1 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.3.2 國外研究現(xiàn)狀
        1.3.3 目前存在的問題
    1.4 研究目的和主要內(nèi)容
第二章 秸稈纖維素降解菌的分離純化與酶活力測定
    2.1 實驗材料
        2.1.1 試驗菌群
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 試驗藥品及試劑
        2.1.4 儀器
    2.2 試驗方法
        2.2.1 纖維素降解群5號菌群的分離純化
        2.2.2 菌種鑒定
        2.2.3 酶活力測定
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 菌群的分離純化
        2.3.2 菌種鑒定
        2.3.3 酶活力測定
    2.4 結(jié)論
第三章 誘變育種
    3.1 試驗材料
        3.1.1 試驗菌株
        3.1.2 培養(yǎng)基
        3.1.3 試驗藥品、試劑及材料
        3.1.4 儀器
    3.2 試驗方法
        3.2.1 初篩試劑的選擇
        3.2.2 菌種的活化
        3.2.3 菌株誘變
        3.2.4 篩選
        3.2.5 酶活力測定
        3.2.6 酶活穩(wěn)定性分析
    3.3 結(jié)果分析
        3.3.1 初篩試劑選擇結(jié)果
        3.3.2 誘變結(jié)果
        3.3.3 標準曲線的繪制
        3.3.4 篩選結(jié)果
        3.3.5 酶活穩(wěn)定性分析
    3.4 結(jié)論
第四章 誘變菌株培養(yǎng)條件優(yōu)化
    4.1 實驗材料
        4.1.1 試驗菌株
        4.1.2 培養(yǎng)基
        4.1.3 試驗藥品和試劑
        4.1.4 儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 種子液的制備
        4.2.2 培養(yǎng)時間對產(chǎn)酶影響
        4.2.3 氮源對產(chǎn)酶的影響
        4.2.4 秸稈含量對產(chǎn)酶影響
        4.2.5 氮源的含量對產(chǎn)酶影響
        4.2.6 碳源、氮源和溫度正交實驗
    4.3 結(jié)果分析
        4.3.1 培養(yǎng)時間產(chǎn)酶情況
        4.3.2 不同氮源產(chǎn)酶影響
        4.3.3 秸稈含量對產(chǎn)酶影響
        4.3.4 氮源含量對產(chǎn)酶影響
        4.3.5 碳源、氮源和溫度正交實驗
    4.4 結(jié)論
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
發(fā)表論文和科研情況說明
致謝



本文編號：3868187