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一株絮凝細(xì)菌的篩選鑒定及其絮凝機(jī)理的研究

發(fā)布時(shí)間:2023-10-17 19:22
  微生物絮凝劑作為一種新型絮凝劑,具有傳統(tǒng)絮凝劑所不具有的優(yōu)勢(shì)。本研究從山東理工大學(xué)的校園土壤、淄博化工廠內(nèi)的土壤、淄博污水處理廠的活性污泥中篩選出63株純菌落,其中細(xì)菌35株,真菌28株。通過(guò)高嶺土懸液測(cè)定其絮凝活性,最后篩選出具有絮凝活性的細(xì)菌22株,真菌20株。其中從校園土壤中篩選出的B-15菌株表現(xiàn)出了最高的絮凝效率。其對(duì)高嶺土絮凝活性達(dá)到90.98%。本文對(duì)B-15進(jìn)行了鑒定和絮凝機(jī)理的研究。 通過(guò)對(duì)其形態(tài)觀察和生理生化特征的研究以及16SrRNA序列分析,本研究鑒定B-15為解淀粉芽孢桿菌。B-15的最佳培養(yǎng)條件為:碳源為蔗糖,氮源為硫酸銨,發(fā)酵培養(yǎng)基的最佳初始pH為6,發(fā)酵時(shí)間為84h。 B-15的絮凝活性物質(zhì)是細(xì)菌分泌至胞外的代謝產(chǎn)物,而不是菌體細(xì)胞本身。經(jīng)過(guò)分離提純后,測(cè)得B-15產(chǎn)生的絮凝劑的主要成分是糖類(lèi),含有少量的蛋白質(zhì)。該絮凝劑的熱穩(wěn)定性性極好,高溫處理后絮凝活性幾乎不受影響。B-15與高嶺土懸浮顆粒間主要靠離子鍵結(jié)合。B-15借助離子鍵進(jìn)行“吸附架橋”將顆粒聚合在一起,形成沉淀。

【文章頁(yè)數(shù)】:56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
第一章 引言
    1 絮凝劑的種類(lèi)和研究進(jìn)展
        1.1 無(wú)機(jī)絮凝劑
        1.2 有機(jī)高分子絮凝劑
        1.3 微生物絮凝劑
    2 微生物絮凝劑與絮凝微生物的種類(lèi)
        2.1 微生物絮凝劑的種類(lèi)
        2.2 絮凝微生物的種類(lèi)
    3 微生物絮凝劑的絮凝機(jī)理
        3.1 “吸附架橋理論”
        3.2 電性中和機(jī)理
        3.3 化學(xué)反應(yīng)機(jī)理
    4 影響微生物絮凝劑絮凝效率的因素
        4.1 膠體顆粒表面電荷的影響
        4.2 反應(yīng)條件的影響
    5 培養(yǎng)條件對(duì)微生物絮凝劑絮凝活性的影響
        5.1 碳源對(duì)絮凝微生物絮凝活性的影響
        5.2 氮源對(duì)絮凝微生物絮凝活性的影響
        5.3 無(wú)機(jī)鹽離子對(duì)絮凝微生物絮凝活性的影響
        5.4 培養(yǎng)基初始pH對(duì)絮凝微生物絮凝活性的影響
        5.5 培養(yǎng)溫度對(duì)絮凝微生物絮凝活性的影響
        5.6 培養(yǎng)時(shí)間對(duì)絮凝微生物絮凝活性的影響
    6 研究現(xiàn)狀及本課題的目的意義
第二章 絮凝菌的分離與篩選
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 菌種來(lái)源
        1.2 主要試劑與藥品
        1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        1.4 培養(yǎng)基
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 培養(yǎng)基的制備
        2.2 菌種的篩選
        2.3 菌種絮凝能力的研究
        2.4 染色觀察
            2.4.1 細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色
            2.4.2 真菌的染色
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 絮凝菌的分離篩選及絮凝活性的測(cè)定
        3.2 對(duì)高效絮凝菌的染色觀察
    4 結(jié)論
第三章 菌種的鑒定
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑與藥品
        1.4 培養(yǎng)基
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 形態(tài)學(xué)觀察
            2.1.1 菌落形態(tài)觀察
            2.1.2 革蘭氏染色與芽孢染色
        2.2 生理生化特征
        2.3 總基因組DNA的提取檢測(cè)
        2.4 16SrRNA特異性片段的擴(kuò)增
        2.5 瓊脂糖凝膠電泳純化擴(kuò)增產(chǎn)物
        2.6 基因測(cè)序及序列比對(duì)
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 形態(tài)學(xué)觀察
            3.1.1 菌落的形態(tài)
            3.1.2 染色結(jié)果
        3.2 生理生化特征
        3.3 基因組DNA的提取
        3.4 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)
        3.5 目的基因純化回收
        3.6 基因測(cè)序及基因的序列分析
            3.6.1 B-15的測(cè)序結(jié)果及序列分析
            3.6.2 系統(tǒng)發(fā)育分析
    4 討論
第四章 絮凝菌B-15培養(yǎng)條件的優(yōu)化
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑與藥品
        1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        1.4 培養(yǎng)基
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 B-15培養(yǎng)條件的優(yōu)化
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 不同碳源對(duì)絮凝菌B-15絮凝活性的影響
        3.2 不同氮源對(duì)絮凝菌B-15絮凝活性的影響
        3.3 不同pH培養(yǎng)對(duì)絮凝菌B-15絮凝活性的影響
        3.4 不同培養(yǎng)時(shí)間對(duì)絮凝菌B-15絮凝活性的影響
第五章 絮凝菌B-15的絮凝機(jī)理的研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑與藥品
        1.4 培養(yǎng)基
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 絮凝活性的分布
        2.2 絮凝劑熱穩(wěn)定性的測(cè)定
        2.3 絮凝劑的提取和純化
        2.4 B-15產(chǎn)生的絮凝劑的成分分析
            2.4.1 B-15產(chǎn)生的絮凝劑總蛋白的測(cè)定
            2.4.2 B-15產(chǎn)生的絮凝劑總含糖量的測(cè)定
            2.4.3 紅外光譜掃描分析B-15產(chǎn)生的絮凝劑中的特征基團(tuán)
        2.5 絮凝顆粒的形態(tài)分析
        2.6 絮凝劑與高嶺土顆粒間的結(jié)合建檢驗(yàn)
        2.7 絮凝過(guò)程Zeta(ξ)電位的測(cè)定
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 絮凝活性的分布
        3.2 絮凝劑熱穩(wěn)定性的測(cè)定
        3.3 B-15產(chǎn)生的絮凝劑的成分分析
            3.3.1 總蛋白和總含糖量的測(cè)定
            3.3.2 紅外光譜掃描分析B-15中的特征基團(tuán)
        3.4 絮凝前后高嶺土形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化
        3.5 絮凝劑與高嶺土顆粒之間結(jié)合鍵檢驗(yàn)
        3.6 絮凝過(guò)程與Zeta(ξ)電位的關(guān)系
    4 討論
結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3854859

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