城市剩余污泥中病原菌的含量較高，處理不當(dāng)甚至不予處置都會(huì)給公共衛(wèi)生安全帶來(lái)威脅。基于傳統(tǒng)的培養(yǎng)法定量檢測(cè)技術(shù)，大量研究報(bào)道認(rèn)為厭氧消化過(guò)程能夠有效地殺滅污泥中的病原菌，使厭氧消化污泥能夠達(dá)標(biāo)排放；但基于核酸分子的定量檢測(cè)結(jié)果卻發(fā)現(xiàn)達(dá)標(biāo)排放的消化污泥中病原菌的含量仍處于較高的水平�？紤]到常見病原菌，如腸道病原菌等在不良的生存環(huán)境條件下會(huì)進(jìn)入“有活性但不可培養(yǎng)（Viablebutnon-culturable,VBNC）”狀態(tài)，病原菌VBNC狀態(tài)的存在使得在利用傳統(tǒng)的培養(yǎng)法檢測(cè)技術(shù)評(píng)價(jià)消化污泥的生物安全性時(shí)存在低估的風(fēng)險(xiǎn)。本文的主要研究?jī)?nèi)容為綜合比較傳統(tǒng)的培養(yǎng)法定量技術(shù)和現(xiàn)代的分子生物學(xué)手段，對(duì)污泥厭氧消化過(guò)程中三種典型的腸道病原菌（大腸桿菌、沙門氏菌和志賀氏菌）VBNC狀態(tài)的發(fā)生情況和發(fā)生機(jī)制進(jìn)行研究。主要研究結(jié)果可表述如下： 針對(duì)污泥樣品成分復(fù)雜，PCR反應(yīng)抑制物質(zhì)（如蛋白質(zhì)，脂類及腐殖酸等）含量高的特點(diǎn)，發(fā)展了一種適合于污泥樣品中總細(xì)菌RNA提取的實(shí)驗(yàn)方法。在提取的RNA樣品純度和完整性滿足后續(xù)的PCR要求的基礎(chǔ)上，結(jié)合傳統(tǒng)的培養(yǎng)法檢測(cè)技術(shù)和反轉(zhuǎn)錄定量PCR技術(shù)（Reverse tra...

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
第一章 緒論
    1.1 污泥的厭氧消化處理研究進(jìn)展
        1.1.1 我國(guó)市政剩余污泥的產(chǎn)生現(xiàn)狀
        1.1.2 污泥的厭氧消化工藝的特點(diǎn)
        1.1.3 污泥厭氧消化過(guò)程中病原菌的殺滅的研究進(jìn)展
    1.2 細(xì)菌的有活性不可培養(yǎng)狀態(tài)的研究進(jìn)展
        1.2.1 細(xì)菌的有活性不可培養(yǎng)狀態(tài)存在
        1.2.2 VBNC狀態(tài)病原菌的毒力殘留性
        1.2.3 細(xì)菌VBNC狀態(tài)的誘導(dǎo)因素
        1.2.4 細(xì)菌VBNC狀態(tài)檢測(cè)方法的研究進(jìn)展
    1.3 論文的研究意義、研究目標(biāo)和研究?jī)?nèi)容
        1.3.1 論文研究意義
        1.3.2 論文研究目標(biāo)
        1.3.3 論文主要研究?jī)?nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        2.1.2 剩余污泥
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)試劑及試劑盒
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 MPN分析方法
        2.2.2 qPCR定量分析方法
        2.2.3 RT-qPCR定量分析方法
        2.2.4 VBNC病原菌檢測(cè)方法適用性的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 不同污泥厭氧消化工藝中病原菌VBNC狀態(tài)發(fā)生實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 消化污泥的離心脫水和儲(chǔ)存過(guò)程中VBNC病原菌復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 VFA對(duì)沙門氏菌和大腸桿菌VBNC狀態(tài)發(fā)生的影響實(shí)驗(yàn)
        2.2.8 常規(guī)化學(xué)指標(biāo)分析方法
第三章 結(jié)果與討論
    3.1 VBNC狀態(tài)病原菌定量檢測(cè)方法的建立
        3.1.1 污泥RNA提取方法的優(yōu)化
        3.1.2 VBNC狀態(tài)病原菌定量檢測(cè)方法的建立
        3.1.3 VBNC狀態(tài)病原菌定量檢測(cè)方法適用性的驗(yàn)證
        3.1.4 階段小結(jié)
    3.2 不同污泥厭氧消化工藝對(duì)典型腸道病原菌VBNC狀態(tài)的影響
        3.2.1 污泥厭氧消化的運(yùn)行效果評(píng)價(jià)
        3.2.2 污泥厭氧消化過(guò)程中大腸桿菌濃度的變化
        3.2.3 污泥厭氧消化過(guò)程中沙門氏菌濃度的變化
        3.2.4 污泥厭氧消化過(guò)程中志賀氏菌濃度的變化
        3.2.5 病原菌qPCR定量結(jié)果和RT-qPCR定量結(jié)果的比較
        3.2.6 不同污泥厭氧消化工藝對(duì)病原菌VBNC狀態(tài)發(fā)生的影響
        3.2.7 階段小結(jié)
    3.3 消化污泥脫水和儲(chǔ)存過(guò)程中VBNC狀態(tài)病原菌的復(fù)蘇
        3.3.1 消化污泥脫水和儲(chǔ)存過(guò)程中大腸桿菌含量的變化
        3.3.2 消化污泥脫水和儲(chǔ)存過(guò)程中沙門氏菌含量的變化
        3.3.3 消化污泥脫水和儲(chǔ)存過(guò)程中志賀氏菌含量的變化
        3.3.4 消化污泥脫水和儲(chǔ)存過(guò)程中VBNC狀態(tài)病原菌的復(fù)蘇率變化
        3.3.5 階段小結(jié)
    3.4 VFA對(duì)病原菌VBNC狀態(tài)發(fā)生的影響
        3.4.1 VFA濃度對(duì)于可培養(yǎng)沙門氏菌濃度的影響
        3.4.2 VFA濃度對(duì)于沙門氏菌和大腸桿菌VBNC狀態(tài)發(fā)生的影響
        3.4.3 VFA對(duì)于污泥厭氧消化中沙門氏菌和大腸桿菌VBNC狀態(tài)發(fā)生的影響
        3.4.4 階段小結(jié)
主要結(jié)論與展望
    主要結(jié)論
    展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄：作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文



本文編號(hào)：3851964