城市剩余污泥中病原菌的含量較高，處理不當甚至不予處置都會給公共衛(wèi)生安全帶來威脅�；趥鹘y(tǒng)的培養(yǎng)法定量檢測技術，大量研究報道認為厭氧消化過程能夠有效地殺滅污泥中的病原菌，使厭氧消化污泥能夠達標排放；但基于核酸分子的定量檢測結(jié)果卻發(fā)現(xiàn)達標排放的消化污泥中病原菌的含量仍處于較高的水平。考慮到常見病原菌，如腸道病原菌等在不良的生存環(huán)境條件下會進入“有活性但不可培養(yǎng)（Viablebutnon-culturable,VBNC）”狀態(tài)，病原菌VBNC狀態(tài)的存在使得在利用傳統(tǒng)的培養(yǎng)法檢測技術評價消化污泥的生物安全性時存在低估的風險。本文的主要研究內(nèi)容為綜合比較傳統(tǒng)的培養(yǎng)法定量技術和現(xiàn)代的分子生物學手段，對污泥厭氧消化過程中三種典型的腸道病原菌（大腸桿菌、沙門氏菌和志賀氏菌）VBNC狀態(tài)的發(fā)生情況和發(fā)生機制進行研究。主要研究結(jié)果可表述如下： 針對污泥樣品成分復雜，PCR反應抑制物質(zhì)（如蛋白質(zhì)，脂類及腐殖酸等）含量高的特點，發(fā)展了一種適合于污泥樣品中總細菌RNA提取的實驗方法。在提取的RNA樣品純度和完整性滿足后續(xù)的PCR要求的基礎上，結(jié)合傳統(tǒng)的培養(yǎng)法檢測技術和反轉(zhuǎn)錄定量PCR技術（Reverse tra...

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
第一章 緒論
    1.1 污泥的厭氧消化處理研究進展
        1.1.1 我國市政剩余污泥的產(chǎn)生現(xiàn)狀
        1.1.2 污泥的厭氧消化工藝的特點
        1.1.3 污泥厭氧消化過程中病原菌的殺滅的研究進展
    1.2 細菌的有活性不可培養(yǎng)狀態(tài)的研究進展
        1.2.1 細菌的有活性不可培養(yǎng)狀態(tài)存在
        1.2.2 VBNC狀態(tài)病原菌的毒力殘留性
        1.2.3 細菌VBNC狀態(tài)的誘導因素
        1.2.4 細菌VBNC狀態(tài)檢測方法的研究進展
    1.3 論文的研究意義、研究目標和研究內(nèi)容
        1.3.1 論文研究意義
        1.3.2 論文研究目標
        1.3.3 論文主要研究內(nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗菌株
        2.1.2 剩余污泥
        2.1.3 實驗儀器
        2.1.4 實驗試劑及試劑盒
    2.2 實驗方法
        2.2.1 MPN分析方法
        2.2.2 qPCR定量分析方法
        2.2.3 RT-qPCR定量分析方法
        2.2.4 VBNC病原菌檢測方法適用性的驗證實驗
        2.2.5 不同污泥厭氧消化工藝中病原菌VBNC狀態(tài)發(fā)生實驗
        2.2.6 消化污泥的離心脫水和儲存過程中VBNC病原菌復蘇實驗
        2.2.7 VFA對沙門氏菌和大腸桿菌VBNC狀態(tài)發(fā)生的影響實驗
        2.2.8 常規(guī)化學指標分析方法
第三章 結(jié)果與討論
    3.1 VBNC狀態(tài)病原菌定量檢測方法的建立
        3.1.1 污泥RNA提取方法的優(yōu)化
        3.1.2 VBNC狀態(tài)病原菌定量檢測方法的建立
        3.1.3 VBNC狀態(tài)病原菌定量檢測方法適用性的驗證
        3.1.4 階段小結(jié)
    3.2 不同污泥厭氧消化工藝對典型腸道病原菌VBNC狀態(tài)的影響
        3.2.1 污泥厭氧消化的運行效果評價
        3.2.2 污泥厭氧消化過程中大腸桿菌濃度的變化
        3.2.3 污泥厭氧消化過程中沙門氏菌濃度的變化
        3.2.4 污泥厭氧消化過程中志賀氏菌濃度的變化
        3.2.5 病原菌qPCR定量結(jié)果和RT-qPCR定量結(jié)果的比較
        3.2.6 不同污泥厭氧消化工藝對病原菌VBNC狀態(tài)發(fā)生的影響
        3.2.7 階段小結(jié)
    3.3 消化污泥脫水和儲存過程中VBNC狀態(tài)病原菌的復蘇
        3.3.1 消化污泥脫水和儲存過程中大腸桿菌含量的變化
        3.3.2 消化污泥脫水和儲存過程中沙門氏菌含量的變化
        3.3.3 消化污泥脫水和儲存過程中志賀氏菌含量的變化
        3.3.4 消化污泥脫水和儲存過程中VBNC狀態(tài)病原菌的復蘇率變化
        3.3.5 階段小結(jié)
    3.4 VFA對病原菌VBNC狀態(tài)發(fā)生的影響
        3.4.1 VFA濃度對于可培養(yǎng)沙門氏菌濃度的影響
        3.4.2 VFA濃度對于沙門氏菌和大腸桿菌VBNC狀態(tài)發(fā)生的影響
        3.4.3 VFA對于污泥厭氧消化中沙門氏菌和大腸桿菌VBNC狀態(tài)發(fā)生的影響
        3.4.4 階段小結(jié)
主要結(jié)論與展望
    主要結(jié)論
    展望
致謝
參考文獻
附錄：作者在攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文



本文編號：3851964