發(fā)布時(shí)間：2023-05-06 17:57

　　中國(guó)是世界上秸稈資源最豐富的國(guó)家之一。利用農(nóng)作物秸稈進(jìn)行厭氧發(fā)酵產(chǎn)沼氣，是一條清潔高效的秸稈能源化利用途徑，但在秸稈沼氣發(fā)酵過程中存在著產(chǎn)氣不穩(wěn)定等問題。因此，明確沼氣發(fā)酵中的微生物群落，可為摸清以農(nóng)作物秸稈為原料的厭氧沼氣發(fā)酵規(guī)律，優(yōu)化厭氧發(fā)酵工藝，保證厭氧反應(yīng)器穩(wěn)定運(yùn)行及提高沼氣產(chǎn)氣率提供理論依據(jù)。 本文采用現(xiàn)代分子生物學(xué)分析方法，通過基于PCR的T-RFLP和克隆文庫構(gòu)建相結(jié)合的研究方法，對(duì)秸稈沼氣工程中細(xì)菌、甲烷古菌與厭氧纖維素降解菌的群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，結(jié)果表明： (1)供試秸稈沼氣發(fā)酵體系中細(xì)菌種類十分豐富，主要屬于七大類群，分別為Firmicutes（厚壁菌門）、Bacteroidetes（擬桿菌門）、Proteobacteria（變形菌門）、Chloroflexi（綠彎菌門）、Tenericutes（無壁菌門）、Actinobacteria（放線菌）和Synergistetes。其中以變形菌門、厚壁菌門和擬桿菌門為主，三者分別占庫容40.48%、30.1%與21.45%。其中的的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌共有5種，經(jīng)與Genebank中數(shù)據(jù)比較，分別類似于Thermopolyspora f...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 中國(guó)規(guī)模化秸稈沼氣工程現(xiàn)狀
        1.1.1 秸稈的分布特征及特性
        1.1.2 秸稈原料預(yù)處理方法
        1.1.3 秸稈沼氣發(fā)酵工藝類型
        1.1.4 沼氣利用方式
    1.2 沼氣發(fā)酵厭氧生物降解過程
        1.2.1 厭氧消化過程
        1.2.2 不產(chǎn)甲烷菌和產(chǎn)甲烷菌的關(guān)系
        1.2.3 厭氧纖維素降解菌在秸稈沼氣工程中的作用
    1.3 秸稈沼氣工程中微生物群落研究方法
        1.3.1 分子生物學(xué)研究微生物的方法
        1.3.2 末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（T-RFLP）技術(shù)
    1.4 研究目的和意義
第二章 我國(guó)規(guī)�；斩捳託夤こ陶{(diào)研與樣品采集
    2.1 秸稈沼氣工程調(diào)研方法與內(nèi)容
        2.1.1 調(diào)研范圍
        2.1.2 調(diào)研內(nèi)容
        2.1.3 我國(guó)規(guī)模化秸稈沼氣工程的總體狀況
    2.2 樣品采集
第三章 秸稈沼氣工程中細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)分析
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 厭氧污泥樣品來源
        3.1.2 分子生物學(xué)試劑及培養(yǎng)基
        3.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器及實(shí)驗(yàn)耗材
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 基因組 DNA 提取
        3.2.2 末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（T-RFLP）分析
        3.2.3 克隆文庫構(gòu)建
    3.3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.3.1 基因組 DNA 提取結(jié)果
        3.3.2 細(xì)菌 T-RFLP 結(jié)果分析
        3.3.3 克隆文庫
        3.3.4 T-RFLP 與克隆文庫結(jié)果結(jié)合分析
    3.4 小結(jié)
第四章 秸稈沼氣工程中古菌群落結(jié)構(gòu)分析
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 基因組 DNA 提取
        4.2.2 T-RFLP 方法
        4.2.3 克隆文庫方法
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        4.3.1 細(xì)菌 T-RFLP 結(jié)果分析
        4.3.2 克隆文庫
        4.3.3 T-RFLP 與克隆文庫結(jié)果結(jié)合分析
    4.4 小結(jié)
第五章 秸稈沼氣工程中纖維素降解菌的多樣性分析及菌株初步分離
    5.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.1 厭氧污泥樣品來源
        5.1.2 分子生物學(xué)試劑及培養(yǎng)基
        5.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器及實(shí)驗(yàn)耗材
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 基因組 DNA 提取
        5.2.2 末端限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（T-RFLP）分析
        5.2.3 克隆文庫構(gòu)建
        5.2.4 厭氧纖維素菌初步分離
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        5.3.1 Cel48 基因 T-RFLP 結(jié)果分析
        5.3.2 克隆文庫
        5.3.3 T-RFLP 與克隆文庫結(jié)果結(jié)合分析
        5.3.4 厭氧纖維素菌初步分離
    5.4 小結(jié)
第六章 結(jié)論及工作展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 工作展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3809361