羽毛廢棄物中含有豐富的角蛋白,若加以適當(dāng)處理可將其轉(zhuǎn)換為可利用的氨基酸,使用物理方法、化學(xué)方法進(jìn)行處理會(huì)對(duì)環(huán)境造成很大的污染。采用微生物降解法既可避免對(duì)環(huán)境造成污染,又可以將其有效的轉(zhuǎn)換為可利用蛋白質(zhì)。 本文從土壤中篩選出兩株以羽毛作為唯一的碳源和氮源,能高效降解羽毛的細(xì)菌GZD-23與LFJ-11。經(jīng)形態(tài)學(xué)、生理生化和16SrDNA鑒定,初步確定GZD-23為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis), LFJ-11菌株為巨大芽孢桿菌(Bacillus megatherium),目前在國(guó)內(nèi)還未見(jiàn)有巨大芽孢桿菌降解羽毛的報(bào)道。 對(duì)菌株GZD-23和LFJ-11產(chǎn)角蛋白酶的發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化并對(duì)其所產(chǎn)角蛋白粗酶的酶學(xué)特性進(jìn)行了研究。 對(duì)菌株GZD-23產(chǎn)角蛋白酶的發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)在外加碳源蔗糖與外加氮源蛋白胨的條件下,產(chǎn)酶能力分別比對(duì)照組增加了50%和23.7%。該菌株發(fā)酵產(chǎn)酶的最適pH為8；最適溫度為30℃；轉(zhuǎn)速為100rpm；最適接種量為7%；羽毛含量為20g/L；裝液量對(duì)產(chǎn)酶能力影響不大。 對(duì)GZD-23菌株所產(chǎn)角蛋白粗酶的酶學(xué)特性進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)其最適反應(yīng)溫度為60...

【文章頁(yè)數(shù)】：83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 角蛋白的結(jié)構(gòu)
    1.2 羽毛角蛋白廢棄物的處理方法
        1.2.1 物理法
        1.2.2 化學(xué)法
        1.2.3 生物法
    1.3 角蛋白的研究進(jìn)展
        1.3.1 降解角蛋白的微生物研究進(jìn)展
        1.3.2 角蛋白酶的分子量
        1.3.3 角蛋白酶的分類(lèi)
        1.3.4 角蛋白酶的理化性質(zhì)
        1.3.5 角蛋白酶的作用機(jī)制
        1.3.6 角蛋白酶的發(fā)酵條件現(xiàn)狀
    1.4 角蛋白酶的應(yīng)用
        1.4.1 農(nóng)業(yè)方面
        1.4.2 醫(yī)藥方面
        1.4.3 制革行業(yè)
        1.4.4 環(huán)境方面
    1.5 本課題的研究目的意義、內(nèi)容以及技術(shù)路線
        1.5.1 研究目的與意義
        1.5.2 研究?jī)?nèi)容
        1.5.3 技術(shù)路線
第二章 羽毛角蛋白降解菌的分離篩選與鑒定
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.2 試劑
        2.1.3 培養(yǎng)基
        2.1.4 土壤樣品
        2.1.5 羽毛
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 選擇性富集培養(yǎng)
        2.2.2 菌株的分離、篩選
        2.2.3 角蛋白酶活的測(cè)定
        2.2.4 可溶性蛋白含量的測(cè)定
        2.2.5 菌株的保存
        2.2.6 菌株的鑒定
        2.2.7 系統(tǒng)發(fā)育分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 可溶性蛋白含量標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        2.3.2 菌株分離篩選的結(jié)果
        2.3.4 菌株的生理生化鑒定
        2.3.5 菌株的16S rDNA鑒定與系統(tǒng)發(fā)育分析
    2.4 本章小結(jié)
第三章 羽毛角蛋白降解菌發(fā)酵產(chǎn)角蛋白粗酶條件研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.2 試劑
        3.1.3 培養(yǎng)基
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)菌株
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 菌株所產(chǎn)角蛋白酶的定位
        3.2.2 菌株產(chǎn)酶條件的優(yōu)化
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 菌株所產(chǎn)角蛋白酶的定位
        3.3.2 不同外加速效碳源對(duì)菌株產(chǎn)角蛋白粗酶的影響
        3.3.3 不同外加氮源對(duì)菌株產(chǎn)角蛋白粗酶的影響
        3.3.4 初始pH對(duì)菌株產(chǎn)角蛋白粗酶的影響
        3.3.5 羽毛含量對(duì)菌株產(chǎn)角蛋白粗酶的影響
        3.3.6 轉(zhuǎn)速對(duì)菌株角蛋白粗酶的影響
        3.3.7 溫度對(duì)菌株產(chǎn)酶的影響
        3.3.8 接種量對(duì)菌株產(chǎn)角蛋白粗酶的影響
        3.3.9 裝液量對(duì)菌株產(chǎn)酶的影響
    3.4 本章小結(jié)
第四章 羽毛角蛋白降解菌所產(chǎn)角蛋白粗酶的特性研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.1.2 試劑
        4.1.3 培養(yǎng)基
        4.1.4 實(shí)驗(yàn)菌株
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 不同溫度對(duì)菌株角蛋白粗酶活的影響
        4.2.2 不同pH對(duì)菌株角蛋白粗酶活的影響
        4.2.3 金屬離子菌株角蛋白酶活的影響
        4.2.4 不同化學(xué)試劑菌株角蛋白粗酶活的影響
        4.2.5 菌株角蛋白粗酶的動(dòng)力學(xué)特性
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 不同溫度對(duì)菌株角蛋白粗酶活的影響
        4.3.2 不同pH對(duì)菌株角蛋白粗酶活的影響
        4.3.3 金屬離子對(duì)角蛋白所產(chǎn)粗酶的影響
        4.3.4 不同化學(xué)試劑對(duì)角蛋白所產(chǎn)粗酶的影響
        4.3.5 菌株角蛋白粗酶的動(dòng)力學(xué)特性
    4.4 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào)：3759091