海洋微生物正常的棲居環(huán)境主要是海洋水體,相比與陸地,海洋環(huán)境有高壓、高鹽、低溫和稀營養(yǎng)等特點(diǎn),這使海洋微生物與陸地微生物在生理性質(zhì)和理化性質(zhì)方面產(chǎn)生較大差別。由于海洋微生物特殊的生理特性,使其產(chǎn)生結(jié)構(gòu)獨(dú)特、功能多樣的活性物質(zhì),而開發(fā)利用這些海洋微生物產(chǎn)生的活性物質(zhì),使其更好的服務(wù)人類成為了當(dāng)今世界的焦點(diǎn)。本論文主要以采自具有腐爛病狀的海帶作為樣品,從中篩選分離得到褐藻酸降解酶的海洋微生物1號菌株與2號菌株,同時(shí)對1號菌株與2號菌株生長特性、發(fā)酵產(chǎn)酶的最佳培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究。 本論文采用固液交替培養(yǎng)法對菌株進(jìn)行活化,并利用固體分離平板培養(yǎng)基對菌種進(jìn)行分離純化,便于后期的觀察和部分試驗(yàn)操作。試驗(yàn)過程中采用的兩種菌株：1號菌株與2號菌株均為褐藻膠降解酶的產(chǎn)生菌株。本論文為了確定海洋微生物褐藻酸降解菌1號菌株與2號菌株產(chǎn)酶的較佳培養(yǎng)條件,采用了DNS法測定菌株發(fā)酵產(chǎn)酶活力,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,最佳培養(yǎng)條件為：接種量7%,培養(yǎng)基裝量30mL,培養(yǎng)溫度26℃；培養(yǎng)基最佳pH值8.0；培養(yǎng)時(shí)間4d；最佳培養(yǎng)基組成為：海藻酸鈉濃度為0.4%;玉米漿濃度為1.0%；混合碳源濃度(蔗糖濃度)為1%,最佳NaCl...

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 論文綜述
    1.1 海洋微生物及其多樣性
        1.1.1 海洋微生物簡介
        1.1.2 海洋微生物的物種多樣性
        1.1.3 海洋微生物的遺傳多樣性
        1.1.4 海洋微生物的產(chǎn)酶特性
    1.2 褐藻酸降解菌與海帶病爛
        1.2.1 世界上的藻類植物
        1.2.2 藻類植物的用途
        1.2.3 海帶的病爛原因受到重視
        1.2.4 褐藻酸降解菌入侵海帶的過程分析
    1.3 褐藻膠的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其理化性質(zhì)
        1.3.1 褐藻膠的化學(xué)結(jié)構(gòu)
        1.3.2 褐藻膠的理化性質(zhì)
            1.3.2.1 溶解性
            1.3.2.2 凝膠特性
            1.3.2.3 黏度
    1.4 海藻多糖降解酶的來源
        1.4.1 海洋動(dòng)物
        1.4.2 海洋微生物
    1.5 海藻多糖降解酶的分類
        1.5.1 瓊膠酶
        1.5.2 卡拉膠酶
        1.5.3 褐藻膠裂合酶
    1.6 海藻多糖的生物活性
        1.6.1 整腸和解毒作用
        1.6.2 降血糖作用
        1.6.3 降血脂作用
        1.6.4 免疫調(diào)節(jié)作用
        1.6.5 抗病毒活性
        1.6.6 抗氧化作用
        1.6.7 其他方面的作用
    1.7 褐藻膠酶的生物功能
        1.7.1 褐藻膠酶在不產(chǎn)褐藻膠生物體內(nèi)的功能
        1.7.2 褐藻膠在產(chǎn)褐藻膠生物體內(nèi)的功能
    1.8 褐藻酸酶的應(yīng)用價(jià)值
        1.8.1 褐藻膠寡糖的制備
        1.8.2 原生質(zhì)體的分離
        1.8.3 醫(yī)療方面的應(yīng)用
    1.9 褐藻酸及褐藻酸鹽的發(fā)展前景
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)備
        2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)備
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)藥品
        2.1.3 褐藻酸降解菌
        2.1.4 液體種子培養(yǎng)基
        2.1.5 發(fā)酵培養(yǎng)基
        2.1.6 固體試管斜面
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 褐藻酸降解菌的菌株鑒定
            2.2.1.1 細(xì)菌菌落的形態(tài)特征觀察
            2.2.1.2 細(xì)菌細(xì)胞的形態(tài)特征觀察
            2.2.1.3 簡單染色
            2.2.1.4 革蘭氏染色
        2.2.2 褐藻酸降解菌1的16s rDNA擴(kuò)增與序列測定
        2.2.3 褐藻酸降解菌1的16s rDNA的序列分析與系統(tǒng)發(fā)育樹的建立
        2.2.4 福藻酸酶酶活性測定方法的建立（葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線）
        2.2.5 酶活力的測定方法
        2.2.6 營養(yǎng)組分對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
            2.2.6.1 不同碳源對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
            2.2.6.2 碳源濃度對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
            2.2.6.3 不同氮源對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
            2.2.6.4 氮源濃度對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
            2.2.6.5 混合碳源對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
        2.2.7 褐藻酸降解菌產(chǎn)酶發(fā)酵條件優(yōu)化
            2.2.7.1 培養(yǎng)時(shí)間對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
            2.2.7.2 培養(yǎng)溫度對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
            2.2.7.3 培養(yǎng)基初始pH對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
            2.2.7.4 種子接入量對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
            2.2.7.5 培養(yǎng)基裝量對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
            2.2.7.6 氯化鈉質(zhì)量濃度對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
        2.2.8 褐藻酸降解菌較佳發(fā)酵條件實(shí)驗(yàn)
第三章 結(jié)果與討論
    3.1 細(xì)菌菌落的形態(tài)特征觀察
    3.2 細(xì)菌細(xì)胞的形態(tài)特征觀察
        3.2.1 簡單染色
        3.2.2 革蘭氏染色
    3.3 褐藻酸降解菌的鑒定
        3.3.1 褐藻酸降解菌1的16s rDNA序列擴(kuò)增結(jié)果
        3.3.2 褐藻酸降解菌1的16s rDNA序列分析
        3.3.3 褐藻酸降解菌1的系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建
    3.4 營養(yǎng)組分對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
        3.4.1 不同碳源對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.2 碳源濃度對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
        3.4.3 不同氮源對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
        3.4.4 氮源濃度對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
        3.4.5 混合碳源對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
    3.5 褐藻酸降解菌產(chǎn)酶發(fā)酵條件優(yōu)化
        3.5.1 培養(yǎng)時(shí)間對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
        3.5.2 培養(yǎng)溫度對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
        3.5.3 培養(yǎng)基初始pH對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
        3.5.4 種子接入量對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
        3.5.5 培養(yǎng)基裝量對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
        3.5.6 NaCl質(zhì)量濃度對褐藻酸降解菌產(chǎn)酶的影響
    3.6 褐藻酸降解菌株產(chǎn)酶較佳發(fā)酵條件實(shí)驗(yàn)
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄A



本文編號：3749996